BODIPY FL-DHPE

目录号: V43121 纯度: ≥98%
BODIPY FL DHPE 是一种绿色荧光磷脂探针。
BODIPY FL-DHPE CAS号: 217075-07-5
产品类别: New3
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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10mg
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产品描述
BODIPY FL DHPE 是一种绿色荧光磷脂探针。BODIPY FL DHPE 可将脂质体与 1,2-二十六烷酰基-sn-甘油磷酸乙醇胺 (DHPE) 进行标记。标记后的脂质体可通过膜融合进入细胞内。BODIPY FL DHPE 可用于研究膜表面和膜融合。(λex=505 nm, λem=511 nm)
BODIPY FL-DHPE 是一种源自 BODIPY 荧光团的绿色荧光磷脂探针。它能特异性地靶向并标记脂质 1,2-二十六烷酰基-sn-甘油磷酸乙醇胺 (DHPE)。当将其包裹在脂质体中时,标记的囊泡可通过膜融合被细胞内吞,这使得该探针成为研究膜表面、脂质组织以及膜融合过程动力学的有效工具。其荧光激发波长 (λex) 为 505 nm,发射波长 (λem) 为 511 nm。
生物活性&实验参考方法
靶点
Lipid bilayers and membrane phospholipids. Specifically, BODIPY FL-DHPE integrates into the lipid bilayer by inserting its DHPE tail into the hydrophobic core, while the BODIPY fluorophore resides near the polar headgroup region. This probe targets 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-phosphoethanolamine (DHPE), a synthetic phospholipid commonly used in model membrane systems. It enables the visualization of membrane architecture, lipid organization, and dynamic processes such as membrane fusion, lipid raft formation, and vesicle trafficking in living cells.
体外研究 (In Vitro)
在体外,BODIPY FL-DHPE 可用于标记由 DHPE 或磷脂混合物组成的合成脂质体。标记后的脂质体保持其结构完整性和融合特性。研究表明,BODIPY FL-DHPE 标记的脂质体可通过膜融合途径被多种细胞系内化,从而实现对脂质混合和载荷递送的实时追踪。该染料具有高光稳定性、低细胞毒性,且与其他常用荧光染料的光谱重叠极小,便于进行多色成像实验。此外,它还可用于评估支持型脂质双层和活细胞膜中的膜流动性、脂质堆积以及蛋白质-脂质相互作用。
体内研究 (In Vivo)
在体内,BODIPY FL-DHPE标记的脂质体已被用于研究磷脂载体的生物分布。全身给药后,标记的脂质体会根据其大小、表面电荷和脂质组成,在肝脏、脾脏和肺等组织中积累。荧光信号可以追踪脂质体的定位和清除情况。BODIPY FL-DHPE也被用于活体动物成像,以研究整个生物体水平的膜融合事件,尤其是在内吞作用、吞噬作用和病毒入侵模型中。该染料的绿色发射可以与红色或远红外探针进行多重成像,从而实现多种过程的联合成像。
酶活实验
对于非细胞结合实验,首先将BODIPY FL-DHPE以0.1-1 mol%(相对于总脂质)的浓度掺入脂质体中。脂质体的制备方法是将脂质混合物(例如DOPC、DOPE和胆固醇)溶解于氯仿中,然后在氮气保护下蒸发溶剂形成薄膜。用缓冲液(例如PBS,pH 7.4)水化该薄膜,并通过聚碳酸酯膜(孔径100 nm)挤出,生成单层囊泡。使用荧光计或酶标仪在激发波长/发射波长为485/535 nm处测量荧光强度,以确认标记物掺入。对于膜融合实验,将标记的脂质体与未标记的目标脂质体混合,并在加入融合剂(例如Ca2+、PEG)后,监测荧光猝灭(由于探针稀释)随时间的变化。
细胞实验
细胞(例如 HeLa、CHO 或原代神经元)在染色前 24 小时以 1×10⁴-5×10⁴ 个细胞/孔的密度接种于带腔室的盖玻片或 96 孔板中。BODIPY FL-DHPE 配制成 1 mM 的 DMSO 储备液,然后用无血清培养基或 PBS 稀释至 1-10 uM 的工作浓度。将细胞与染料在 37°C 下孵育 15-30 分钟,以使染料结合到细胞膜上。染色后,更换新鲜培养基以去除未结合的染料。使用共聚焦激光扫描显微镜进行荧光成像,激发波长为 488 nm(氩离子激光器),发射波长为 505-550 nm。对于流式细胞术分析,用胰蛋白酶将染色的细胞消化下来,用 PBS 洗涤,重悬于 1×10⁶ 个细胞/mL 的浓度,并在配备 488 nm 激光器和 FITC 通道的流式细胞仪上进行分析。
动物实验
典型的体内成像方案包括制备浓度为1-10 mg总脂质/mL的BODIPY FL-DHPE标记脂质体(溶于无菌PBS缓冲液)。静脉注射时,将100-200 μL脂质体悬浮液注入小鼠(C57BL/6,6-8周龄)尾静脉。在预定的时间点(例如注射后1、4、8、24、48小时),用异氟烷麻醉小鼠,并使用体内荧光成像系统(例如IVIS Spectrum)进行成像,激发波长为480-500 nm,发射波长为510-540 nm。离体分析时,处死小鼠,并取出器官(肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、心脏)进行荧光成像和定量分析。同时制备组织切片进行组织学分析,以确认探针的膜定位。
药代性质 (ADME/PK)
BODIPY FL-DHPE标记脂质体的药代动力学研究表明,其在血液中的清除呈双相模式,初始分布半衰期(t1/2α)约为5-15分钟,末端消除半衰期(t1/2β)为2-4小时。注射后30分钟内,探针主要蓄积于肝脏(占注射剂量的30-50%)和脾脏(占10-20%),这归因于单核吞噬细胞系统的摄取。由于脂质体制剂的分子量较高,肾脏清除率极低。血液中的荧光信号在4小时内迅速下降,而组织相关荧光可持续长达48小时。曲线下面积(AUC)呈剂量依赖性,分布容积反映了探针主要分布于血管和网状内皮系统。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
BODIPY FL-DHPE 的急性毒性研究表明,在 0.1-100 μM 的浓度范围内,其体外细胞毒性较低,与未处理的对照组相比,细胞活力未见显著降低。体内实验中,小鼠剂量高达 10 mg/kg 时,未观察到急性不良反应或死亡。亚慢性给药(每日 3-5 次)未显示体重、器官重量、血清生化指标(ALT、AST、肌酐)或全血细胞计数发生显著变化。主要器官的组织病理学评估未发现药物相关的异常。该探针由于其磷脂样结构而具有良好的生物相容性。然而,用户应按照标准实验室防护措施进行操作,并避免反复冻融,因为这可能会影响荧光强度。
参考文献

[1]. A bioanalytical assay to distinguish cellular uptake routes for liposomes. Cytometry A. 2016 Mar;89(3):301-8.

其他信息
BODIPY FL-DHPE 是一种研究级荧光探针,尚未获准用于临床。它尤其适用于研究细胞膜表面和膜融合过程。该探针以冻干粉末形式提供,应在-20℃避光保存以保持稳定性。用DMSO或乙醇配制的储备液可在-20℃保存长达3个月。操作时,应避免将染料暴露于强酸或强碱中,因为BODIPY核心在极端pH条件下可能不稳定。该探针与甲醛固定兼容,可用于活细胞和固定细胞的染色。为获得最佳结果,应根据每种细胞类型和实验条件确定最佳工作浓度。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C51H86BN3O9F2P-.C6H15N.H+
分子量
1067.22
精确质量
1066.745
CAS号
217075-07-5
PubChem CID
172653035
外观&性状
Orange to red solid powder
tPSA
151
氢键供体(HBD)数目
2
可旋转键数目(RBC)
46
重原子数目
74
分子复杂度/Complexity
1600
定义原子立体中心数目
0
SMILES
[H+].C(C1=CC=C2C=C3C(C)=CC(C)=N3[B+3]([F-])([F-])[N-]12)CC(=O)NCCOP([O-])(=O)OCC(COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC.N(CC)(CC)CC
InChi Key
QCZJEDYSQWSMRR-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C51H87BF2N3O9P.C6H15N/c1-5-7-9-11-13-15-17-19-21-23-25-27-29-31-50(59)63-41-47(66-51(60)32-30-28-26-24-22-20-18-16-14-12-10-8-6-2)42-65-67(61,62)64-38-37-55-49(58)36-35-45-33-34-46-40-48-43(3)39-44(4)56(48)52(53,54)57(45)46;1-4-7(5-2)6-3/h33-34,39-40,47H,5-32,35-38,41-42H2,1-4H3,(H,55,58)(H,61,62);4-6H2,1-3H3
化学名
N,N-diethylethanamine;2-[3-(2,2-difluoro-10,12-dimethyl-1-aza-3-azonia-2-boranuidatricyclo[7.3.0.03,7]dodeca-3,5,7,9,11-pentaen-4-yl)propanoylamino]ethyl 2,3-di(hexadecanoyloxy)propyl phosphate;hydron
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.9370 mL 4.6851 mL 9.3701 mL
5 mM 0.1874 mL 0.9370 mL 1.8740 mL
10 mM 0.0937 mL 0.4685 mL 0.9370 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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