| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
AMCA-X SE targets primary amine groups (-NH2) on biomolecules, including the N-terminus and lysine side chains of proteins/peptides, and amine-modified nucleotides. It does not target biological receptors but is a chemical labeling reagent.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
制备储备液的最佳方法：1. 蛋白质制备：为获得理想的标记效果，添加 2 mg/mL 的蛋白质（抗体）。蛋白质溶液的理想 pH 值为 8.5±0.5。如果 pH 值低于 8.0，则使用 1 M 的蛋白质溶液。2) 蛋白质浓度低于 2 mg/mL 会导致标记效率显著降低。建议使用 2–10 mg/mL 的最终蛋白质浓度范围以获得最高的标记效率。3) 必须存在明显的蛋白质。制备染料时，在 AMCA-X-SE 小瓶中加入无水二甲基亚胺，配制成 10 mM 的储备液。3. 对于染料涂层制备过程，AMCA-X-SE 与化妆品的理想摩尔比约为 10，具体比例取决于待标记化妆品的数量。例如：如果所需的标记蛋白为 500 μL 浓度为 2 mg/mL 的 IgG（分子量=150,000），则将含有 1 mg AMCA-X-SE 的试管溶解于 100 μL DMSO 中。AMCA-X-SE 需要 3 μL 的量。精确的计算步骤如下：1) mmol (IgG) = mg/mL (IgG)×mL (IgG) / MW (IgG) = 2 mg/mL×0.5 mL / 150,000 mg/mmol = 6.7×10⁻⁶ mmol 2) mmol (AMCA-X-SE) = 毫摩尔 (IgG)×10 = 6.7×10⁻⁶ mmol×10 = 6.7×10⁻⁵ mmol 3) μL (AMCA-X-SE) = 毫摩尔 (AMCA-X-SE)×MW (AMCA-X-SE) / mg/μL (AMCA-X-SE) = 6.7×10⁻⁵ mmol×443 mg/mmol / 0.01 mg/μL = 3 μL (AMCA-X-SE) 使用说明 1. 标记反应 1：将计算好的新鲜配制的 10 mg/mL AMCA-X-SE 溶液逐渐加入到反应体系中将蛋白质样品溶液以 0.5 mL 的增量分次加入，轻轻摇晃混匀，然后快速离心，使样品沉淀在试管底部。2) 不要混合染色液。将反应管置于黑暗环境中。在初始条件下轻轻摇晃试剂 60 分钟。每隔 10 到 15 分钟轻轻旋转反应管数次，直至达到完全混合。2. 蛋白质封闭脱盐偶联：以下偶联过程以使用 Sephadex G-25 柱封闭染料偶联物为例。1) 按照制造商的说明制备 Sephadex G-25 柱。2) 将反应混合物加至 Sephadex G-25 柱的顶部。3) 当样品低于顶部树脂表面时，立即加入 PBS（pH 7.2–7.4）。4) 为完成柱收缩，向所需样品中加入额外的 PBS（pH 7.2–7.4）。将包含所选蛋白质-染料组合的成分混合。注意事项：1. 光照和湿度会影响 AMCA-X-SE 的标记效果。请立即配制 AMCA-X-SE 溶液，并丢弃任何剩余溶液。2. 20-50% 的甘油会降低标记效率，但低浓度的折叠钠（≤3 mM 或 0.02%）或硫柳汞（≤0.02 mM 或 0.01%）不会明显干扰蛋白质标记。3. 使用含有铵离子或伯胺（例如 Tris 或甘氨酸）的缓冲液，因为这些物质会与需要标记的蛋白质竞争。4. 本产品不适用于临床诊断或治疗；仅供专业科学研究使用。5. 为了您自身的健康和安全，请在操作过程中穿戴实验服和一次性手套。
在无细胞标记反应中，AMCA-X SE（琥珀酰亚胺酯）在 pH 8.0-9.0（最佳 pH 值约为 8.5）条件下与伯脂肪胺特异性反应，形成稳定的共价酰胺键。该染料具有高荧光量子产率，在紫外光激发下发出明亮的蓝色荧光。未反应的染料可通过尺寸排阻色谱或透析去除。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
AMCA-X SE 不用于体内活性测定。它的用途在于对纯化的蛋白质、抗体、肽或寡核苷酸进行体外标记，以便随后用于免疫测定、荧光显微镜、流式细胞术和其他检测方法。
|
| 酶活实验 |
标记反应在使用前立即进行，方法是将 AMCA-X SE 溶解于无水 DMF 或 DMSO 中（10 mg/mL）。蛋白质溶液（2 mg/mL）用 0.1 M 碳酸氢钠缓冲液（pH 8.5 +/- 0.5）配制。将染料以 10:1 的摩尔比（染料：蛋白质）分次少量加入蛋白质溶液中，并轻轻搅拌。反应在室温下避光进行 1-2 小时，并轻微搅拌。未结合的染料可通过透析或尺寸排阻色谱法去除。
|
| 细胞实验 |
由于该染料用于体外预标记纯化的生物分子，因此活细胞检测的标记方案不适用。对于抗体标记，将纯化的IgG（2 mg/mL，溶于PBS）用0.1 M碳酸氢盐缓冲液调节至pH 8.5。以10:1的摩尔比（染料：蛋白）分0.5 mL的增量加入AMCA-X SE（10 mg/mL，溶于DMSO），并轻轻混匀。在室温下避光孵育1-2小时后，通过PBS透析或尺寸排阻色谱法纯化标记的抗体，以去除游离染料。
|
| 动物实验 |
AMCA-X SE 不用于活体动物的体内研究。然而，标记的生物分子（例如，AMCA 标记的抗体或肽）可用于某些实验条件下的离体组织染色或体内成像。对于离体组织染色，将石蜡包埋或冷冻的组织切片与浓度为 4-10 μg/mL 的 AMCA 标记抗体在室温下孵育 1-2 小时，然后洗涤并用不含 DAPI 的封片剂封片。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
AMCA-X SE 是一种标记试剂，并非具有 ADME 特性的候选药物。该染料以固体粉末形式供应。在 -20℃ 避光防潮条件下储存可保持稳定。储备液用无水 DMF 或 DMSO 配制，浓度为 10 mg/mL，应立即使用。标记的缀合物在 4℃ 或 -20℃ 避光保存下可稳定数月至数年，具体稳定性取决于生物分子。激发/发射波长最大值：~350/450 nm。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于AMCA-X SE是一种用于体外应用而非体内应用的化学标记试剂，因此未记录其毒性数据。应遵循标准实验室安全预防措施：避免吸入、摄入和皮肤接触；使用个人防护装备；处理粉末或储备液时应在通风橱内进行；避光保存。根据机构指南处置废弃物。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
本品为仅供研究使用的荧光染料，并非已获批准的药品。它是一种香豆素衍生物，其核心结构为7-氨基-4-甲基香豆素，通过间隔基（X = 氨基己酸）与琥珀酰亚胺酯连接。AMCA-X SE广泛用于免疫荧光、流式细胞术和蛋白质印迹法中抗体的标记。分子式：C22H25N3O7；分子量：443.46；纯度：≥95%。
|
| 分子式 |
C22H25N3O7
|
|---|---|
| 分子量 |
443.4498
|
| 精确质量 |
429.19
|
| CAS号 |
216309-02-3
|
| PubChem CID |
59866294
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
3.342
|
| tPSA |
135.43
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
10
|
| 重原子数目 |
32
|
| 分子复杂度/Complexity |
806
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
CC1=C(C(=O)OC2=C1C=CC(=C2)N)CC(=O)NCCCCCC(=O)ON3C(=O)CCC3=O
|
| InChi Key |
QYSJBOMZRLAPJR-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C22H25N3O7/c1-13-15-7-6-14(23)11-17(15)31-22(30)16(13)12-18(26)24-10-4-2-3-5-21(29)32-25-19(27)8-9-20(25)28/h6-7,11H,2-5,8-10,12,23H2,1H3,(H,24,26)
|
| 化学名 |
(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-[[2-(7-amino-4-methyl-2-oxochromen-3-yl)acetyl]amino]hexanoate
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2550 mL | 11.2752 mL | 22.5505 mL | |
| 5 mM | 0.4510 mL | 2.2550 mL | 4.5101 mL | |
| 10 mM | 0.2255 mL | 1.1275 mL | 2.2550 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
