| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
AH-3960 acts on the type-1 parathyroid hormone receptor (PTHR1). It binds to the receptor's transmembrane domain (TMD) region and does not require interactions with the amino-terminal extracellular domain (ECD). [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
AH-3960 在 PTHR1 上表现出弱激动剂活性。在瞬时转染表达 PTHR1 的 HEK-293 衍生 GS-22A 细胞中，该化合物可诱导显著的 cAMP 反应，但其强度远弱于 PTH(1-34)。在 3×10⁻⁵ M 配体浓度下，cAMP 水平较基础水平最大增幅约为 22 倍 (P = 0.0007)。[1] 在 GP-2.3 细胞（稳定表达 PTHR1 和 Glosensor cAMP 报告基因）中，AH-3960 在 1 μM 至 300 μM 的剂量范围内可诱导 cAMP 水平显著且呈剂量依赖性升高（较基础水平最大增幅为 73 倍，P = 0.002）。 [1]
AH-3960在G2R-5细胞（稳定表达PTHR2）中的活性显著降低，表明其对PTHR1的选择性高于PTHR2。[1] AH-3960不仅对野生型PTHR1和单突变体受体（PTHR1-H223R、PTHR1-T410P）具有激动剂活性，而且对双突变体PTHR1-HR/TP（H223R/T410P）也具有激动剂活性。它是唯一被发现能作为PTHR1-HR/TP的明确cAMP激动剂的配体。剂量反应分析证实，AH-3960作为双突变受体的激动剂，可使cAMP达到最大值，且该最大值甚至高于PTH(1-34)作用于野生型PTHR1时所达到的水平。[1] 在解离时间进程实验中，AH-3960（1×10⁻⁵ M）并未显著改变¹²⁵I-PTH(1-34)或¹²⁵I-M-PTH(1-15)从PTHR1-WT上的解离速率，尽管它略微减缓了¹²⁵I-PTH(1-34)的解离速率。[1] |
| 酶活实验 |
在瞬时转染表达完整野生型PTHR1或PTHR1-delNT（缺乏胞外结构域）的COS-7细胞制备的细胞膜上进行了放射性配体竞争实验。所用的示踪放射性配体为¹²⁵I-PTH(1-34)和¹²⁵I-M-PTH(1-15)。在完整PTHR1上，最高测试浓度（100 μM）的AH-3960仅部分抑制（约40%）¹²⁵I-PTH(1-34)的结合，而对¹²⁵I-M-PTH(1-15)的结合抑制更为完全（约90%），表观亲和力（pIC50）为4.78 ± 0.22（相当于约16 μM）。在 PTHR1-delNT 上，AH-3960 以最大效力和表观亲和力（pIC50 = 5.47 ± 0.04，相当于 ~3.4 μM）抑制 ¹²⁵I-M-PTH(1-15) 的结合，其效果与在完整 PTHR1 上观察到的相似。[1]
进行了解离时间进程实验。将 GP-2.3 细胞（稳定表达 PTHR1-WT）制备的膜与 ¹²⁵I-PTH(1-34) 或 ¹²⁵I-M-PTH(1-15) 放射性配体预结合 90 分钟。然后，加入过量（5×10⁻⁷ M）的未标记 PTH(1-34) 或 M-PTH(1-15)，单独加入（对照组）或在 AH-3960（1×10⁻⁵ M）存在下加入。此后在不同时间点取出等分试样，真空过滤，并计数结合的放射性。AH-3960 并未引起两种放射性配体解离速率的显著变化。[1] |
| 细胞实验 |
本研究使用了稳定表达基于荧光素酶的 Glosensor cAMP 报告基因的 HEK-293 衍生 GS-22A 细胞。这些细胞进一步瞬时转染了编码 PTHR1 的质粒。细胞用荧光素预处理 20 分钟，然后用不同浓度的 AH-3960 处理。每隔 2 分钟实时测量一次细胞内 cAMP 与 Glosensor 报告基因结合产生的发光强度。配体剂量反应曲线是利用峰值反应时间（通常在加入配体后 20 分钟）获得的数据生成的。[1]
也使用了稳定表达 PTHR1（GP-2.3 细胞）或 PTHR2（G2R-5 细胞）的 GS-22A 衍生细胞。细胞用浓度范围为 1 μM 至 300 μM 的 AH-3960 处理，并记录 cAMP 依赖性发光。AH-3960 在 GP-2.3 细胞中诱导 cAMP 水平显著且呈剂量依赖性升高，但在 G2R-5 细胞中的活性则低得多。[1] 在瞬时转染表达各种组成型活性 PTHR1 突变体（PTHR1-H223R、PTHR1-T410P、PTHR1-HR/TP）的 GS-22A 细胞中进行时间进程分析。细胞预先用荧光素孵育 20 分钟，然后用 AH-3960 (1×10⁻⁵ M) 处理。 AH-3960 对每个单突变受体均表现出激动剂活性，并且是唯一能显著增加双突变受体 cAMP 水平的配体。[1] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
AH-3960 是一种非肽类小分子配体，可与 PTHR1 结合。此前研究已证实其可作为 PTHR1 的激动剂。它对野生型 PTHR1 具有激动剂活性，但其效力比 PTH(1-34) 弱几个数量级（EC50 值分别为 ~1×10⁻⁴ M 和 1×10⁻⁷ M）。该研究证实，AH-3960 通过与 PTHR1 的跨膜结构域 (TMD) 相互作用发挥其激动剂作用。[1]
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| 分子式 |
C13H22N4O3
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|---|---|
| 分子量 |
282.34
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| 精确质量 |
282.169
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| CAS号 |
862907-48-0
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| PubChem CID |
135508376
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| LogP |
1.782
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| tPSA |
109.73
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
20
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| 分子复杂度/Complexity |
445
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCCCN1C(=C(C(=O)N(C1=O)CCCC)C(=N)N)O
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| InChi Key |
VOYADQIFGGIKAT-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C13H22N4O3/c1-3-5-7-16-11(18)9(10(14)15)12(19)17(13(16)20)8-6-4-2/h18H,3-8H2,1-2H3,(H3,14,15)
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| 化学名 |
1,3-Dibutyl-5-(diaminomethylidene)-1,3-diazinane-2,4,6-trione
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| 别名 |
AH 3960 AH3960 AH-3960
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 100 mg/mL (~354.18 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.5418 mL | 17.7091 mL | 35.4183 mL | |
| 5 mM | 0.7084 mL | 3.5418 mL | 7.0837 mL | |
| 10 mM | 0.3542 mL | 1.7709 mL | 3.5418 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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