AOD9604 acetate

别名: AOD 9604; 221231-10-3; UNII-7UP768IP4M; AOD-9604; 7UP768IP4M; AOD9604 acetate; Tyr-somatostatin (177-191);
目录号: V11415 纯度: =98.45%
AOD9604是一种新型有效的抗肥胖肽激素
AOD9604 acetate CAS号: 221231-10-3
产品类别: New1
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产品描述
AOD9604是一种新型有效的抗肥胖肽激素. AOD9604是一种合成肽,由人生长激素(hGH)C-末端片段(氨基酸177-191)改造而来,并在其N-末端添加了一个酪氨酸残基。它被开发为一种拟似生长激素促脂解特性、但不产生其升血糖等副作用的新型减肥药物。由于其潜在的增强体能作用,该药物被世界反兴奋剂机构列为禁用物质。
生物活性&实验参考方法
靶点
Anti-obesity peptide; The mechanism of action of AOD9604 is unique, as its primary target is not the classic growth hormone receptor. Studies indicate that AOD9604 does not compete for the growth hormone receptor nor induce cell proliferation through it. Its lipolytic action is thought to involve the β3-adrenergic receptor pathway: chronic administration upregulates β3-AR RNA expression in adipocytes, and the weight-loss effect is absent in β3-AR knockout mice, although acute administration still increases energy expenditure, suggesting additional pathways may be involved.
体外研究 (In Vitro)
AOD9604是一种肽,由来自氨基酸177-191的人类生长激素的C末端片段组成,在肽的N末端有一个额外的酪氨酸残基。据报道,它模拟了生长激素的脂解特性,没有致糖尿病的副作用。因此,AOD9604可能被用作提高成绩的药物,并被世界反兴奋剂机构(WADA)禁止使用。该肽可在几个互联网网站上找到,最近在美国没收的小瓶中被发现。为了检测运动员对该肽的滥用,在尿液中验证了一种固相萃取方法,检测限为50 pg/mL。该方法具有良好的线性、精密度(<20%)、特异性和回收率(62%)。AOD9604在血清和尿液中孵育后,鉴定出该肽的六种潜在代谢产物。血清中代谢物的定量鉴定出一种由氨基酸CRSVEGSCG组成的单一代谢物,其稳定性明显高于其他代谢物或母体化合物。AOD9604和稳定代谢物的筛选可能会增加检测窗口[2]。
体外研究表明,AOD9604不具备经典生长激素的促增殖活性。在使用转染了人生长激素受体的BaF-BO3细胞进行的实验中,AOD9604无法竞争性地抑制¹²⁵I标记的hGH与受体的结合,也无法刺激细胞增殖,这与完整hGH的作用形成鲜明对比。此外,在血清和尿液中进行的体外代谢研究鉴定出AOD9604的6种潜在代谢物,其中一种由CRSVEGSCG氨基酸序列组成的代谢物稳定性显著高于母体化合物。
体内研究 (In Vivo)
在这项研究中,AOD9604的剂量为0.25mg,与之前关于GH在促进骨关节炎兔胶原酶模型中恢复正常行走和关节修复方面的剂量相当。AOD9604是GH的一个片段;因此,所使用的AOD9604剂量是先前研究使用的活性GH剂量的摩尔当量。以0.6ml关节内注射量给予3mg人生长激素。以摩尔计,3mg GH相当于0.25mg AOD9604。此外,已发表的数据表明,关节炎兔的滑液体积约为0.7 ml。结合注射体积,总体积为1.3 ml,因此AOD9604的初始浓度为0.19 mg/ml。在之前对比格犬关节内注射GH后的研究中,研究人员注射了1.5 mg 0.15 ml体积的GH水溶液。水性制剂在滑液中的初始浓度约为200-300 ug/mL。按摩尔当量计算,这相当于0.11mg/mL的AOD9604,接近本研究中使用的值。 结论:超声引导下关节内注射AOD9604可促进软骨再生,在胶原酶诱导的膝OA兔模型中,联合注射AOD9600和HA比单独注射HA或AOD9604更有效。[1]
动物实验显示AOD9604具有多种体内活性。在肥胖小鼠模型中,通过微量渗透泵连续14天给药,AOD9604能显著降低体重增长,增加体内脂肪氧化速率,并升高血浆甘油水平(脂解指标)。与完整hGH不同,AOD9604不会引起高血糖或降低胰岛素分泌。在兔骨关节炎模型中,关节腔内注射AOD9604可促进软骨再生,减轻跛行症状。在大鼠骨质疏松模型中,口服AOD9604(0.25 mg/kg/天)能预防卵巢切除诱导的骨丢失和骨脆性。
酶活实验
AOD9604 在血浆和尿液中的代谢 [1]
取 100 微升人血清,添加或不添加 2 µg/mL 的 AOD9604,在 37 °C 下分别孵育 0、10、20、60 分钟,或 0、1、2、6、24 小时(n=4)。在每个时间点,加入 200 微升 1% 乙酸和 400 微升乙腈,将溶液振摇孵育 10 分钟。通过以 20,000 x g 离心 5 分钟去除沉淀,上清液在 50 °C 的空气流下蒸发至干。将样品重新悬浮于 100 微升 0.1% 甲酸中。使用 Agilent 6550 QTOF 上的高分辨率全扫描分析,通过比较添加和不添加该肽的血清来鉴定代谢物。然后为每种代谢物收集高分辨率产物离子扫描数据。如表 4 所列,选择三种产物离子用于 MRM 转换。用 0.1% 甲酸将血清样品稀释 10 倍,并在 Waters Xevo TQ-S 上进行代谢物定量。最大百分比定义为每个时间点的平均峰面积除以每种代谢物的最高平均峰面积 × 100%。 取 1000 微升尿液,添加或不添加 2 µg/mL 的 AOD9604,在室温下孵育 24 小时。如前所述提取和还原尿液。使用 Agilent 6550 QTOF 上的高分辨率全扫描分析,通过比较添加和不添加该肽的尿液样品来鉴定代谢物。收集 AOD9604 代谢物的产物离子扫描数据。
特异性和基质抑制 [1]
从八名个体收集空白尿液样品,如上所述进行提取,并对 AOD9604 的折叠和线性形式、内标以及代谢物 (CRSVEGSCG) 进行 MRM 定量。从相同的八名个体中提取第二组尿液,在用 DTT 还原之前,添加 2.5 ng/mL 的 AOD9604 和内标进行强化。无基质对照包含溶于牛胰岛素 (50 µg/mL)、50 mM Tris (pH 8.0) 缓冲液中的 2.5 ng/mL AOD9604 或内标。用 DTT 还原强化的尿液和基质对照并进行测量。基质干扰的百分比计算为:(尿液中的峰面积 - 缓冲液中的峰面积) / 缓冲液中的峰面积 x 100%。
稳定性 [1]
用 0.3 ng/mL 和 3.0 ng/mL (n=5) 的 AOD9604 强化尿液,并在室温、4 °C 和 -20 °C 下孵育 0、1、3 和 8 天。如上所述提取尿液,并测量 AOD9604 和代谢物 (CRSVEGSCG)。如果超过 50% 的样品被检测到且信噪比大于或等于 3,则 AOD9604 和代谢物被描述为“检测到”,否则被描述为未检测到。
提取后稳定性 [1]
提取用 3.0 ng/mL AOD9604 强化的尿液,并如前所述用二硫苏糖醇还原。将样品置于 10 °C 的自动进样器中,并在还原后 0 和 24 小时进行测量。
为了研究 AOD9604 与生长激素受体的结合能力,可以进行放射性配体竞争结合实验。将表达人生长激素受体的膜片段与固定浓度的 ¹²⁵I 标记的生长激素(作为示踪剂)以及递增浓度的未标记 AOD9604 或生长激素(作为阳性对照)在适当的缓冲液中孵育。孵育达到平衡后,通过快速真空过滤或离心分离结合和游离的放射性配体。使用伽马计数器测量滤膜或沉淀中的放射性,并计算抑制 50% 示踪剂结合所需的 AOD9604 浓度 (IC₅₀) 或抑制常数 (Kᵢ)。
细胞实验
血清样本分析 [3]
为了评估 hGH 片段 AOD-9604 对常规使用的 hGH 兴奋剂检测方法的影响,将五份血清样本(SerumMix;来自男性运动员)的混合物用 Genotropin®(重组 hGH;5 ng/ml 水溶液)以及 0、250、500 或 1000 ng/ml 的 AOD-9604 进行强化。将一份人零血清(由试剂盒制造商提供,通常用于重构试剂盒对照品)和一份阴性的常规兴奋剂检测血清样本(来自一名女性运动员)用 500 ng/ml 的 AOD-9604 水溶液(100 µg/ml)进行强化。按照制造商的说明,使用试剂盒 1 和试剂盒 2 对样本进行检测:将血清样本分装到检测管中,然后加入缓冲液,在室温下孵育 2 小时。经过一个洗涤步骤后,加入检测抗体,并在室温下孵育 2 小时。再经过一个洗涤步骤后,使用配备 LBIS 软件 3.3 版的 Luminometer AutoLumat plus 953 光度计进行三次重复分析。试剂盒 1 和试剂盒 2 的检测定量限 (LOQ) 对于 rec-检测和 pit-检测分别为 0.05 ng/ml。
为评估AOD9604是否通过生长激素受体诱导细胞增殖,可使用生长激素依赖的细胞系(如转染了人生长激素受体的BaF-BO3细胞)。将细胞接种于96孔板中,在无生长激素的培养基中饥饿培养数小时以使细胞同步化。随后,加入梯度浓度的AOD9604或生长激素(阳性对照)处理48-72小时。采用MTT法或CellTiter-Glo发光法检测细胞活力/增殖情况。通常在生长激素处理组可观察到明显的细胞增殖,而AOD9604处理组则无显著促增殖效应。
动物实验
32只兔子被随机分为4组,每组12只。在首次注射胶原酶后,每周向每组兔子注射四种不同的溶液,包括生理盐水、透明质酸(HA)、AOD9604和AOD9604联合HA,持续4-7周。第1组接受关节内注射生理盐水(0.6 mL)。第2组接受关节内注射HA(Hyruan-plus®;LG Life Science,韩国大田)6 mg。HA的分子量为3.0×10⁶ Da,配制成浓度为10 mg/mL的溶液。第3组接受关节内注射AOD9604(Metabolic Pharmaceuticals,澳大利亚墨尔本)0.25 mg/0.6 mL。第4组接受关节内注射AOD9604(0.25 mg)和HA(6 mg)的联合溶液。所有注射均由康复医师使用市售超声系统(E-CUBE 15®;Alpionion Medical Systems,韩国首尔)在全身麻醉和无菌条件下进行,该系统配备3-12 MHz多频线性探头(图1)。注射后未给予任何药物。首次注射胶原酶9周后,采用吸入CO₂的方式对兔子实施安乐死。[1]
成年新西兰白兔(n=32)随机分为四组,每组膝关节注射两次2 mg II型胶原酶。首次关节内注射胶原酶后,每周分别注射0.6 mL生理盐水(第1组)、6 mg透明质酸(HA)(第2组)、0.25 mg AOD9604(第3组)以及0.25 mg AOD9604联合6 mg透明质酸(HA)(第4组),持续4-7周。采用形态学和组织病理学方法评估软骨退化的程度,并在首次注射胶原酶后 8 周观察跛行程度。[1]
药代性质 (ADME/PK)
使用来自8名受试者的空白尿液测定了特异性。在相同的保留时间下,未检测到AOD9604折叠或还原形式、内标物或下文所述的最短代谢物的峰。将AOD9604和内标物加入到来自8名受试者的提取尿液或Tris缓冲液中,以50 µg/mL牛胰岛素为载体蛋白,测定了基质干扰。比较峰面积,AOD9604和内标物的平均基质抑制率均为-59%。然而,由于两者保留时间不同,不同样本的基质抑制率并不相同。因此,峰面积比值存在差异。由于该方法旨在对合成肽进行定性鉴定,且具有良好的检测限,因此基质抑制程度是可以接受的。[3]
提取后稳定性[3]
由于肽二硫键的可逆性,将还原肽在自动进样器中于 10 °C 下孵育 0 小时和 24 小时后,测定其提取后稳定性。AOD9604 和内标的峰面积比较表明,24 小时后,样品分别保留了 101% 和 89% 的信号(表 2)。虽然建议在还原后立即分析样品,但在长达 24 小时内进行检测或重新分析也不会造成还原肽的显著损失。
体外代谢[3]
尽管 AOD9604 的口服形式已被美国食品药品监督管理局 (FDA) 授予 GRAS(公认安全)认证,但该肽尚未获准用于人体。 8 由于该肽的口服制剂尚未上市,且注射剂型也未获得FDA批准,因此无法在人体内进行代谢实验。为此,我们采用体外代谢实验,将该肽分别与血清和尿液孵育。该方法已成功用于鉴定GHRP肽和长链R3-IGF-1的潜在代谢物。16, 23 为了鉴定潜在代谢物,我们分别在添加和未添加AOD9604的血清中孵育0、10、20和60分钟。代谢反应终止后,我们加入乙腈去除高分子量蛋白。通过比较添加和未添加肽的血清的高分辨率全扫描和产物离子扫描数据来鉴定代谢物。如表3所示,在血清中孵育后鉴定出几种代谢物。我们观察到肽的N端发生了蛋白水解降解,但降解并未超过二硫键连接的半胱氨酸残基。未鉴定出肽C端降解的代谢物。虽然血清中存在N端和C端特异性外肽酶,但C端折叠的发夹结构可能阻止蛋白水解切割。A. Thomas等人的研究表明,在人血清中体外孵育后鉴定的GHRP代谢物与注射到小鼠体内并在尿液中检测到的代谢物(体内)高度一致。[3]
考虑到该检测方法13%的测量不确定度,添加肽AOD-9604后,含有重组hGH的SerumMix样品的比例也没有变化,并且使用试剂盒1和试剂盒2的rec-和pit-检测方法测定的浓度也没有增加或减少。在添加了重组生长激素(GH)的血清样本中加入AOD-9604后,重组生长激素的浓度未发生变化(试剂盒1:添加前为5.45 ng/ml,添加后平均为5.35 ng/ml;试剂盒2:添加前为5.12 ng/ml,添加后平均为5.55 ng/ml)。促性腺激素释放激素(Pit)检测结果也未发生变化(试剂盒1:添加前为1.66 ng/ml,添加后平均为1.74 ng/ml;试剂盒2:添加前为1.67 ng/ml,添加后平均为1.75 ng/ml)。所有含有重组生长激素的血清混合样本的比例在添加AOD-9604前后均显示出明显的阳性结果(试剂盒1和试剂盒2),且未出现假阴性结果。初步结果表明,尽管仅检测了少量样本,但AOD-9604本身对WADA hGH同工型差异免疫测定没有影响。由于AOD-9604最近被列为S0类物质,因此在体育运动中被禁用,并且该物质将成为常规兴奋剂检测的对象,这可能需要进一步研究其在人体内的药代动力学,以及从尿液或血浆中检测完整药物或其代谢物。如果该候选药物能经尿液排出,则可以考虑将其纳入现有的肽类药物筛查程序中。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
AOD9604的毒理特征主要体现在其相较于完整生长激素的优势上。动物研究表明,AOD9604不引起生长激素典型的升血糖和胰岛素分泌抑制等副作用。在肝脏安全性方面,一项小鼠研究显示,8周AOD9604联合运动治疗可显著降低丙氨酸氨基转移酶水平,而生长激素注射则导致某些肝损伤标志物(如细胞角蛋白18)水平升高。目前关于AOD9604的长期毒性谱及其潜在的生殖毒性、致癌性等毒理学终点,公开的系统性评估数据较为有限。
参考文献
[1]. Effect of Intra-articular Injection of AOD9604 with or without Hyaluronic Acid in Rabbit Osteoarthritis Model. Ann Clin Lab Sci. 2015 Summer;45(4):426-32.
[2]. Detection and in vitro metabolism of AOD9604. Drug Test Anal. 2015 Jan;7(1):31-8.
[3]. AOD-9604 does not influence the WADA hGH isoform immunoassay. Drug Test Anal. 2013 Nov-Dec;5(11-12):850-2.
其他信息
随着生物技术领域成熟系统和策略的日益普及,以及对细胞过程和相关生物分子认识的不断深入,人体运动药物检测已成为分析化学领域一个相当复杂的课题。为了打击运动员的作弊行为,需要在样本量有限的生物样本(通常为血液、血清和尿液)中,以极低的浓度水平,证明肽类药物及其类似物的来源。因此,色谱-质谱联用、电泳、免疫学以及联合检测方法应运而生,并得到了相应的发展。这些方法能够以所需的特异性和灵敏度检测低分子量(例如生长激素释放肽、ARA-290、TB-500、AOD-9604、CJC-1295、去氨加压素、促黄体生成素释放激素、促皮质素等)、中等分子量(例如胰岛素、IGF-1及其类似物、“全长”机械生长因子、生长激素、绒毛膜促性腺激素、促红细胞生成素等)和高分子量(例如斯达木单抗)肽类化合物的滥用情况。然而,技术上可行的检测方法与日常分析实践之间仍存在差距,需要进一步弥合。https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25382550/
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C78H123N23O23S2.CH3COOH
分子量
1875.13 (acetate); 1815.10 (free base)
精确质量
1813.8603
元素分析
C, 51.61; H, 6.83; N, 17.75; O, 20.27; S, 3.53
CAS号
221231-10-3
PubChem CID
71300630
序列
H-Tyr-Leu-Arg-1le-Val-GIn-Cys-Arg-Ser-Val-Glu-Gly-Ser-Cys-Gly-Phe-OH (Disulfide bond Cys&Cys)
短序列
YLRIVQCRSVEGSCGF
外观&性状
White to off white powder or loose lump
密度
1.5±0.1 g/cm3
折射率
1.667
LogP
-3.46
tPSA
815.3
氢键供体(HBD)数目
28
氢键受体(HBA)数目
28
可旋转键数目(RBC)
45
重原子数目
126
分子复杂度/Complexity
3710
定义原子立体中心数目
15
SMILES
S1C[C@@H](C(N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(N[C@H](C(N[C@H](C(NCC(N[C@@H](CO)C(N[C@H](C(NCC(N[C@H](C(=O)O)CC2C=CC=CC=2)=O)=O)CS1)=O)=O)=O)CCC(=O)O)=O)C(C)C)=O)=O)CCCNC(=N)N)=O)NC([C@H](CCC(N)=O)NC([C@H](C(C)C)NC([C@H]([C@@H](C)CC)NC([C@H](CCCNC(=N)N)NC([C@H](CC(C)C)NC([C@H](CC1C=CC(=CC=1)O)N)=O)=O)=O)=O)=O)=O
InChi Key
GVIYUKXRXPXMQM-BPXGDYAESA-N
InChi Code
InChI=1S/C78H123N23O23S2/c1-9-41(8)62(101-68(115)47(18-14-28-86-78(83)84)91-69(116)50(29-38(2)3)95-63(110)45(79)30-43-19-21-44(104)22-20-43)75(122)100-61(40(6)7)74(121)94-49(23-25-56(80)105)67(114)98-55-37-126-125-36-54(65(112)88-32-57(106)89-51(76(123)124)31-42-15-11-10-12-16-42)97-70(117)52(34-102)90-58(107)33-87-64(111)48(24-26-59(108)109)93-73(120)60(39(4)5)99-71(118)53(35-103)96-66(113)46(92-72(55)119)17-13-27-85-77(81)82/h10-12,15-16,19-22,38-41,45-55,60-62,102-104H,9,13-14,17-18,23-37,79H2,1-8H3,(H2,80,105)(H,87,111)(H,88,112)(H,89,106)(H,90,107)(H,91,116)(H,92,119)(H,93,120)(H,94,121)(H,95,110)(H,96,113)(H,97,117)(H,98,114)(H,99,118)(H,100,122)(H,101,115)(H,108,109)(H,123,124)(H4,81,82,85)(H4,83,84,86)/t41-,45-,46-,47-,48-,49-,50-,51-,52-,53-,54-,55-,60-,61-,62-/m0/s1
化学名
(2S)-2-[[2-[[(4R,7S,13S,16S,19S,22S,25R)-25-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-22-(3-carbamimidamidopropyl)-13-(2-carboxyethyl)-7,19-bis(hydroxymethyl)-6,9,12,15,18,21,24-heptaoxo-16-propan-2-yl-1,2-dithia-5,8,11,14,17,20,23-heptazacyclohexacosane-4-carbonyl]amino]acetyl]amino]-3-phenylpropanoic acid
别名
AOD 9604; 221231-10-3; UNII-7UP768IP4M; AOD-9604; 7UP768IP4M; AOD9604 acetate; Tyr-somatostatin (177-191);
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O:>1mg/ml.
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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