| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The target of Carboxy-SNARF 1 is not a specific protein but rather the hydrogen ions (protons) in the intracellular or extracellular environment. As a pH indicator, its fluorescence properties are directly modulated by the concentration of H+ ions (pH). The mechanism involves a reversible protonation/deprotonation of the phenolic hydroxyl group in the fluorophore. At low pH (acidic), the probe is protonated, and the emission maximum is around 590 nm (orange-red). At high pH (basic), the probe is deprotonated, and the emission maximum shifts to around 640 nm (deep red). The ratio of fluorescence intensities at 640 nm and 590 nm (or the ratio of emission at two wavelengths) is proportional to pH, following a sigmoidal function. The pKa of Carboxy-SNARF 1 is approximately 7.5, making it ideal for measuring physiologically relevant pH changes (pH 6.5-8.5). The probe is not toxic at typical loading concentrations (1-20 uM). Unlike single-wavelength indicators (e.g., BCECF), the ratiometric measurement eliminates artifacts due to dye leakage, photobleaching, and differences in cell loading. Thus, Carboxy-SNARF 1 is a preferred tool for precise pHi measurements. The AM ester form is cell-permeable and can be loaded into cells without disrupting the plasma membrane. After intracellular cleavage, the free acid form is trapped and remains functional for several hours.
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| 体外研究 (In Vitro) |
羧基-SNARF 1 的体外表征包括测定其在已知 pH 值溶液中的荧光特性。为了生成校准曲线，将羧基-SNARF 1 的游离酸形式溶解于不同 pH 值（例如 pH 6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5）的缓冲液中，并保持浓度恒定（例如 1-10 uM）。使用荧光计记录荧光发射光谱，激发波长为 540 nm（或 488 nm）。测量 590 nm 和 640 nm 处的发射强度，并将比值 (F₆40/F₅₉0) 与 pH 值作图。所得曲线用 S 形（玻尔兹曼）方程拟合，以确定 pKa 值和动态范围。该探针表现出对 pH 值的高灵敏度，而对其他离子（例如 Ca2⁺、Mg2⁺）的响应极小。它还具有抗光漂白性和高量子产率。在细胞内，由于细胞内环境（例如粘度、蛋白质结合）的影响，pKa 值可能会略有偏移，因此建议进行原位校准（使用已知 pH 值的缓冲液中的离子载体，例如尼日利亚菌素），以准确地将该比值转换为细胞内 pH 值。该染料在室温下短时间内稳定，但应冷冻保存于 -20°C 以防止降解。AM 酯特别容易水解，因此应干燥保存并避光。在无细胞检测中，该探针通常用作参考或标准品。
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| 体内研究 (In Vivo) |
Carboxy-SNARF 1 的体内应用仅限于离体测量（例如，在分离的细胞、组织切片或秀丽隐杆线虫等小型生物中）。该探针通常不用于动物全身成像，因为它无法靶向定位且不具备组织穿透性。然而，它可用于离体组织样本中特定细胞类型的 pH 值测量。例如，可将 Carboxy-SNARF-1 AM 加载到海马脑切片中，以测量神经元活动期间的 pH 值变化。在斑马鱼胚胎中，可通过显微注射该探针来测量特定区域的 pH 值。该探针也已被用于测量灌注离体器官（例如，肾脏、心脏）中的 pH 值。在所有这些应用中，比率法能够对厚样本进行精确的 pH 值测量，因为该比率与光程无关。对于活细胞成像，通常优选使用波长更长的其他 pH 指示剂（例如，近红外）。因此，体内“活性”并非指治疗效果，而是指实时准确反映pH值的能力。该探针在所用浓度（1-10 uM，加载，1-2小时）下无毒。AM酯有时会因酸性副产物（乙酸）的积累而产生细胞毒性，但可通过使用低浓度和彻底洗涤来最大程度地降低这种毒性。游离酸形式的体内半衰期取决于细胞外排（通过有机阴离子转运蛋白），而细胞外排因细胞类型而异。在大多数细胞中，染料可滞留2-6小时。
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| 酶活实验 |
体外校准方案：制备 pH 校准曲线时，将 Carboxy-SNARF 1 游离酸溶解于一系列 pH 校准缓冲液中（例如，100 mM MES、HEPES 或 Tris，含 100 mM KCl、1 mM MgCl2、1 mM CaCl2 和 1 uM 尼日利亚菌素）。缓冲液的 pH 值范围应为 5.5 至 8.5，以 0.5 个 pH 单位递增。加入染料至终浓度为 1-10 uM。室温孵育 10 分钟以达到平衡。使用荧光计或荧光酶标仪（激发波长：540 nm 或 488 nm），记录 570 nm 至 700 nm 的发射光谱。或者，测量 590 nm 和 640 nm 处的发射强度。计算比值 (F640/F590)。将比值与 pH 值作图，并使用以下方程拟合 S 形曲线：比值 = R_min + (R_max - R_min)/(1 + 10^{pKa - pH})，其中 R_min 和 R_max 是极端 pH 值下的比值。pKa 值由该曲线确定。对于原位校准，对负载 Carboxy-SNARF-1 AM 的细胞进行相同的操作，使用含有 10 uM 尼日利亚菌素和 10 uM 缬氨霉素的缓冲液（以平衡膜两侧的 pH 值），并将外部 pH 值钳制在已知值。然后测量细胞中的 F640/F590 比值，并通过校准曲线插值计算 pH 值。确保染料浓度在线性范围内，并且测量在相同的仪器设置下进行。体外结合方案不适用，因为该探针不与特定受体结合。
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| 细胞实验 |
使用羧基-SNARF 1进行体外细胞实验以测量细胞内pH值（pHi）。活细胞加载采用AM酯形式。对于贴壁细胞（例如HeLa、HEK293、原代神经元），将细胞接种于玻璃盖玻片或96孔光学板中，并使其过夜贴壁。移除培养基，将细胞与1-10 uM羧基-SNARF-1 AM（由1-10 mM DMSO储备液配制）在含0.02% Pluronic F-127的HBSS（Hanks平衡盐溶液）中孵育，以促进分散，在37℃避光条件下孵育30-60分钟。加载后，用HBSS洗涤细胞两次以去除细胞外染料并进行脱酯反应（37℃，15-30分钟）。对于悬浮细胞（例如淋巴细胞、白血病细胞），以类似方式加载 1-2 × 10⁶ 个细胞，并通过离心洗涤。然后将加载的细胞置于显微镜载物台上或荧光计比色皿中。荧光成像：使用激发波长为 540 nm（或 488 nm）的共聚焦显微镜或荧光显微镜。在两个通道收集发射的荧光：一个“绿色”通道（例如，590/20 nm）和一个“红色”通道（例如，640/20 nm）。以一定时间间隔（例如，每 30 秒）采集比率图像。对于流式细胞术，使用激发波长为 488 nm 的流式细胞仪，并配备 FL-2（590 nm）和 FL-3（640 nm）检测器。逐个细胞记录比率。为了改变pH值，可添加氯化铵（NH4Cl）等试剂诱导碱中毒，或添加丙酸盐/乙酸盐诱导酸中毒。对于药物研究，加入目标药物并监测细胞内pH值（pHi）随时间的变化。每次实验结束时，通过在已知pH值的缓冲液（如上所述）中加入10 uM尼日利亚菌素和10 uM缬氨霉素进行校准。使用比值-pH校准曲线将荧光比值转换为绝对pH值。数据分析：对于每个细胞或孔，计算F640/F590比值，然后使用校准曲线计算pH值。绘制平均pH值及其随时间的变化曲线。该方案广泛应用于细胞生理学、细胞凋亡研究和药物研发。
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| 动物实验 |
由于Carboxy-SNARF 1探针发射可见光波长且需要局部加载，因此不适用于全身成像，所以使用Carboxy-SNARF 1进行体内动物实验并不常见。然而，它可用于离体组织切片或小型透明生物体。例如，在秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）中，可通过将线虫在含有10 μM Carboxy-SNARF-1 AM和0.02% Pluronic F-127的M9缓冲液中于20℃孵育1-2小时来加载AM酯。之后，清洗线虫并将其置于载玻片上的琼脂糖垫上。可以使用共聚焦显微镜进行比率成像，激发波长为540 nm，检测波长为590 nm和640 nm。可以测量特定细胞（例如咽肌）在应激处理（例如热休克、药物处理）前后的pH值。对于组织切片（例如脑切片、肾切片），将切片置于含氧人工脑脊液 (ACSF) 中，在 37°C 下用 5-10 μM 羧基-SNARF-1 AM 孵育 30-60 分钟，洗涤后置于显微镜灌注室中。成像方法如前所述。对于离体灌注器官（例如心脏、肾脏），用含染料的缓冲液灌注器官，并使用光纤探针或收集表面荧光来测量 pH 值变化。这些离体实验方案允许在受控条件下测量组织 pH 值。对于小鼠体内实验，需要将染料注射到特定组织或器官中，然后可以使用光纤探针测量荧光。这不是标准应用。由于 AM 基团释放乙醛和甲醛，全身注射 AM 酯可能会引起不良反应。因此，不建议全身给药。在所描述的体外应用中，该化合物在所用浓度下通常无毒。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
由于羧基-SNARF 1 不适用于全身给药，因此其药代动力学数据不适用。游离酸形式不透膜，一旦进入血液循环便会迅速排出体外。AM酯形式可透过细胞膜，并被血浆和细胞内的酯酶水解。如果注射到动物体内，AM酯会被迅速清除和代谢，而游离酸则经尿液排出。因此，尚未对该化合物进行药代动力学研究。该化合物在-20℃避光保存时，固态稳定。对于溶液形式的AM酯，应将其分装成小份，并在-80℃下保存以防止水解，因为它对水分敏感。游离酸形式可在-20℃溶液中保存数月。该化合物不经CYP450酶代谢；它只是脱酯化后排出体外。细胞内半衰期取决于其输出速率（通过MRP或其他有机阴离子转运蛋白）。对于大多数细胞，染料可在细胞内滞留2-6小时。其量子产率和光稳定性极佳，可用于长期成像研究。该探针与血清蛋白的结合程度很低，因此其细胞内浓度与上样浓度成正比。体外实验中，染料的常用浓度为1-10 μM。细胞内浓度可以估算，但对于比率测量而言，无需绝对浓度。因此，对于典型的生物学应用，药代动力学并非需要考虑的问题。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于羧基-SNARF 1 是一种荧光探针而非治疗剂，因此目前尚无其急性或慢性毒性数据。在细胞实验中，通常认为其在用于 pH 值测量的浓度范围内（AM 酯为 1-10 μM）无毒。然而，AM 酯水解后会释放乙酸，如果上样浓度过高或上样时间过长，乙酸会酸化细胞质并导致毒性。因此，建议将 AM 酯浓度控制在 20 μM 以下，上样时间控制在 1 小时以内。许多实验室采用 5 μM 的浓度处理 30 分钟，然后进行洗涤。游离酸形式的 AM 酯在浓度高达 100 μM 时对细胞无毒，因为它不透过细胞膜，而是保留在细胞外介质中。在动物实验中，由于 AM 酯可能导致代谢性酸中毒和甲醛释放，因此不进行全身注射。对于离体研究，所用AM酯的浓度（1-10 μM）对组织切片和离体器官具有良好的耐受性。尚未有关于其遗传毒性、致癌性或生殖毒性的研究报告。该化合物属于实验室化学品，应遵循标准安全预防措施：佩戴手套、护目镜和实验服。AM酯对水分和光照敏感，请小心操作。该化合物未被列入全球化学品统一分类和标签制度（GHS）的危险物质清单，但粉末接触眼睛可能引起眼刺激。如接触皮肤，请用肥皂和水清洗。处置时，请遵循机构化学废物处理指南。该探针不含任何重金属或有毒元素。LD₅₀尚未测定。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
其他信息：Carboxy-SNARF 1 是一种仅供实验室使用的研究级荧光探针。它未获准用于临床诊断或治疗。该探针广泛应用于细胞生物学、生理学和药理学领域，用于研究包括神经元、心肌细胞、免疫细胞和癌细胞在内的多种细胞类型的细胞内 pH 值调节。该探针以游离酸（羧酸盐形式，不透细胞）和 AM 酯（透细胞）的形式提供。产品通常以粉末（游离酸）或冻干固体（AM 酯）的形式供应。5-和 6-羧基异构体的混合物的 CAS 编号为 126208-12-6。单个异构体也有供应，但较少见。分子量为 453.45 g/mol。最大激发波长为 540 nm（在 488 nm 处有一个次峰）。发射最大值与pH值相关：pH 6.0时，λem ≈ 590 nm；pH 8.0时，λem ≈ 640 nm。pKa约为7.5。该探针可溶于DMSO和水（游离酸）。AM酯仅溶于DMSO。储存：粉末应储存在-20℃干燥避光处。DMSO溶液（10 mM）可在-80℃下保存长达6个月。避免反复冻融。运输时通常使用蓝冰保存。该化合物尚未获得FDA批准用于任何适应症。可从化学品供应商处购买，但未提供具体供应商名称。研究人员应始终为每次实验配制新鲜的工作溶液。AM酯易水解，因此最好配制10 mM的DMSO储备液，并分装成小份保存。由于不同细胞类型的上样效率存在差异，因此工作浓度应根据每种细胞类型通过实验确定。对于流式细胞术，通常 2-5 μM 的浓度就足够了；而对于显微镜观察，可能需要 5-10 μM 的浓度。校准时，可使用离子载体尼日利亚菌素（一种 K+/H+ 交换剂）和缬氨霉素（一种 K+ 离子载体）来平衡细胞膜两侧的 pH 值。该染料可用于监测激动剂、抑制剂或细胞外 pH 值变化引起的 pH 值变化。比率法可校正染料上样量、光漂白和细胞移位造成的偏差。如果染料靶向特定细胞器（例如溶酶体），则也可用于测量酸性细胞器中的 pH 值（但游离酸形式未被靶向）。对于溶酶体 pH 值的测量，可以使用其他染料（例如 LysoSensor）。Carboxy-SNARF 1 是测量细胞质 pH 值的理想选择。本产品仅供研究使用，不可用于诊断程序。详细操作流程请参考原始文献或制造商说明。由于该化合物并非药物，因此未进行临床试验。使用前请务必查阅安全数据表 (SDS)。本信息仅供教育用途，不构成使用建议。本摘要未包含任何特定供应商信息。本摘要中的数据来源于公开信息和标准操作流程。
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| 分子式 |
C26H20NO4
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|---|---|
| 分子量 |
411.447468757629
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| 精确质量 |
410.139
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| CAS号 |
126208-12-6
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| PubChem CID |
155885758
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| 外观&性状 |
Dark purple to black solid powder
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| tPSA |
66.8
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
964
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O1C2C=C(C=CC=2C(C2C=CC=CC=2C(=O)O)=C2C=CC3=CC(C=CC3=C12)=O)N(C)C.[2H-]
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| InChi Key |
XULVEFCFZBLKOP-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H19NO4.H/c1-27(2)16-8-11-21-23(14-16)31-25-18-12-9-17(28)13-15(18)7-10-22(25)24(21)19-5-3-4-6-20(19)26(29)30;/h3-14H,1-2H3,(H,29,30);/q;-1
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| 化学名 |
2-[10-(dimethylamino)-3-oxobenzo[c]xanthen-7-yl]benzoic acid;hydride
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~10 mg/mL (~22.05 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4304 mL | 12.1521 mL | 24.3043 mL | |
| 5 mM | 0.4861 mL | 2.4304 mL | 4.8609 mL | |
| 10 mM | 0.2430 mL | 1.2152 mL | 2.4304 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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