Arnicolide D

别名: 山金草内酯D; 山金车内酯 D;11,13-二氢锦鸡菌素甲基丙烯酸酯; 山金车内酯D
目录号: V30818 纯度: ≥98%
Arnicolide D 是从 Centipeda minima 中提取的倍半萜内酯。
Arnicolide D CAS号: 34532-68-8
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
10mg
25mg
50mg
100mg
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产品描述
Arnicolide D 是从 Centipeda minima 中提取的倍半萜内酯。 Arnicolide D 调节细胞周期,激活 caspase 信号通路,并抑制 PI3K/AKT/mTOR 和 STAT3 信号通路。 Arnicolide D 以剂量和时间依赖性方式显着抑制鼻咽癌 (NPC) 细胞生长。
生物活性&实验参考方法
靶点
PI3K, Akt, mTOR [1]
Bcl-2, Bax, caspase-3 [1]
体外研究 (In Vitro)
- 山金车内酯D(Arnicolide D)以剂量和时间依赖性方式抑制人鼻咽癌细胞系(CNE1、CNE2、HONE1、HK1)的增殖(MTT法)。48小时IC50值分别为12.3±1.5 μM(CNE1)、10.7±1.2 μM(CNE2)、13.5±1.8 μM(HONE1)和11.9±1.4 μM(HK1)[1]
- 山金车内酯D(Arnicolide D)(10、20、40 μM)显著抑制CNE1和CNE2细胞的克隆形成能力(克隆形成实验),与对照组相比,克隆数分别减少约40%(10 μM)、65%(20 μM)和85%(40 μM)[1]
- 山金车内酯D(Arnicolide D)(10、20、40 μM)抑制CNE1和CNE2细胞的迁移和侵袭能力(Transwell实验和划痕愈合实验),迁移率和侵袭细胞数呈剂量依赖性减少30%-70%[1]
- 山金车内酯D(Arnicolide D)(10、20、40 μM)诱导CNE1和CNE2细胞凋亡(Annexin V-FITC/PI染色):凋亡率从对照组的约5%升高至20 μM组的25%和40 μM组的45%[1]
- Western blot分析显示,山金车内酯D(Arnicolide D)(10、20、40 μM)下调PI3K、Akt、mTOR的磷酸化水平,降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达;上调促凋亡蛋白Bax及切割型caspase-3、-9的表达(Western blot检测)。qPCR验证Bcl-2 mRNA下调,Bax mRNA上调[1]
- 山金车内酯D(Arnicolide D)对人正常鼻咽上皮细胞(NP69)毒性较低,48小时IC50 > 50 μM(MTT法)[1]
体内研究 (In Vivo)
- 在CNE2细胞移植瘤裸鼠模型中,腹腔注射山金车内酯D(Arnicolide D)(20、40 mg/kg/3天)连续4周,显著抑制肿瘤生长。与溶媒组相比,20 mg/kg组肿瘤体积和重量减少约45%,40 mg/kg组减少约68%[1]
- 移植瘤组织病理学分析显示,山金车内酯D(Arnicolide D)(20、40 mg/kg)增加凋亡细胞数量(TUNEL assay),减少Ki-67阳性增殖细胞(免疫组织化学检测)[1]
- 移植瘤组织Western blot分析证实,山金车内酯D(Arnicolide D)(40 mg/kg)下调p-PI3K、p-Akt、p-mTOR及Bcl-2蛋白表达,上调Bax和切割型caspase-3表达[1]
细胞实验
- 抗增殖实验:鼻咽癌细胞(CNE1、CNE2、HONE1、HK1)和NP69细胞接种于96孔板,用山金车内酯D(Arnicolide D)(0-50 μM)处理24、48、72小时,加入MTT试剂,检测570 nm处吸光度值计算IC50[1]
- 克隆形成实验:CNE1和CNE2细胞接种于6孔板,用山金车内酯D(Arnicolide D)(10、20、40 μM)处理24小时后,换无药培养基继续培养14天,克隆染色后计数[1]
- 迁移和侵袭实验:划痕愈合实验中,CNE1/CNE2细胞划痕后用山金车内酯D(Arnicolide D)(10、20、40 μM)处理24小时,测量划痕闭合程度计算迁移率;Transwell实验中,上室接种细胞并加入药物,24小时后计数下室侵袭细胞数[1]
- 凋亡实验:CNE1/CNE2细胞用山金车内酯D(Arnicolide D)(10、20、40 μM)处理48小时,Annexin V-FITC/PI染色后流式细胞术检测凋亡率[1]
- Western blot和qPCR实验:CNE1/CNE2细胞用山金车内酯D(Arnicolide D)(10、20、40 μM)处理48小时,提取蛋白进行Western blot(检测靶点:p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR、Bcl-2、Bax、切割型caspase-3/-9、β-actin);提取总RNA进行qPCR(检测基因:Bcl-2、Bax,内参基因GAPDH)[1]
动物实验
异种移植模型:将 CNE2 细胞(5×10⁶ 个细胞/只)皮下注射到 4-6 周龄 BALB/c 裸鼠右侧腹部。当肿瘤体积达到约 100 mm³ 时,将小鼠随机分为载体组和 Arnicolide D 治疗组(20、40 mg/kg,每组 n=6)[1]
- Arnicolide D 溶于 DMSO,并用生理盐水稀释(最终 DMSO 浓度 ≤ 0.5%)。治疗组每 3 天腹腔注射一次,持续 4 周;载体组注射等体积的载体[1]
- 每 3 天测量一次肿瘤体积(体积 = 长 × 宽² / 2)。治疗结束后,处死小鼠,称量肿瘤重量。收集肿瘤组织进行TUNEL检测、免疫组织化学(Ki-67)和蛋白质印迹分析[1]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
在体内异种移植实验中,腹腔注射Arnicolide D(20、40 mg/kg)未引起小鼠体重、食物摄入量或血清ALT、AST、Cr、BUN水平的显著变化,表明其无明显的肝毒性或肾毒性[1]
- 在体外实验中,Arnicolide D对正常NP69细胞的细胞毒性较低(IC50 > 50 μM),对鼻咽癌细胞具有较高的治疗指数[1]
参考文献

[1]. Arnicolide D, from the herb Centipeda minima, Is a Therapeutic Candidate against Nasopharyngeal Carcinoma. Molecules. 2019 May 17;24(10).

其他信息
阿尼可苷D是一种倍半萜内酯。
据报道,阿尼可苷D存在于无茎山金车(Arnica acaulis)、山金车(Arnica montana)和蜈蚣草(Centipeda minima)中,并有相关数据。
- 阿尼可苷D是从中药蜈蚣草中分离得到的一种天然倍半萜内酯[1]。
- 其抗鼻咽癌机制与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关,从而抑制细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导线粒体介导的细胞凋亡(上调Bax/Bcl-2比值并激活caspase级联反应)[1]。
- 阿尼可苷D因其强大的抗肿瘤活性和对正常细胞的低毒性,被认为是一种潜在的鼻咽癌治疗候选药物[1]。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C19H24O5
分子量
332.3909
精确质量
332.162
CAS号
34532-68-8
PubChem CID
182199
外观&性状
White to off-white solid powder
LogP
2.453
tPSA
69.67
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
3
重原子数目
24
分子复杂度/Complexity
648
定义原子立体中心数目
7
SMILES
C[C@@H]1C[C@@H]2[C@@H]([C@@H](C(=O)O2)C)[C@@H]([C@]3([C@H]1C=CC3=O)C)OC(=O)C(=C)C
InChi Key
NZESEVTYUVXOTC-APDQSUQKSA-N
InChi Code
InChI=1S/C19H24O5/c1-9(2)17(21)24-16-15-11(4)18(22)23-13(15)8-10(3)12-6-7-14(20)19(12,16)5/h6-7,10-13,15-16H,1,8H2,2-5H3/t10-,11+,12+,13-,15-,16+,19+/m1/s1
化学名
[(1S,3aR,5R,5aR,8aR,9S,9aR)-1,5,8a-trimethyl-2,8-dioxo-3a,4,5,5a,9,9a-hexahydro-1H-azuleno[6,5-b]furan-9-yl] 2-methylprop-2-enoate
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~25 mg/mL (~75.21 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.0085 mL 15.0426 mL 30.0851 mL
5 mM 0.6017 mL 3.0085 mL 6.0170 mL
10 mM 0.3009 mL 1.5043 mL 3.0085 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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