BCIP

别名: 5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯对甲苯胺盐; 对甲苯胺蓝(BCIP); 5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯对甲苯胺盐[用于生化研究]; 5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯对甲苯胺盐 (BCIP);5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯对甲苯胺盐 BCIP;5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸;5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸 对甲苯胺盐;5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸(BCIP);BCIP 5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐; 对甲苯胺兰
目录号: V29747 纯度: ≥98%
BCIP(BCIP 对甲苯胺盐;X-磷酸对甲苯胺盐)是一种显色底物,用于比色检测碱性磷酸酶活性。
BCIP CAS号: 6578-06-9
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
100mg
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产品描述
BCIP(BCIP对甲苯胺盐;X-磷酸对甲苯胺盐)是一种用于比色法检测碱性磷酸酶活性的显色底物。
BCIP(CAS 6578-06-9),又称5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸对甲苯胺盐或X-磷酸对甲苯胺盐,是一种合成的显色底物,用于灵敏地比色检测碱性磷酸酶活性。BCIP的分子式为C₈H₆BrClNO₄P·C₇H₉N,分子量为433.62 g/mol,广泛应用于分子生物学、组织化学和免疫分析等领域。经碱性磷酸酶酶促裂解后,释放出吲哚中间体,该中间体随后被氧化生成不溶于水的靛蓝色沉淀。 BCIP常与硝基蓝四唑氯化物(NBT)联用,以提高染色灵敏度。与NBT联用时,最终产物不溶于水,呈紫色。BCIP有两种盐形式:一种是溶于水的二钠盐,另一种是溶于二甲基甲酰胺的对甲苯胺盐。该化合物为白色至类白色粉末,可用作碱性磷酸酶显色的底物,广泛应用于酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学、蛋白质印迹和原位杂交等多种实验中。
生物活性&实验参考方法
靶点
BCIP targets alkaline phosphatase (ALP), an enzyme that catalyzes the hydrolysis of phosphate esters. As a chromogenic substrate, BCIP is specifically cleaved by alkaline phosphatase, releasing an indoxyl intermediate that undergoes oxidative dimerization to form an insoluble indigo dye. The compound does not have a therapeutic target but rather serves as a detection tool for alkaline phosphatase activity in biological samples. Its substrate specificity for alkaline phosphatase makes it a valuable reagent for enzyme activity assays and visualization of ALP-labeled probes in various detection systems.
体外研究 (In Vitro)
BCIP本身不具有直接的生物活性,不作为治疗药物;其主要功能是作为碱性磷酸酶的显色底物。BCIP经碱性磷酸酶酶解后,会产生有色沉淀,可通过光学显微镜观察或分光光度法测定。该化合物的活性完全依赖于碱性磷酸酶的存在,因此可作为检测ALP标记抗体、核酸探针或其他ALP偶联分子的灵敏且特异的试剂。与NBT联用时,染色灵敏度显著提高。
体内研究 (In Vivo)
BCIP 是一种实验室试剂而非治疗药物,因此未在动物模型中进行体内活性评估。其应用领域为诊断和研究检测,用于检测组织切片、细胞或生物体液中的碱性磷酸酶活性。该化合物也可用于体外染色,对从动物研究中采集的组织样本进行组织病理学或免疫组织化学评估。
酶活实验
利用BCIP进行的体外非细胞酶活性测定包括将底物与碱性磷酸酶或ALP偶联探针在合适的缓冲体系中孵育。酶促反应释放出吲哚酚中间体,该中间体发生氧化二聚反应形成不溶性靛蓝沉淀。可通过比色法测定沉淀染料或测定可溶性产物的吸光度来监测反应进程。对于定量测定,通常终止反应,并在595 nm或其他合适的波长下测定吸光度。使用已知量的碱性磷酸酶制备标准曲线。
细胞实验
利用BCIP进行的体外细胞检测可通过免疫组织化学(IHC)、免疫细胞化学(ICC)或原位杂交(ISH)等方法进行。将细胞或组织切片与碱性磷酸酶偶联的抗体或探针孵育,随后加入BCIP底物溶液(通常与NBT联合使用)。酶促反应会在靶抗原或核酸序列位点产生有色沉淀。染色结果可通过光学显微镜观察,染色强度与靶分子的丰度相关。通常进行复染以观察细胞形态。
动物实验
由于BCIP是一种诊断底物而非治疗剂,因此不进行体内动物实验。该化合物可用于体外染色,对从动物实验中采集的组织切片进行组织病理学评估,或检测组织样本中的ALP活性。操作步骤遵循标准的免疫组织化学或组织化学方案,将组织切片与ALP偶联抗体和BCIP/NBT底物孵育以进行显色。
药代性质 (ADME/PK)
BCIP的分子量为433.62 g/mol,分子式为C₈H₆BrClNO₄P·C₇H₉N。其熔点为194-195°C,沸点为580.2°C(760 mmHg),LogP值为5.213。该化合物在DMSO中的溶解度≥51 mg/mL(约117.61 mM),在DMF中的溶解度为25 mg/mL(约57.65 mM)。粉末状BCIP应避光防潮保存,在-20°C下可保存长达三年,或在4°C下可保存长达两年。溶剂保存的BCIP可在-80°C下保存六个月,或在-20°C下保存一个月。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
BCIP在染色程序中使用的浓度下被认为是一种低毒性的实验室试剂。然而,在处理该化合物时,应遵循标准的实验室安全预防措施,包括使用适当的个人防护装备。该化合物可能引起皮肤和眼睛刺激。它被归类为研究用试剂,不适用于人类治疗用途。由于该化合物未用于体内实验,因此尚未进行全面的毒理学研究。
其他信息
BCIP 是一种碱性磷酸酶显色底物,也称为 5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸对甲苯胺盐或 X-磷酸对甲苯胺盐。它广泛用于 ELISA、免疫组织化学、蛋白质印迹和原位杂交等方法中检测碱性磷酸酶活性。该化合物常与 NBT 联用以提高染色灵敏度。BCIP 有两种盐形式:水溶性二钠盐和 DMF 可溶性对甲苯胺盐。本品未获准用于治疗用途;仅供研究和诊断应用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C8H6BRCLNO4P.C7H9N
分子量
433.62
精确质量
431.964
CAS号
6578-06-9
PubChem CID
81059
外观&性状
White to off-white solid powder
沸点
580.2ºC at 760 mmHg
熔点
194-195ºC
闪点
304.7ºC
LogP
5.213
tPSA
118.38
氢键供体(HBD)数目
4
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
2
重原子数目
24
分子复杂度/Complexity
377
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
QEIFSLUFHRCVQL-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C8H6BrClNO4P.C7H9N/c9-4-1-2-5-7(8(4)10)6(3-11-5)15-16(12,13)14;1-6-2-4-7(8)5-3-6/h1-3,11H,(H2,12,13,14);2-5H,8H2,1H3
化学名
(5-bromo-4-chloro-1H-indol-3-yl) dihydrogen phosphate;4-methylaniline
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ≥ 51 mg/mL (~117.61 mM)
DMF : 25 mg/mL (~57.65 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.3062 mL 11.5308 mL 23.0617 mL
5 mM 0.4612 mL 2.3062 mL 4.6123 mL
10 mM 0.2306 mL 1.1531 mL 2.3062 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们