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C-Phycocyanin

别名: Spirulina extract 藻蓝蛋白;C-藻蓝素;C-藻蓝蛋白;异藻蓝蛋白(APC);C-PC(C-藻蓝蛋白);藻蓝蛋白E25 E18 E26;藻蓝蛋白,(藻蓝素);C-藻蓝素/藻蓝蛋白/藻青蛋白抗体
目录号: V33905 纯度: Total protein content=83.59%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
C-藻蓝蛋白（C-PC）是一种蛋白质色素，也广泛用作人类的优良营养补充剂。
C-Phycocyanin CAS号: 11016-15-2
产品类别: New2
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
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纯度: Total protein content=83.59%

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产品说明书
产品描述
C-藻蓝蛋白 (C-PC) 是一种蛋白质色素，也被广泛用作人类的优质营养补充剂。
C-藻蓝蛋白 是一种从螺旋藻 (Spirulina platensis) 中提取的水溶性蛋白质色素。它由 α 和 β 亚基组成，其天然存在形式为三聚体聚集体 (αβ)₃。C-藻蓝蛋白 因其抗氧化、抗病毒、抗肿瘤和清除自由基的作用而成为一种知名的保健食品。[1]
生物活性&实验参考方法
体外研究 (In Vitro)
在联合用药研究中，当细胞同时接受藻蓝蛋白和全反式维甲酸（ATRA）处理时，IC50值低于ATRA组。然而，在相同的IC50值下，藻蓝蛋白用量越多，ATRA用量越少。结果表明，ATRA和藻蓝蛋白联合使用可显著降低CDK-4 mRNA水平（P<0.05）。与突变体、藻蓝蛋白或ATRA单独处理组相比，藻蓝蛋白+ATRA联合处理组的积分光密度（IOD）显著增加（P<0.05），且联合处理组的差异进一步扩大（P<0.01）。该组的联合指数（CI）值为0.852，小于1。虽然联合组的caspase-3表达最高，但C-藻蓝蛋白组的表达量最高，与ATRA组相当[1]。
C-藻蓝蛋白单独使用即可浓度依赖性地抑制A549肺癌细胞的增殖。C-藻蓝蛋白单独使用48小时后的IC₅₀值为176.62 ± 6.38 μg/l。[1]
C-藻蓝蛋白（88 μg/l）与全反式维甲酸（0.102 mM）联合使用显示出协同抗肿瘤作用，联合指数（CI）为0.852（CI < 1表示协同作用）。当与C-藻蓝蛋白联用时，ATRA的剂量可以降低。[1]
C-藻蓝蛋白单独使用可降低A549细胞中CDK-4 mRNA的水平，这已通过原位杂交法测定。与对照组相比，C-藻蓝蛋白处理组的CDK-4 mRNA的整合光密度（IOD）显著降低（P < 0.05）。[1]
TUNEL检测显示，C-藻蓝蛋白单独使用可诱导A549细胞凋亡。与对照组相比，C-藻蓝蛋白处理组的凋亡细胞的IOD值升高（P < 0.05）。 [1]
C-藻蓝蛋白单独使用可上调A549细胞中caspase-3蛋白的表达，Western blot结果显示，caspase-3/β-actin的灰度比值高于对照组（P < 0.05）。[1]
体内研究 (In Vivo)
与对照组相比，C-藻蓝蛋白或ATRA治疗组的平均肿瘤重量显著降低，而C-藻蓝蛋白+ATRA协同治疗组的肿瘤重量更低。结果表明，单用C-藻蓝蛋白即可增加小鼠肝脏重量，并且C-藻蓝蛋白能够增强免疫功能，促进小鼠免疫器官的发育。单独使用C-藻蓝蛋白和ATRA均可显著降低细胞周期蛋白D1的生成，联合使用时抑制作用更为显著[1]。在携带A549肿瘤异种移植瘤的NU/NU小鼠中，单独使用C-藻蓝蛋白（每日向肿瘤区域注射0.2 ml浓度为320 mg/ml的C-藻蓝蛋白，连续10天）治疗可显著降低肿瘤重量，与对照组相比差异显著（4.538 ± 0.043 g vs. 6.057 ± 0.033 g，P < 0.05）。[1]单独使用C-藻蓝蛋白可增加荷瘤小鼠的脾脏重量（1.456 ± 0.055 g），与对照组（1.034 ± 0.11 g）相比差异显著（P < 0.05）。 [1] 单独使用C-藻蓝蛋白可增强T淋巴细胞活性，特异性玫瑰花结形成试验（SRFC）结果显示，与对照组（16,724 ± 321）相比，C-藻蓝蛋白组（20,254 ± 352/10⁶淋巴细胞）显著升高（P < 0.05）。MTT试验也显示光密度值增加（1.425 ± 0.108 vs. 0.978 ± 0.087，P < 0.05）。[1] 单独使用C-藻蓝蛋白可增加脾细胞上清液中TNF含量，与对照组相比显著升高（P < 0.05）。[1] 单独使用C-藻蓝蛋白可降低肿瘤组织中Bcl-2蛋白的表达，免疫组化结果显示其显著降低（P < 0.05）。 [1]
C-藻蓝蛋白单独使用可抑制肿瘤组织中细胞周期蛋白D1的表达，免疫荧光检测结果显示P < 0.05。[1]
细胞实验
A549细胞在添加10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中，于37℃、5% CO₂的条件下培养。所有实验均使用指数生长期细胞。[1]
对于MTT增殖实验，将细胞（1×10⁴个细胞/孔）接种于96孔板中，每孔加入100 μl培养基，培养过夜。然后，加入不同浓度的C-藻蓝蛋白（溶于100 μl培养基中），孵育48小时。随后，向每孔加入20 μl MTT溶液，于37℃孵育4小时。弃去培养基，用100 μl DMSO溶解甲臜晶体，并使用分光光度计在490 nm处测定吸光度。吸光度值以处理组与未处理对照组的百分比表示。计算半数抑制浓度 (IC₅₀)。[1]
为进行 CDK4 mRNA 的原位杂交 (ISH) 检测，将 A549 细胞接种于 6 孔板中聚赖氨酸包被的盖玻片上，用药物处理 48 小时，然后在室温下用新鲜配制的 4% 多聚甲醛溶液固定 30 分钟。用 3% H₂O₂ 灭活内源性过氧化物酶。用胃蛋白酶（溶于 3% 柠檬酸）在 37°C 下消化 2 分钟以暴露结合位点。在 38°C 下进行 4 小时的预杂交，随后在 38°C 下与地高辛标记的人 CDK4 mRNA 寡核苷酸探针（5'-ACCTT TAACC CACAT AAGCG AATCT CTGCC TT-3'）杂交 12 小时。将盖玻片依次用 2× SSC 洗涤 5 分钟，0.5× SSC 洗涤 15 分钟，0.2× SSC 洗涤 15 分钟（37°C）。细胞在封闭缓冲液中孵育 30 分钟，然后在 37°C 下用小鼠抗地高辛 IgG 孵育 60 分钟。用 PBS 洗涤后，将盖玻片浸入链霉亲和素-生物素复合物 (SABC) 中 20 分钟，然后在 37°C 下浸入生物素标记的过氧化物酶中 30 分钟。最后，用二氨基联苯胺 (DAB) 染色，并在光学显微镜下观察。使用 Image-Pro Plus 软件计算各组的积分光密度 (IOD)，并将其作为 CDK4 mRNA 水平的指标。[1]
对于 TUNEL 凋亡检测，A549 细胞用 PBS 洗涤后，用 4% 多聚甲醛固定。 DNA断裂依次用TdT、溴脱氧尿苷三磷酸（BrdUTP）和DIG标记的抗BrdU抗体进行标记。然后，细胞依次在封闭缓冲液、生物素标记的抗地高辛IgG、SABC和DAB中孵育。使用Image-Pro Plus软件计算各组的IOD值，并将其作为细胞凋亡水平的指标。[1]
为了进行caspase-3蛋白的Western blot检测，收集A549细胞，用冰冷的PBS洗涤两次，在冰上裂解2小时，并在4℃下离心以去除不溶性物质。裂解液上清液经SDS-PAGE凝胶电泳分离后，转移至聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上。随后，用TBS缓冲液（含5%脱脂奶粉，pH 7.4）封闭膜，然后与兔抗人caspase-3抗体和兔抗人β-actin抗体在4℃下孵育过夜，再与HRP标记的羊抗兔二抗孵育2小时。最后，用DAB显色法检测caspase-3蛋白。使用Image J软件扫描并分析条带。将caspase-3的表达水平以β-actin的表达水平进行标准化，并计算caspase-3/β-actin的灰度比值。[1]
动物实验
本研究共使用了40只成年NU/NU小鼠（20只雄性，20只雌性，体重20-22 g）。通过在腋窝附近皮下注射2×10⁶个A549细胞建立小鼠肿瘤模型。15天后，将小鼠随机分为四组。C-藻蓝蛋白单药治疗组，小鼠每日一次，连续10天，在肿瘤区域直接注射0.2 ml浓度为320 mg/ml的C-藻蓝蛋白溶液。联合治疗组，小鼠每日同一时间，在肿瘤区域同时注射0.2 ml浓度为320 mg/ml的C-藻蓝蛋白和0.2 ml浓度为10 mM的全反式维甲酸溶液，连续10天。停药两天后，处死小鼠，并取出肿瘤和脾脏。所有小鼠均存活。所有研究均已获得机构动物护理和使用委员会的批准。动物饲养于标准条件下，自由摄取食物和水，并采用12小时光照/12小时黑暗循环。[1]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
C-藻蓝蛋白是可食用螺旋藻的天然成分，无毒副作用。当与全反式维甲酸（ATRA）联合使用时，C-藻蓝蛋白可降低ATRA的毒性，并改善ATRA引起的荷瘤小鼠脾脏重量下降和T淋巴细胞活性降低。[1]
参考文献

[1]. The synergistic antitumor effects of all-trans retinoic acid and C-phycocyanin on the lung cancer A549 cells in vitro and in vivo. Eur J Pharmacol. 2015 Feb 15;749:107-14.
其他信息
C-藻蓝蛋白提取自螺旋藻，作为一种优良的人类营养补充剂，已被广泛应用100年。本研究表明，C-藻蓝蛋白与全反式维甲酸（ATRA）联合使用，在体外和体内均对A549肺癌细胞表现出协同抗肿瘤作用，并降低了ATRA的用量和毒性。该联合用药通过抑制细胞周期进程（降低CDK-4和Cyclin D1的表达）、诱导细胞凋亡（上调caspase-3和下调Bcl-2的表达）以及增强机体免疫力（增加T淋巴细胞活性、脾脏重量和TNF分泌）来抑制肿瘤生长。[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子量
0
CAS号
11016-15-2
外观&性状
Light blue to blue liquid
SMILES
[C-Phycocyanin]
别名
Spirulina extract
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
+
+
计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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