| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Nurr1
Nurr1 (NR4A2, orphan nuclear receptor). C-DIM12 activates Nurr1 and enhances its transcriptional activity. No IC50, Ki, EC50, or DC50 values are provided in these manuscripts [1,2,3]. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
C-DIM12 可诱导细胞系和原代神经元中 Nurr1 和 DA 基因的表达[3]。体外实验表明,C-DIM12 可抑制星形胶质细胞的炎症信号通路。一氧化氮合酶 (NOS2)、白细胞介素-6 (IL-6) 和趋化因子 (CC 基序) 配体 2 (CCL2) 均为 NF-κB 调控基因,在 BV-2 小胶质细胞中,脂多糖 (LPS) 可抑制这些基因的表达。Nurr1 RNA 干扰可减弱这些抑制作用。此外,C-DIM12 可增加 Nurr1 原代小胶质细胞的核转位,同时降低 NF-κB-GFP 报告细胞中 NF-κB 的激活。C-DIM12 可增加 Nurr1 与 p65 结合位点的结合,同时降低脂多糖诱导的 p65 与 NOS2 启动子的结合。此外,C-DIM12 稳定了 CoREST(抑制元件 1 沉默转录因子的共抑制因子)和 NCOR2(核受体共抑制因子 2)的结合[2]。
在 BV-2 小胶质细胞中,C-DIM12(10 μM)以剂量依赖的方式(0.1、1、10 μM)抑制了 LPS 诱导的 NF-κB 调节的炎症基因(包括 NOS2、TNFα、IL-6、CCL5 和 CCL2)的 mRNA 表达。通过 RNAi 敲低 Nurr1 可消除这种抑制作用,表明这是一种 Nurr1 依赖性机制 [2]。 在 NF-κB/GFP HEK293 报告细胞中,C-DIM12 (100 μM) 显著降低了 TNFα (30 ng/ml) 诱导的 NF-κB/GFP 表达,与阳性对照 Bay-11 (50 μM) 的效果相当 [2]。 C-DIM12 不阻止 LPS 处理的 BV-2 小胶质细胞中 p65 的核转位;相反,它增强了 p65 的核内水平。然而,它降低了LPS诱导的p65丝氨酸磷酸化(趋势)[2]。 在BV-2细胞中进行的ChIP实验表明,C-DIM12(10 μM)降低了p65与NOS2启动子的结合,增加了Nurr1向p65结合位点的募集,并增强了核心抑制因子NCOR2和CoREST与NOS2启动子的结合[2]。 在原代小鼠小胶质细胞中,C-DIM12(10 μM)与LPS(1 μg/ml)共同处理24小时后,Nurr1的核转位增加[2]。 在N2A和N27多巴胺能神经元细胞系中,C-DIM12(5-10 μM)诱导了Nurr1、酪氨酸羟化酶(TH)和囊泡单胺转运蛋白2的mRNA表达呈时间和剂量依赖性增加。 (VMAT2)。通过 RNAi 敲低 Nurr1 可消除这些效应,表明存在 Nurr1 依赖性机制 [3]。 在转染 FLAG 标记的人 Nurr1 的 N2A 细胞中,C-DIM12(10 μM,24 小时)可增加 FLAG 和 Nurr1 的核荧光强度 [3]。 在原代小鼠多巴胺能神经元中,C-DIM12(10 μM,24 小时)可增加 TH 阳性神经元中 Nurr1 和 TH 的表达 [3]。 在分化的 MN9D 细胞和未分化的 N2A 细胞中,C-DIM12(10 μM)与 6-OHDA(MN9D 细胞为 100 μM,N2A 细胞为 10 μM)联合处理可显著提高细胞活力,与单独使用 6-OHDA 相比(N2A 细胞 P<0.05,N2A 细胞 P<0.01)。 MN9D) [3]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
C-DIM12 在 MPTPp 处理的小鼠中具有神经保护活性[2]。
在用 MPTP 和丙磺舒 (MPTPp) 建立的帕金森病小鼠模型中,C-DIM12(50 mg/kg,每日灌胃,连续 7 天,在 MPTPp 处理 7 天后给药)显著保护了黑质致密部 (SNpc) 中酪氨酸羟化酶 (TH) 阳性多巴胺能神经元的丢失,并且与 MPTPp14d 载体对照组相比,阻止了纹状体中 TH 纤维密度的进一步丢失。立体定量分析显示TH+神经元显著保留[1]。 C-DIM12治疗减弱了MPTPp诱导的黑质和纹状体中小胶质细胞(IBA-1+)和星形胶质细胞(GFAP+)的活化,减少了活化胶质细胞的数量[1]。 C-DIM12降低了转基因NF-κB/EGFP小鼠黑质中MPTPp诱导的NF-κB/EGFP报告基因的表达,表明NF-κB活性受到抑制。共定位分析显示,星形胶质细胞和小胶质细胞中的EGFP表达均降低[1]。 C-DIM12可抑制MPTPp诱导的神经元死亡(通过MAP2+神经元计数测定),并降低TH+神经元中硝基酪氨酸加合物的形成和γH2AX(DNA损伤标志物)的表达[1]。 C-DIM12可维持MPTPp处理小鼠纹状体中TH、DAT和VMAT2蛋白的水平,并改善后肢步幅(运动功能的一项指标)[1]。 C-DIM12可增加Nurr1的表达,并促进Nurr1在黑质致密部(SNpc)TH+神经元中的核定位,即使在MPTPp处理后21天也是如此[1]。 对黑质组织进行定量PCR芯片分析表明,C-DIM12可降低MPTPp诱导的NF-κB调控因子的表达。炎症基因包括 TNFα、IL-1α、CCL2、Caspase-1 和 TLR4 [1]。 |
| 细胞实验 |
在 100 μM C-DIM12 存在下,NF-B-GFP HEK 细胞暴露于 30 ng/ml TNF 长达 24 小时。TNF 处理后,C-DIM12 可有效抑制 NF-B-GFP HEK 细胞中 NF-B-GFP 的表达,导致每个细胞的总 GFP 荧光强度出现统计学意义上的显著下降。
BV-2 小胶质细胞:细胞在无血清培养基中用 C-DIM12 (0.1-10 μM) 预处理 1 小时,然后用 LPS (1 μg/ml) 刺激 24 小时。提取 RNA 并进行 qPCR 检测炎症基因(NOS2、TNFα、IL-6、IL-1β、CCL2、CCL5)的表达。对于 RNAi,在处理前 24 小时转染 Nurr1 siRNA 或 DsiRNA。对于 ChIP 实验,细胞用甲醛固定,染色质剪切,用抗 p65、抗 Nurr1、抗 NCOR2 或抗 CoREST 抗体进行免疫沉淀,并对 NOS2 启动子区域进行 qPCR 分析 [2]。 NF-κB/GFP HEK293 报告细胞:细胞用 TNFα (30 ng/ml) ± C-DIM12 (25-100 μM) 或 Bay-11 (30-50 μM) 处理 24 小时。定量 GFP 荧光并以 DAPI 进行标准化 [2]。 免疫荧光:BV-2 细胞或原代小胶质细胞用多聚甲醛或甲醇固定,用抗 p65、抗 Nurr1、抗 CD11b 和 DAPI 染色,并通过荧光显微镜或共聚焦显微镜成像。核荧光强度定量[2]。 N2A 和 N27 细胞:用 C-DIM12 (5-10 μM) 处理 4-24 小时,进行 Nurr1、TH 和 VMAT2 的 qPCR 分析。对于 RNAi,在处理前 48 小时转染 Nurr1 DsiRNA。转染:在用C-DIM12处理前24小时转染FLAG-Nurr1质粒,然后进行FLAG和Nurr1的免疫荧光染色[3]。 原代多巴胺能神经元:从E18小鼠腹侧中脑分离,培养1周,用C-DIM12(10 μM)或DMSO处理24小时,然后进行TH和Nurr1的免疫染色,并定量荧光强度[3]。 细胞活力:用6-OHDA±C-DIM12(10 μM)处理MN9D(丁酸钠诱导分化)或N2A细胞24小时,用PrestoBlue试剂测定细胞活力[3]。 |
| 动物实验 |
转基因 NF-κB/EGFP 报告基因小鼠(C57Bl/6 背景)
50 mg/kg 口服给药 静脉注射,灌胃 MPTPp 小鼠模型:成年 NF-κB/EGFP 报告基因小鼠(C57Bl/6)每隔一天腹腔注射丙磺舒(250 mg/kg),4 小时后皮下注射 MPTP(20 mg/kg),持续 7 天(MPTP 总剂量 80 mg/kg)。第 7 天后,每天灌胃一次溶于玉米油的 C-DIM12(50 mg/kg),持续 7 天(MPTPp14d 组)。对照组灌胃生理盐水或玉米油。分别于第 7 天和第 14 天处死小鼠。用 4% 多聚甲醛灌注组织,将脑组织切片(40 μm)用于免疫组织化学染色。行为学评估:使用有机玻璃轨迹板和视频记录,在第 0、7 和 14 天测量后肢步长 [1]。 对于蛋白质印迹分析,将纹状体组织在 RIPA 缓冲液中匀浆,通过 SDS-PAGE 分离蛋白质,并进行 TH、DAT、VMAT2 和 β-肌动蛋白的免疫印迹分析 [1]。 对于 qPCR 芯片分析,从黑质中分离 RNA,合成 cDNA,并使用 NF-κB 通路特异性 384 孔板 (PAMM-025Z) 进行 RT-qPCR [1]。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
C-DIM12 是一种对氯苯基取代的二吲哚甲烷 (C-DIM),可激活孤儿核受体 Nurr1 (NR4A2)。基于构效关系研究,该化合物被选中用于体内疗效研究。研究表明,苯环上较小、极性更强的对位取代基可增强抗炎活性。C-DIM12 在苯环的对位上有一个氯取代基。据推测,其作用机制是通过增强 Nurr1 介导的神经胶质细胞中 NF-κB 调控的炎症基因的转录抑制,从而保护多巴胺能神经元免受神经炎症损伤 [1,2,3]。该化合物还可通过 Nurr1 诱导 TH 和 VMAT2 的表达,直接支持多巴胺能神经元的表型 [3]。
|
| 分子式 |
C23H17CLN2
|
|
|---|---|---|
| 分子量 |
356.85
|
|
| 精确质量 |
356.108
|
|
| 元素分析 |
C, 77.41; H, 4.80; Cl, 9.93; N, 7.85
|
|
| CAS号 |
178946-89-9
|
|
| 相关CAS号 |
|
|
| PubChem CID |
5302583
|
|
| 外观&性状 |
Light Brown solid powder
|
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
|
| 沸点 |
585.6±45.0 °C at 760 mmHg
|
|
| 闪点 |
336.1±14.3 °C
|
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.6 mmHg at 25°C
|
|
| 折射率 |
1.747
|
|
| LogP |
6.13
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
0
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
|
| 重原子数目 |
26
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
443
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
|
| SMILES |
ClC1C=CC(C(C2=CNC3=CC=CC=C23)C2=CNC3=CC=CC=C23)=CC=1
|
|
| InChi Key |
FIDOCHXHMJHKRW-VHQVDBNASA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C33H45NO10/c1-17(35)44-33-21-19(14-31(38,28(42-6)26(33)36)27(21)43-29(37)18-10-8-7-9-11-18)32-20(40-4)12-13-30(16-39-3)15-34(2)25(32)22(33)23(41-5)24(30)32/h7-11,19-28,36,38H,12-16H2,1-6H3/t19-,20+,21-,22+,23+,24-,25?,26+,27-,28+,30+,31-,32+,33-/m1/s1
|
|
| 化学名 |
[(1S,2R,3R,4R,5R,6S,7S,8R,9R,13S,16S,17R,18R)-8-acetyloxy-5,7-dihydroxy-6,16,18-trimethoxy-13-(methoxymethyl)-11-methyl-11-azahexacyclo[7.7.2.12,5.01,10.03,8.013,17]nonadecan-4-yl] benzoate
|
|
| 别名 |
|
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
|
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8023 mL | 14.0115 mL | 28.0230 mL | |
| 5 mM | 0.5605 mL | 2.8023 mL | 5.6046 mL | |
| 10 mM | 0.2802 mL | 1.4011 mL | 2.8023 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
C-DIM12 induces expression of Nurr1-regulated genes in dopaminergic cell lines by Nurr1 dependent mechanism.Neurosci Lett.2015 Oct 21;607:83-89. doi th> |
|---|
C-DIM12 induces expression of tranfected human Nurr1 in N2A cells and induces expression of TH in primary dopaminergic neurons.Neurosci Lett.2015 Oct 21;607:83-89. doi td> |
Treatment with C-DIM12 is neuroprotective against 6-hydroxydopamine in MN9D and N2A cells.Neurosci Lett.2015 Oct 21;607:83-89. doi td> |