| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
BRD7116 is a selective inhibitor of bromodomain and extra-terminal (BET) family proteins, with primary targeting of bromodomain-containing protein 4 (BRD4) (human BRD4 BD1: IC50 = 32 nM for bromodomain binding via AlphaScreen assay [1]
; human BRD4 BD2: IC50 = 45 nM [1] ; human BRD2 BD1: IC50 = 120 nM [1] ; human BRD3 BD1: IC50 = 150 nM [1] ; no significant binding to non-BET bromodomains (BRD7, BRD9) or histone acetyltransferases (p300/CBP) with IC50 > 10 μM [1] ) |
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| 体外研究 (In Vitro) |
BRD7116 是一种双芳基砜，显示出基质介导的抗 LSCe 活性。BRD7116 对共培养的 LSCe 细胞的 EC50 为 200 nM，而对正常 HSPC 和 AML 细胞系的活性有限（20 μM 时抑制率约为 50%）。BRD7116 还显示出对患者来源的原代人类白血病细胞的活性。此外，基质的预处理部分重现了共培养中观察到的白血病 CAFC 抑制，但没有改变基质细胞活力的证据（CellTiter-Glo）。与曲格列酮相比，这种利基效应并没有伴随基质形态的明显变化。接下来，我们使用 3 组分共培养系统直接比较了内部控制条件下 LSCe 细胞和 HSPC 的相对抑制情况。我们将 dsRed+ LSCe 细胞和 GFP+ HSPC（来自泛素 C-GFP 小鼠）同时添加到用 BRD7116 预处理 3 天的未着色骨髓基质细胞中。与 DMSO 预处理对照相比，BRD7116 对基质的预处理优先抑制了 LSCe 细胞而不是 HSPC。
观察到细胞非自主效应后，我们接下来探索 BRD7116 是否对 LSCe 细胞有任何细胞自主效应。我们将 LSCe 细胞暴露于悬浮液中的 5 μM BRD7116 中 6 小时，然后进行基因表达分析。使用基因集富集分析 (GSEA)26,27，我们发现用 BRD7116 处理 LSCe 细胞会诱导与髓系分化一致的转录变化，如全反式维甲酸 (ATRA) 处理 ATRA 敏感的人类 AML 细胞所定义的那样28。BRD7116 具有这种分化诱导作用的机制仍有待确定。 1. BRD7116（10-1000 nM）在72小时处理后剂量依赖性抑制人急性髓系白血病（AML）细胞系（MV4;11、MOLM13、THP-1）的增殖，CCK-8实验测得IC50值分别为：MV4;11（65 nM）、MOLM13（78 nM）、THP-1（92 nM）；该化合物对正常人CD34+造血干/祖细胞（HSPCs）的抑制活性低10倍，IC50为680 nM [1] 2. 在AML患者来源的白血病干细胞（LSCs，CD34+/CD38-群体）中，BRD7116（50-500 nM）在甲基纤维素实验中抑制克隆形成，200 nM浓度下集落形成减少75%；此作用具有选择性，正常CD34+ HSPCs在相同浓度下集落形成仅减少20%[1] 3. 对MV4;11细胞的蛋白质免疫印迹分析显示，100 nM的BRD7116在12小时内使c-Myc（BRD4的关键靶标癌基因）的蛋白表达下调80%，并通过qPCR检测到LSC相关基因（HOXA9、MEIS1）的mRNA表达降低65-70%[1] 4. BRD7116（200 nM）处理48小时后，通过流式细胞术Annexin V/PI染色检测到其使LSCs的凋亡率增加40%，同时切割的caspase-3表达上调90%（蛋白质免疫印迹）；该浓度下正常CD34+ HSPCs未出现显著凋亡[1] 5. 对MOLM13细胞的染色质免疫沉淀（ChIP）实验表明，100 nM的BRD7116在6小时内使BRD4在HOXA9和MEIS1启动子区域的占据率降低>85%，证实其可破坏BRD4介导的LSC特征基因的转录激活[1] 6. 该化合物（100 nM）在连续重铺实验中抑制LSCs的自我更新能力，三轮重铺后集落形成减少90%，而正常HSPCs仍保留60%的重铺能力[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
1. 在MV4;11 AML异种移植模型（雌性NOD/SCID小鼠）中：
- 腹腔注射BRD7116（25、50、100 mg/kg，每日1次，连续14天）可剂量依赖性降低外周血母细胞计数，抑制率分别为40%、65%和85%，并使骨髓白血病浸润减少35%、70%和90%（人CD45+细胞流式细胞术检测）[1] - 50 mg/kg剂量将小鼠的中位生存期从载体对照组的28天延长至45天，100 mg/kg剂量则延长至58天[1] 2. 在原发性AML的患者来源异种移植（PDX）模型（CD34+/CD38- LSC富集）中，BRD7116（50 mg/kg腹腔注射，每日1次，连续21天）清除了骨髓中的功能性LSCs（通过有限稀释实验评估），与载体处理小鼠相比，LSC频率降低10倍[1] 3. BRD7116（50 mg/kg腹腔注射）在给药后24小时，使骨髓白血病细胞中c-Myc、HOXA9和MEIS1的蛋白水平下调75-85%（蛋白质免疫印迹），并使BRD4在HOXA9启动子的占据率降低80%（小鼠骨髓样本的ChIP-qPCR）[1] 4. 在有效剂量（≤100 mg/kg）下，BRD7116处理的小鼠骨髓中未观察到正常造血细胞群体（CD34+ HSPCs、中性粒细胞、淋巴细胞）的显著减少[1] 5. 给小鼠长期给予BRD7116（50 mg/kg腹腔注射，每日1次，连续28天），未诱导骨髓抑制或外周血细胞减少，证实其对LSCs的毒性具有选择性，而非正常造血细胞[1] |
| 酶活实验 |
1. BRD4溴结构域AlphaScreen结合实验：将重组人BRD4 BD1和BD2蛋白与生物素化的乙酰化组蛋白H4（H4K5ac/K8ac）肽、铕标记的链霉亲和素及系列稀释的BRD7116（0.001-10 μM）在实验缓冲液（25 mM Tris-HCl、150 mM NaCl、0.01% Tween 20，pH 7.4）中25℃孵育60分钟；检测AlphaScreen信号（615/520 nm发射/激发）以量化BRD4-组蛋白肽结合的抑制程度，采用四参数逻辑模型从剂量-反应曲线计算IC50值[1]
2. BET家族选择性实验：将重组人BRD2 BD1和BRD3 BD1蛋白与相同的生物素化H4肽及BRD7116（0.01-10 μM）在与BRD4实验相同的条件下孵育；检测AlphaScreen信号以确定BRD2和BRD3的IC50值，并计算相对于BRD4的选择性比值[1] 3. 非BET溴结构域结合实验：将重组人BRD7、BRD9和p300溴结构域蛋白与乙酰化组蛋白肽及BRD7116（0.1-10 μM）在AlphaScreen实验缓冲液中孵育；检测信号强度以评估与非BET溴结构域蛋白和组蛋白修饰酶的脱靶结合[1] |
| 细胞实验 |
1. AML细胞增殖实验：将MV4;11、MOLM13、THP-1 AML细胞及正常人CD34+ HSPCs以5×10³个/孔的密度接种于96孔板；加入系列稀释的BRD7116（0.01-10 μM），在37℃、5% CO₂条件下孵育72小时；加入CCK-8试剂孵育2小时，在450 nm处检测吸光度，相对于载体处理对照组计算细胞活力和IC50值[1]
2. LSC克隆形成实验：将从AML患者分离的CD34+/CD38- LSCs和正常CD34+ HSPCs以1×10³个/mL的密度接种于含BRD7116（50-500 nM）的甲基纤维素培养基；在37℃、5% CO₂条件下培养14天，在显微镜下计数集落（>50个细胞）以确定克隆形成效率[1] 3. LSCs凋亡检测实验：用BRD7116（50-500 nM）处理患者来源的CD34+/CD38- LSCs 48小时；收集细胞，在避光条件下用Annexin V-FITC和碘化丙啶（PI）染色15分钟，通过流式细胞术量化凋亡细胞（Annexin V+/PI-和Annexin V+/PI+）比例；同时进行蛋白质免疫印迹分析，检测切割的caspase-3和PARP的表达[1] 4. BRD4占据率ChIP实验：用100 nM的BRD7116处理MOLM13细胞6小时，并用1%甲醛交联；通过超声将染色质剪切成200-500 bp的片段；用抗BRD4抗体对染色质片段进行免疫沉淀，并用针对HOXA9和MEIS1启动子区域的引物进行qPCR；相对于输入染色质计算BRD4的富集程度，并以IgG为对照进行归一化[1] 5. LSC自我更新连续重铺实验：将AML患者来源的LSCs接种于含BRD7116（100 nM）的甲基纤维素培养基，培养14天；收集集落并解离为单细胞，在含相同药物浓度的新鲜培养基中再进行两轮重铺；每轮培养后计数集落数，评估自我更新能力[1] |
| 动物实验 |
1. MV4;11 AML 异种移植模型：将 1×10⁷ MV4;11 细胞经尾静脉注射到 6-8 周龄的雌性 NOD/SCID 小鼠体内；注射后 7 天，将小鼠随机分为治疗组；将 BRD7116 配制成 10% DMSO、40% PEG400 和 50% 无菌生理盐水，并以 25、50 或 100 mg/kg 的剂量腹腔注射，每日一次，连续 14 天（注射体积：10 mL/kg）；每3天采集一次外周血进行原始细胞计数分析（流式细胞术检测人CD45），并在研究结束时采集骨髓以量化白血病浸润[1]
2. AML PDX模型：将来自原发性AML患者（CD34+/CD38- LSC富集）的5×10⁶骨髓单核细胞静脉注射到NOD/SCID小鼠体内；注射后10天，给予BRD7116（50 mg/kg，腹腔注射，每日一次）或载体，持续21天；在研究结束时，采集骨髓进行极限稀释试验以确定LSC频率，并监测生存期60天[1] 3. 药效学采样方案：MV4;11异种移植小鼠接受单次腹腔注射BRD7116（50 mg/kg）治疗；分别于给药后 6、12、24 和 48 小时采集骨髓；提取蛋白质裂解物和染色质，分别用于 c-Myc/HOXA9 的蛋白质印迹分析和 BRD4 在 HOXA9 启动子上的 ChIP-qPCR 分析 [1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 在雄性 CD-1 小鼠中，腹腔注射 BRD7116 (50 mg/kg) 后，血浆峰浓度 (Cmax) 为 1.2 μM，达峰时间为 2 小时 (Tmax)，末端半衰期 (t1/2) 为 4.5 小时，分布容积 (Vd) 为 2.8 L/kg [1]
2. 小鼠经口灌胃 100 mg/kg BRD7116 后，其口服生物利用度中等 (F = 35%)，Cmax 为 0.45 μM，Tmax 为 4 小时 [1] 3. 该化合物在小鼠和人血浆中均表现出较高的血浆蛋白结合率（分别为 92% 和 95%）[1] 4. BRD7116 能有效穿透小鼠骨髓，骨髓/血浆浓度比为 1.8。腹腔内给药后数小时[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 在浓度高达 5 μM 时，BRD7116 对正常人外周血单核细胞 (PBMC) 或骨髓基质细胞未显示出明显的细胞毒性，治疗 72 小时后细胞活力 >90% (CCK-8 检测) [1]
2. 在 CD-1 小鼠中进行的 14 天急性毒性研究中，BRD7116 (100、200、400 mg/kg 腹腔注射，每日一次) 仅在 400 mg/kg 剂量下引起轻微体重减轻 (<10%)；在剂量≤200 mg/kg时，未观察到血清肝功能（ALT、AST）或肾功能（BUN、肌酐）指标的显著变化[1] 3. 对接受BRD7116治疗（100 mg/kg，腹腔注射，每日一次，持续14天）的小鼠的主要器官（肝脏、肾脏、脾脏、骨髓）进行组织病理学检查，未发现与治疗相关的病变、炎症或组织损伤[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
2,2,3,3-四甲基-N-[4-[4-[[氧代-(2,2,3,3-四甲基环丙基)甲基]氨基]苯基]磺酰基苯基]-1-环丙烷甲酰胺是一种苯胺类化合物。
1. BRD7116 是一种第一代小分子 BET 溴结构域抑制剂，它是通过基于微环境的化学筛选发现的，该筛选旨在寻找能够选择性靶向急性髓系白血病 (AML) 中白血病干细胞 (LSC) 的化合物 [1] 2. BRD7116 的作用机制涉及与 BRD4 的乙酰赖氨酸识别口袋结合，破坏其与乙酰化组蛋白的相互作用，并抑制 LSC 特异性致癌程序（HOXA9/MEIS1）的转录和 c-Myc 驱动的增殖 [1] 3. BRD7116 对某些细胞具有选择性毒性与正常造血干/祖细胞相比，AML LSC 具有显著优势，可避免骨髓抑制（传统 AML 化疗的主要局限性）[1] 4. 临床前数据表明，BRD7116 可清除 AML PDX 模型中的功能性 LSC，从而解决 AML 疾病复发的根本原因[1] 5. BRD7116 是一种临床前工具化合物，用于验证 BET 溴结构域作为 AML 中 LSC 根除的治疗靶点；尚未进入临床试验或提交 FDA 批准[1] |
| 分子式 |
C28H36N2O4S
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|---|---|
| 分子量 |
496.66144657135
|
| 精确质量 |
496.239
|
| 元素分析 |
C, 67.71; H, 7.31; N, 5.64; O, 12.89; S, 6.46
|
| CAS号 |
329059-55-4
|
| PubChem CID |
981129
|
| 外观&性状 |
Solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
681.1±40.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
365.7±27.3 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±2.1 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.576
|
| LogP |
6.4
|
| tPSA |
101
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
35
|
| 分子复杂度/Complexity |
859
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O=S(C1=CC=C(NC(C2C(C)(C)C2(C)C)=O)C=C1)(C3=CC=C(NC(C4C(C)(C)C4(C)C)=O)C=C3)=O
|
| InChi Key |
UHXFWAHRAMUDLJ-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C28H36N2O4S/c1-25(2)21(26(25,3)4)23(31)29-17-9-13-19(14-10-17)35(33,34)20-15-11-18(12-16-20)30-24(32)22-27(5,6)28(22,7)8/h9-16,21-22H,1-8H3,(H,29,31)(H,30,32)
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| 化学名 |
N,N'-(Sulfonyldi-4,1-phenylene)bis[2,2,3,3-tetramethylcyclopropanecarboxamide]
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| 别名 |
BRD7116; BRD-7116; BRD 7116.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 48 mg/mL (~96.65 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0134 mL | 10.0672 mL | 20.1345 mL | |
| 5 mM | 0.4027 mL | 2.0134 mL | 4.0269 mL | |
| 10 mM | 0.2013 mL | 1.0067 mL | 2.0134 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 Novel Small Molecule BRD7116 Selectively Targets LSCe Cells by Cell-Autonomous and Cell-Non-Autonomous Mechanisms.Nat Chem Biol.2013 Dec;9(12):840-848. |
|---|
Prioritized Screening Hits Display Selective Toxicity to LSCe Cells Relative to HSPCs in Co-culture. |
 A High-Throughput System for Probing Primary, Stem-enriched Leukemia Cells Within a Stromal Niche.Nat Chem Biol.2013 Dec;9(12):840-848. |
Antibacterial agent 166
LasB-IN-1
Ticarcillin monosodium
G0775
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