| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
CDK9/CycT1 (IC50 = 11 nM (in-house assay) or 5 nM (Merck Millipore panel))[1]
CDK2 (selectivity ratio CDK2/CDK9 = 98 (in-house) or CDK2/CycE IC50 = 470 nM (Merck Millipore))[1] Other CDKs: CDK1/CycB IC50 = 690 nM, CDK3/CycE IC50 = 570 nM, CDK5/p35 IC50 = 800 nM, CDK6/CycD3 IC50 = 4400 nM, CDK7/CycH/MAT1 IC50 >10000 nM (Merck Millipore panel)[1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
BAY-958 是 Atuveciclib（曾用名 BAY-1143572）的先导化合物，Atuveciclib 是一种新型、高效、口服且高选择性的 PTEFb/CDK9 抑制剂。它对 CDK9/CycT1 的抑制 IC50 值为 13 nM，对 CDK9 的选择性比 CDK2 高 100 倍以上。它还能抑制 GSK3 激酶，对 GSK3α 和 GSK3β 的 IC50 值分别为 45 nM 和 87 nM。Atuveciclib 目前正处于 I 期临床试验阶段。选择性抑制转录调控因子 PTEFb/CDK9 是一种很有前景的癌症治疗新策略。从先导化合物 BAY-958 出发，通过严格优化激酶选择性、理化性质和 DMPK 特性，最终筛选出了口服的临床候选药物 atuveciclib（BAY 1143572）。 BAY 1143572 的结构特征在于其不寻常的苄基亚砜亚胺基团，在体外和体内均表现出最佳的整体特性，包括在小鼠和大鼠异种移植模型中具有高疗效和良好的耐受性。 BAY 1143572 是首个进入癌症治疗临床试验的高效高选择性 PTEFb/CDK9 抑制剂。
激酶活性测定：默克密理博 CDK 活性测定：测定按照默克密理博 KinaseProfiler™ 标准方案进行，ATP 浓度为 10 μM。 细胞实验：HeLa 人宫颈癌细胞 (CCL-2) 购自美国典型培养物保藏中心 (ATCC，Manassas，USA)，MOLM-13 人急性髓系白血病细胞 (ACC 554) 购自德国微生物和细胞培养物保藏中心 (DCCM，Braunschweig，Germany)。细胞系的鉴定由德国微生物和细胞培养物保藏中心通过基于 PCR 的多态性短串联重复序列 (STR) DNA 分析进行。细胞在建议的生长条件下，于 37°C 的加湿培养箱中培养。在含有10%胎牛血清（FCS）的培养基中，以每孔3000个（HeLa细胞）和5000个（MOLM-13细胞）的密度，在96孔板中进行细胞增殖实验。将细胞用系列稀释的测试化合物处理96小时，每个处理设置四个复孔。采用结晶紫染色法（HeLa细胞）或CellTitre-Glo发光细胞活力检测试剂盒（Promega公司）（MOLM-13细胞）对细胞相对数量进行定量。 IC50 值（抑制浓度达到最大效应的 50%）是通过对测量数据进行四参数拟合确定的，这些数据已根据载体（DMSO）处理的细胞（=100%）和化合物暴露前立即采集的测量读数（=0%）进行了标准化。 BAY-958 能有效抑制 CDK9/CycT1，IC50 为 11 nM（内部测定），并且对 CDK2 具有很高的选择性（IC50 比为 98 倍）。[1] 在 Merck Millipore KinaseProfiler 检测中，BAY-958 对 CDK9/CycT1 的 IC50 为 5 nM，对 CDK2/CycE 的 IC50 为 470 nM，对 CDK1/CycB 的 IC50 为 690 nM，对 CDK3/CycE 的 IC50 为 570 nM，对 CDK4/CycE 的 IC50 为 800 nM。 BAY-958 对 CDK5/p35 的 IC50 为 4400 nM，对 CDK6/CycD3 的 IC50 为 4400 nM，对 CDK7/CycH/MAT1 的 IC50 >10000 nM。[1] BAY-958 对 HeLa 细胞和 MOLM-13 细胞均表现出抗增殖活性，IC50 分别为 1000 nM 和 280 nM。[1] 在大鼠肝细胞和肝微粒体中，BAY-958 表现出较高的代谢稳定性。[1] 该化合物在 pH 6.5 时水溶性较低，为 11 mg/L，Caco-2 细胞渗透性中等（Papp AB 22 nm/s），外排比高，为 15。[1] 在大鼠体内，其血液/血浆分配比约为 3:1。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在大鼠体内药代动力学研究中，BAY 1143572 显示出较低的血药清除率 (CLb 1.1 L/h/kg)。BAY 1143572 的分布容积 (Vss) 为 1.0 L/kg。BAY 1143572 的口服生物利用度显著提高至 54%。血药浓度/血浆浓度比约为 1。它对细胞色素 P450 活性无显著抑制作用，IC50 值 > 20 μM。在移植了患者来源的 ATL 细胞的免疫缺陷 NOD/Shi-scid/IL-2Rγ 基因敲除 (NOG) 小鼠中，给予 BAY 1143572 可显著减少 ATL 细胞向肝脏和骨髓等器官的浸润。研究还观察到血清中人可溶性IL2R水平降低，表明ATL肿瘤负荷减少。
在小鼠MOLM-13人急性髓系白血病异种移植模型中，每日口服30或40 mg/kg的BAY-958盐酸盐，可显著抑制肿瘤生长，实验结束时治疗组与对照组（T/C）的比值分别为0.16和0.12。治疗耐受性良好，体重变化小于10%，且未出现致命毒性。[1] |
| 酶活实验 |
CDK9/CycT1激酶活性测定：使用重组全长His标签人CDK9和CycT1。生物素标记的肽段biotin-Ttds-YISPLKSPYKISEG（C端酰胺）作为底物。将50 nL浓度为100倍的DMSO溶液加入384孔板中。加入2 μL CDK9/CycT1（溶于测定缓冲液：50 mM Tris-HCl pH 8.0、10 mM MgCl₂、1.0 mM二硫苏糖醇、0.1 mM原钒酸钠、0.01% Nonidet P-40），并在22°C下预孵育15分钟。激酶反应通过在检测缓冲液中加入 3 μL ATP（终浓度 10 μM）和底物（终浓度 1 μM）启动，并在 22°C 下孵育 25 分钟。反应用 EDTA/BSA/HEPES 缓冲液中的 TR-FRET 检测试剂（链霉亲和素-XL665、抗 RB(pSer807/pSer811) 抗体、LANCE EU 标记的抗小鼠 IgG）终止。孵育 1 小时后，测量 620 nm 和 665 nm 处的荧光发射（激发波长 350 nm）。665/620 nm 的比值指示底物的磷酸化程度。IC50 值通过四参数拟合计算。[1]
CDK2/CycE 检测：使用 GST 标记的人 CDK2 和 CycE，采用类似的方案，并使用相同的生物素标记肽底物。ATP 终浓度为 10 μM，底物浓度为 0.75 μM。 CDK2/CycE 浓度约为 130 ng/mL。其他条件相同。[1] Merck Millipore CDK 检测：按照 KinaseProfiler 标准方案进行，ATP 浓度为 10 μM。[1] |
| 细胞实验 |
增殖实验：将 HeLa 人宫颈癌细胞（3000 个细胞/孔）或 MOLM-13 人急性髓系白血病细胞（5000 个细胞/孔）接种于 96 孔板中，培养基中含有 10% 胎牛血清。细胞用 BAY-958 的系列稀释液处理 96 小时，每个处理设置四个复孔。HeLa 细胞的相对细胞数通过结晶紫染色法定量，MOLM-13 细胞的相对细胞数通过 CellTitre-Glo 发光细胞活力检测法定量。IC50 值通过四参数拟合确定，数据以溶剂（DMSO）处理的细胞（100%）和化合物暴露前立即采集的测量值（0%）进行标准化。[1]
|
| 动物实验 |
免疫缺陷型NOD/Shi-scid/IL-2Rγ null (NOG)小鼠异种移植患者来源的ATL细胞及大鼠体内药代动力学研究 在MOLM-13人AML模型中进行体内疗效研究：将2×10^6个MOLM-13细胞悬浮于100% Matrigel中，皮下接种于雌性NMRI nu/nu小鼠（18-21 g，5-6周龄）左侧腹部。肿瘤细胞接种后3天开始治疗。每日口服一次BAY-958盐酸盐，剂量为30或40 mg/kg。以PEG400/水（80:10）作为溶剂对照。每周至少测量两次体重和肿瘤面积（最长径×垂直径）。 T/C 比值是通过在处死载体组动物时，将治疗组的平均肿瘤面积除以载体组的平均肿瘤面积计算得出的。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
大鼠肝细胞代谢稳定性：将肝细胞以1.0×10⁶个活细胞/mL的密度接种于含5%胎牛血清的Williams' E培养基中。加入终浓度为1 μM的测试化合物。将悬浮液以580 rpm振荡，分别于2、8、16、30、45和90 min取样，与等体积的冷乙腈混合，冷冻，离心，取上清液进行LC-MS/MS分析。根据浓度-时间曲线确定半衰期，并计算固有清除率。采用充分混合的肝脏模型计算肝脏体内血液清除率 (CLb) 和最大口服生物利用度 (Fmax)。[1]
大鼠肝微粒体代谢稳定性：采用类似方法，使用大鼠肝微粒体（细节未完全描述，但提供了 CLb 值）。[1] Caco-2 细胞渗透性：将 Caco-2 细胞以 4.5×10^4 个细胞/孔的密度接种于 24 孔插入板（孔径 0.4 μm）中，在含 10% FCS、1% GlutaMAX、青霉素/链霉素和非必需氨基酸的 DMEM 培养基中培养 15 天。每 2-3 天更换一次培养基。测定前，将培养基更换为不含 FCS 的 HEPES/碳酸盐转运缓冲液（pH 7.2）。将 2 μM 的测试化合物加入到顶端或基底外侧室。在 37°C 孵育 2 小时后，从两个隔室中取样，用甲醇沉淀，并通过 LC-MS/MS 分析。计算 AB 和 BA 方向的 Papp 值；外排比率 = Papp BA / Papp AB。[1] 大鼠药代动力学：雄性 Wistar 大鼠分别静脉注射 0.3-0.5 mg/kg 或灌胃给予 0.6-1 mg/kg 的 BAY-958，药物配制成含有增溶剂（例如 PEG400）的溶液。经颈静脉插管；分别于给药后 2 分钟（静脉注射）、8、15、30、45 分钟、1、2、4、6、8、24 小时采集血浆样本。用冰冷的乙腈 (1:5) 沉淀样本，并通过 LC-MS/MS 分析上清液。采用线性对数梯形法则计算AUC的PK参数。[1] 平衡摇瓶溶解度：将2 mg固体化合物溶于1 mL pH 6.5的磷酸盐缓冲液中，室温搅拌24 h，离心。取上清液，用高效液相色谱-紫外检测法（HPLC-UV）分析，并与校准曲线进行比对。测定溶解度值，单位为mg/L。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
BAY-958未显示出对细胞色素P450活性的显著抑制作用，IC50值>20 μM。然而，它具有CYP1A2诱导倾向（NOEL ≤5 μg/L），该倾向后来通过结构修饰得以消除。[1]
在体内疗效研究中，每日30或40 mg/kg的BAY-958盐酸盐耐受性良好，平均体重减轻不到10%，且未出现致命毒性。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
BAY-958是一种基于三嗪的PTEFb/CDK9抑制剂，带有苄基磺酰胺基团。它从拜耳化合物库中筛选而来，并被用作优化先导化合物。利用Glide对接程序和已发表的CDK9/CycT1复合物X射线晶体结构（PDB ID：3MY1），通过分子对接实验研究了BAY-958与CDK9的结合模式。结果表明，三嗪核心和苯胺NH基团介导了与铰链区的结合；苄基磺酰胺基团指向ATP口袋的出口；甲氧基苯基取代基指向核糖口袋；观察到BAY-958与铰链区形成两个氢键，磺酰胺基团的氨基部分形成两个氢键，以及甲氧基苯基部分与Phe103门控残基之间存在π-π堆积相互作用。对氟取代基与 Lys48 之间可能存在弱氢键。[1]
|
| 分子式 |
C17H16FN5O3S
|
|
|---|---|---|
| 分子量 |
389.40404510498
|
|
| 精确质量 |
389.095
|
|
| CAS号 |
1335490-39-5
|
|
| 相关CAS号 |
|
|
| PubChem CID |
53491924
|
|
| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
|
|
| LogP |
2.1
|
|
| tPSA |
129
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
9
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
|
| 重原子数目 |
27
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
575
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
|
| SMILES |
COC1=C(C=CC(=C1)F)C2=NC(=NC=N2)NC3=CC=CC(=C3)CS(=O)(=O)N
|
|
| InChi Key |
MGCPJSMHKDVTGW-UHFFFAOYSA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C17H16FN5O3S/c1-26-15-8-12(18)5-6-14(15)16-20-10-21-17(23-16)22-13-4-2-3-11(7-13)9-27(19,24)25/h2-8,10H,9H2,1H3,(H2,19,24,25)(H,20,21,22,23)
|
|
| 化学名 |
|
|
| 别名 |
|
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
|
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5681 mL | 12.8403 mL | 25.6805 mL | |
| 5 mM | 0.5136 mL | 2.5681 mL | 5.1361 mL | |
| 10 mM | 0.2568 mL | 1.2840 mL | 2.5681 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Antitumor efficacy in two AML models in mice and rats. A, B: Antitumor efficacy of BAY 1143572 in an MOLM‐13 human AML model in mice.ChemMedChem. 2017 Nov 8; 12(21): 1776–1793. |
|---|
Antitumor efficacy of BAY‐958 hydrochloride in an MOLM‐13 human AML model in mice.ChemMedChem. 2017 Nov 8; 12(21): 1776–1793. |
Docking mode of BAY‐958 in complex with CDK9.
X‐ray structure ofN‐acetyl derivative33.ChemMedChem. 2017 Nov 8; 12(21): 1776–1793. |
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
