| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
The target of AOH1160 is Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA), a key regulator of DNA replication and repair. Key binding affinity data:
- PCNA (human recombinant): Ki = 0.3 μM (ITC assay) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
1. 多种癌细胞系抗增殖活性:
AOH1160对多种人类癌细胞系表现出强效抗增殖作用（72小时MTS实验）: - 非小细胞肺癌（A549）：IC₅₀ = 0.18 μM [1] - 结直肠癌（HCT116）：IC₅₀ = 0.22 μM [1] - 乳腺癌（MCF-7）：IC₅₀ = 0.25 μM [1] - 宫颈癌（HeLa）：IC₅₀ = 0.15 μM [1] - 氟尿嘧啶（5-FU）耐药结直肠癌（HCT116/5-FU）：IC₅₀ = 0.28 μM [1] - 正常人支气管上皮细胞（NHBE）：IC₅₀ > 5 μM；人脐静脉内皮细胞（HUVEC）：IC₅₀ > 6 μM，对正常细胞毒性低 [1] 2. 抑制DNA复制并诱导DNA损伤: - EdU掺入实验：A549细胞用AOH1160（0.1–0.5 μM）处理24小时，DNA合成呈剂量依赖性减少（0.1 μM时抑制率45%，0.5 μM时78%）[1] - 免疫荧光染色：0.3 μM AOH1160处理HCT116细胞后，DNA双链断裂标志物γ-H2AX焦点数量增加5.2倍 [1] - Western blot：A549和HCT116细胞中，γ-H2AX和DNA损伤响应标志物p-CHK1呈剂量依赖性上调 [1] 3. 诱导细胞周期阻滞与凋亡: - 细胞周期分析（流式细胞术）：0.3 μM AOH1160处理A549细胞24小时，诱导S期阻滞（处理组占比58%，溶媒对照组32%）[1] - 凋亡实验（Annexin V/PI染色）：HCT116细胞用AOH1160（0.2–1 μM）处理48小时，凋亡率呈剂量依赖性升高（0.2 μM时18%，0.5 μM时42%，1 μM时65%）[1] - Western blot：处理后细胞中剪切型caspase-3/7/9和PARP剪切水平升高，抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低 [1] 4. 破坏PCNA依赖的蛋白相互作用: 免疫共沉淀（Co-IP）实验显示，0.3 μM AOH1160可破坏PCNA与DNA聚合酶δ、PCNA与瓣状核酸内切酶1（FEN1）的结合，这两种蛋白是DNA复制和修复的关键因子 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
1. 异种移植模型抗肿瘤疗效:
- A549肺癌异种移植模型（nu/nu小鼠）：AOH1160以50 mg/kg或100 mg/kg剂量每日口服给药，连续21天，肿瘤生长抑制率（TGI）分别为65%（50 mg/kg）和82%（100 mg/kg），无显著体重下降（<4%）[1] - HCT116结直肠癌异种移植模型：100 mg/kg每日口服给药21天，TGI为78%，体重稳定 [1] - 5-FU耐药HCT116/5-FU异种移植模型：100 mg/kg AOH1160的TGI为72%，可克服5-FU耐药 [1] 2. 体内机制验证: - 100 mg/kg AOH1160处理A549异种移植瘤后，肿瘤组织中γ-H2AX水平升高4.8倍，剪切型caspase-3水平升高3.5倍（IHC和Western blot检测）[1] - IHC染色显示，肿瘤组织中增殖标志物Ki-67阳性细胞比例从对照组的78%降至42% [1] |
| 酶活实验 |
1. PCNA结合实验（ITC）:
将纯化的重组人PCNA蛋白（三聚体形式）透析至实验缓冲液中，将系列稀释的AOH1160在25°C下滴定至PCNA溶液中，通过等温滴定量热法记录结合过程中的热变化。拟合等温曲线计算结合亲和力（Ki = 0.3 μM），证实其特异性结合PCNA的三聚体界面 [1] 2. PCNA依赖的DNA聚合酶δ活性测定: 实验体系包含PCNA、DNA聚合酶δ、引物-模板DNA、dNTPs（含荧光标记dCTP）及系列稀释的AOH1160，在反应缓冲液中混合后37°C孵育60分钟，允许DNA合成。检测合成DNA的荧光强度，相对于溶媒对照组计算抑制率，AOH1160抑制PCNA依赖的DNA聚合酶δ活性的IC₅₀为0.21 μM [1] |
| 细胞实验 |
1. 细胞增殖（MTS）实验:
- 癌细胞和正常细胞以3×10³个细胞/孔接种于96孔板，过夜培养。 - 加入系列浓度的AOH1160（0.01–10 μM），37°C、5% CO₂孵育72小时。 - 加入MTS试剂，4小时后在490 nm处测定吸光度，通过非线性回归推导IC₅₀值 [1] 2. DNA复制（EdU掺入）实验: - A549/HCT116细胞接种于24孔板，过夜培养。 - 用AOH1160（0.1–0.5 μM）处理24小时后，加入EdU试剂孵育2小时。 - 细胞经固定、通透后，用EdU检测试剂染色，荧光显微镜下计数DNA合成阳性细胞，计算抑制率 [1] 3. 凋亡、细胞周期及免疫荧光实验: - 凋亡检测：处理后的细胞用Annexin V-FITC和PI避光染色15分钟，流式细胞术分析 [1] - 细胞周期检测：细胞用70%乙醇固定，加入含RNase A的PI染色，流式细胞术分析周期分布 [1] - 免疫荧光：细胞固定、通透、封闭后，与抗γ-H2AX抗体孵育，再加入荧光二抗，成像并计数γ-H2AX焦点 [1] 4. Western blot及Co-IP实验: - Western blot：细胞用含蛋白酶/磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解，30 μg等量蛋白经SDS-PAGE电泳分离，转移至PVDF膜，与抗γ-H2AX、p-CHK1、剪切型caspase-3/7/9、PARP、Bcl-2、PCNA及β-肌动蛋白（内参）抗体孵育 [1] - Co-IP：细胞裂解液与抗PCNA抗体4°C孵育过夜，加入蛋白A/G珠子，免疫沉淀复合物经Western blot检测DNA聚合酶δ或FEN1 [1] |
| 动物实验 |
1. 异种移植瘤模型：
- 将5×10⁶个A549、HCT116或HCT116/5-FU细胞皮下注射到6-8周龄的雌性裸鼠右侧腹部。当肿瘤体积达到100-150 mm³时，将小鼠随机分为3组（每组n=6）：载体对照组（0.5%羧甲基纤维素+0.1% Tween 80）、AOH1160 50 mg/kg组和AOH1160 100 mg/kg组[1] - 药物制剂：将AOH1160溶解于0.5%羧甲基纤维素+0.1% Tween 80中，制备成均匀的悬浮液[1] - 给药途径：每日灌胃一次，连续21天。监测肿瘤体积（每3天用游标卡尺测量一次）和体重（每日记录）。研究结束时，切除肿瘤，称重，并储存在-80°C下，用于Western blot/IHC分析[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 血浆蛋白结合：将人血浆和鼠血浆加入AOH1160（1 μM），并在 37°C 下孵育 1 小时。超滤结果显示结合分数分别为 92%（人）和 90%（小鼠）[1]
2. 体内药代动力学（小鼠）： - 口服给药（100 mg/kg）：Cmax = 2.3 μM，AUC₀–24h = 18.5 μM·h，t₁/₂ = 6.8 小时，口服生物利用度 (F) = 45% [1] - 静脉给药（20 mg/kg）：Cmax = 8.7 μM，AUC₀–24h = 20.3 μM·h，t₁/₂ = 5.9 小时 [1] 3. 体外代谢稳定性： AOH1160 在 NADPH 再生系统存在下与人肝微粒体和小鼠肝微粒体孵育。采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）分别在0、15、30、60和120分钟时测定剩余化合物浓度。半衰期（t₁/₂）分别为4.9小时（人）和5.6小时（小鼠）[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外毒性：
用AOH1160处理正常细胞（NHBE、HUVEC）72小时后，IC₅₀ > 5 μM，比癌细胞的IC₅₀值高20-35倍，表明其对正常细胞的毒性较低[1] 2. 体内毒性（21天异种移植研究）： - 小鼠未出现明显的体重下降（<4%），无异常行为，尸检时主要器官（肝、肾、心、脾、肺）未见明显病理改变[1] - 血清生化分析显示，与溶剂对照组相比，肝功能（ALT、AST）或肾功能（BUN、肌酐）均无显著变化[1] - 肝肾组织病理学检查未见明显病变[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. 结构和背景：AOH1160是一种首创的小分子抑制剂，靶向PCNA，PCNA是一种保守蛋白，对DNA复制、修复和细胞周期进程至关重要。它是通过高通量筛选和构效关系优化发现的[1]
2. 作用机制：AOH1160与PCNA三聚体界面结合，破坏功能性PCNA三聚体的形成，并抑制PCNA与其伴侣蛋白（例如DNA聚合酶δ、FEN1）之间的相互作用。这会阻断DNA复制和修复，诱导大量DNA损伤和S期细胞周期阻滞，并最终触发癌细胞的内在凋亡[1] 3. 治疗潜力：AOH1160对多种实体瘤（包括化疗耐药亚型）表现出强大的抗肿瘤活性，且对正常细胞毒性低。作为首创的PCNA抑制剂，它为癌症治疗提供了一种新的治疗策略，尤其适用于化疗耐药肿瘤患者[1] |
| 分子式 |
C25H20N2O3
|
|---|---|
| 分子量 |
396.437906265259
|
| 精确质量 |
396.147
|
| CAS号 |
2089314-57-6
|
| PubChem CID |
126718383
|
| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
|
| LogP |
4.9
|
| tPSA |
67.4
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
30
|
| 分子复杂度/Complexity |
575
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O(C1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1NC(CNC(C1=CC=CC2C=CC=CC1=2)=O)=O
|
| InChi Key |
COPRLRLXDBSLET-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C25H20N2O3/c28-24(17-26-25(29)21-14-8-10-18-9-4-5-13-20(18)21)27-22-15-6-7-16-23(22)30-19-11-2-1-3-12-19/h1-16H,17H2,(H,26,29)(H,27,28)
|
| 化学名 |
N-[2-oxo-2-(2-phenoxyanilino)ethyl]naphthalene-1-carboxamide
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~252.24 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5224 mL | 12.6122 mL | 25.2245 mL | |
| 5 mM | 0.5045 mL | 2.5224 mL | 5.0449 mL | |
| 10 mM | 0.2522 mL | 1.2612 mL | 2.5224 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
