| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Biotin-VAD-FMK targets caspases, a family of cysteine-aspartic proteases that are key mediators of apoptosis. Caspases are synthesized as inactive zymogens (procaspases) and are activated by proteolytic cleavage in response to apoptotic stimuli. Once activated, caspases cleave specific substrates, leading to the characteristic morphological and biochemical features of apoptosis. Biotin-VAD-FMK contains the VAD (Val-Ala-Asp) sequence, which is recognized by caspases, and the fluoromethyl ketone (FMK) group, which forms an irreversible covalent bond with the catalytic cysteine residue of active caspases. The biotin moiety enables detection and purification of labeled caspases. The compound is a pan-caspase inhibitor, targeting multiple caspase family members including caspase-1, -3, -4, -7, and -8.
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| 体外研究 (In Vitro) |
Biotin-VAD-FMK 是一种合成肽，以甲酯形式配制，以增加细胞通透性。
在体外，生物素-VAD-FMK可用于鉴定细胞裂解液和完整细胞中的活性caspase。该化合物通过FMK基团与活性caspase不可逆结合，从而可通过基于链霉亲和素的方法（例如Western印迹、ELISA或流式细胞术）检测caspase活性。由于甲基酯修饰，该化合物具有良好的细胞渗透性，能够标记活细胞中的caspase，从而研究caspase的激活动态。生物素-VAD-FMK还可用于亲和纯化活性caspase及其相互作用蛋白，以进行蛋白质组学分析。该化合物对caspase具有高度特异性，不会标记其他半胱氨酸蛋白酶。生物素-VAD-FMK是细胞凋亡研究中的标准试剂。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
使用仅能检测活性半胱天冬酶的生物素化半胱天冬酶抑制剂 biotin-VAD-fmk [2]，采用体内亲和标记技术来研究在没有蛋白水解切割的情况下半胱天冬酶-2 是否被激活。
由于生物素-VAD-FMK主要用于体外和离体实验，因此其体内数据有限。该化合物的细胞渗透性和不可逆结合使其可能用于体内标记活性半胱天冬酶，但其应用通常仅限于细胞培养和组织裂解液。该化合物仅供研究使用，不得用于人类治疗。在大多数研究环境中，不会将其用于活体动物。其药代动力学特性、生物利用度和组织分布尚未得到充分表征。 |
| 酶活实验 |
生物素-VAD-FMK的体外酶活性测定包括评估caspase活性的抑制和标记。将重组caspase或含有活性caspase的细胞裂解液与浓度为0.1-10 uM的生物素-VAD-FMK在37℃下孵育1-2小时。该化合物与活性caspase的催化半胱氨酸残基不可逆结合。然后使用链霉亲和素-HRP（辣根过氧化物酶）进行Western印迹检测，或使用链霉亲和素包被的酶联免疫吸附试验（ELISA）检测标记的caspase。对于活性测定，使用荧光底物（例如Ac-DEVD-AMC（用于caspase-3/7）或Ac-YVAD-AMC（用于caspase-1））测量caspase活性的抑制情况。测定抑制程度和标记情况。通过与非生物素化 VAD-FMK 的竞争，证实了标记的特异性。
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| 细胞实验 |
体外细胞实验中，生物素标记的VAD-FMK可用于凋亡细胞或具有组成型活性caspase的细胞。将细胞（例如Jurkat细胞、HeLa细胞或原代细胞）培养于适宜的培养基中，并用凋亡刺激物（例如星形孢菌素、依托泊苷、TNF-α/环己酰亚胺）处理以诱导caspase活化。然后将细胞与生物素标记的VAD-FMK（1-10 μM）在37℃下孵育30-60分钟。洗涤后，固定细胞并进行透化处理，以便使用与荧光染料（例如FITC、PE、APC）偶联的链霉亲和素进行流式细胞术分析。或者，制备细胞裂解液，并使用链霉亲和素-HRP进行Western印迹分析。检测生物素标记的caspase条带，并表征caspase活化的模式。该化合物能够识别哪些半胱天冬酶在特定刺激下被激活。
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| 动物实验 |
生物素-VAD-FMK 通常不进行体内动物实验，因为它是一种用于体外和离体研究的试剂。该化合物不适用于活体动物。对于半胱天冬酶活性的体内研究，研究人员通常使用非生物素化的半胱天冬酶抑制剂或针对体内应用优化的活性探针。生物素-VAD-FMK 用于研究组织裂解液和细胞提取物中的半胱天冬酶活性。对体内应用感兴趣的研究人员应查阅相关文献以获取最新信息。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
生物素-VAD-FMK（CAS号：1135688-15-1）的分子式为C30H4₉FN₆O₈S，分子量为672.81。该化合物是一种可透过细胞膜的不可逆生物素标记的半胱天冬酶抑制剂。它包含用于识别半胱天冬酶的VAD（Val-Ala-Asp）序列、用于与催化半胱氨酸发生不可逆共价结合的FMK（氟甲基酮）基团，以及用于检测和亲和纯化的生物素部分。该化合物设计为甲酯形式，以提高其细胞渗透性。它可用于鉴定和表征细胞裂解液和完整细胞中的活性半胱天冬酶。生物素-VAD-FMK为白色至浅黄色固体，纯度≥95%。储存条件：-20℃，可保存长达3年。该化合物仅供研究使用。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于生物素-VAD-FMK 是一种研究试剂，因此其毒理学信息有限。作为一种半胱天冬酶抑制剂，该化合物可能干扰细胞凋亡和其他半胱天冬酶依赖性过程。操作该化合物时应遵循标准实验室防护措施，包括使用个人防护装备并在通风良好的区域工作。避免吸入、摄入和皮肤接触。该化合物应储存在-20℃，并根据机构化学和生物废物处理指南进行处置。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
生物素-VAD-FMK（CAS号：1135688-15-1）是一种细胞可渗透的、不可逆的生物素标记的泛半胱天冬酶抑制剂，可用作检测和表征活性半胱天冬酶的探针。该化合物包含用于识别半胱天冬酶的VAD序列、用于与催化半胱氨酸共价结合的FMK基团以及用于基于链霉亲和素的检测和亲和纯化的生物素部分。生物素-VAD-FMK广泛应用于细胞凋亡研究，用于研究半胱天冬酶的激活、鉴定活性半胱天冬酶种类以及纯化含半胱天冬酶的复合物以进行蛋白质组学分析。该化合物仅供研究使用，尚未获准用于临床或治疗用途。截至目前，生物素-VAD-FMK仍为研究试剂。
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| 分子式 |
C30H49FN6O8S
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|---|---|
| 分子量 |
672.8089
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| 精确质量 |
672.331
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| CAS号 |
1135688-15-1
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| PubChem CID |
25108682
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| LogP |
0.8
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| tPSA |
226
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| 氢键供体(HBD)数目 |
6
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| 氢键受体(HBA)数目 |
10
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| 可旋转键数目(RBC) |
22
|
| 重原子数目 |
46
|
| 分子复杂度/Complexity |
1100
|
| 定义原子立体中心数目 |
6
|
| SMILES |
S1C([H])([H])[C@@]2([H])[C@@]([H])([C@]1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@@]([H])(C([H])([H])[H])C(N([H])[C@]([H])(C(C([H])([H])F)=O)C([H])([H])C(=O)OC([H])([H])[H])=O)=O)C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])=O)=O)N([H])C(N2[H])=O
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| InChi Key |
MOQLQMKJGYKHCT-VRKQFSAKSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C30H49FN6O8S/c1-17(2)26(29(43)33-18(3)28(42)34-19(21(38)15-31)14-25(41)45-4)36-24(40)12-6-5-9-13-32-23(39)11-8-7-10-22-27-20(16-46-22)35-30(44)37-27/h17-20,22,26-27H,5-16H2,1-4H3,(H,32,39)(H,33,43)(H,34,42)(H,36,40)(H2,35,37,44)/t18-,19-,20-,22-,26-,27-/m0/s1
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| 化学名 |
methyl (3S)-3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[6-[5-[(3aS,4S,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoylamino]hexanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-fluoro-4-oxopentanoate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 27.3 mg/mL (~40.58 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4863 mL | 7.4315 mL | 14.8630 mL | |
| 5 mM | 0.2973 mL | 1.4863 mL | 2.9726 mL | |
| 10 mM | 0.1486 mL | 0.7432 mL | 1.4863 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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