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Carthamin

别名: 36338-96-2; Carthamine; Carthamin; Natural Red 26; Carthamus red; Liofresh Red CR; Carthamus Red AP; C.I. Natural Red 26; 红花黄色素;天然红 26 [CI 75140];红花苷;红花甙;红花红;红花红色素
目录号: V8894 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
红花素是一种新颖有效的天然产物，由两种查尔酮组成
Carthamin CAS号: 36338-96-2
产品类别: New1
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
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500mg
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InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
红花素是一种新颖有效的天然产品，由两种查尔酮组成
生物活性&实验参考方法
靶点
Natural polyketide synthase-derived quinochalcone glucoside; red pigment
体外研究 (In Vitro)
红花黄色素（CY）是从红花中分离出来的一种黄酮类化合物，具有促进血液循环、化瘀止痛等多种药理作用。CY是一种用于中国传统医学的草药。椎间盘退变（IDD）是一种常见的脊柱疾病，髓核（NP）细胞的变性和炎症是病理级联的重要组成部分。CY对NP细胞退化和炎症的疗效仍有待阐明。本研究分离、培养大鼠NP细胞，检测CY对脂多糖（LPS）诱导的遗传表达变异和基质降解酶表达的抑制作用，包括基质金属肽酶-3、具有凝血酶敏感蛋白1型基序的ADAM金属肽酶（ADAMTS）-4和ADAMTS-5。观察到CY对NP细胞对LPS诱导的基质降解和炎症的保护作用。Western印迹结果表明，CY预处理显著抑制了LPS诱导的丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路的激活。本研究的结果表明，CY通过抑制MAPK通路的激活对NP细胞具有抗退行性和抗炎作用。因此，CY可能是未来治疗IDD的潜在治疗药物[1]。
体内研究 (In Vivo)
红花黄色素（CY）是一种从红花中提取的黄酮类化合物，据报道可以减轻心脏缺血和再灌注损伤。然而，CY是否可以改善缺血性卒中尚不完全清楚。本研究使用大脑中动脉闭塞（MCAO）模型大鼠研究了CY对实验性缺血性卒中的预防作用。评估神经评分、脑水肿、梗死面积和微管相关蛋白2（MAP-2）免疫反应性，以评估CY对缺血性脑损伤的影响。检查炎症和铁下垂的参与情况，以研究CY作用的机制。结果表明，2周的CY治疗减轻了MCAO模型大鼠的神经功能缺损评分、脑含水量和梗死面积，并增加了皮质中MAP‑2的免疫反应性。CY给药还使皮质NF-κB/NLR家族含有3个炎性体信号通路的pyrin结构域失活，并降低了血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度。此外，CY治疗抑制了Fe2+和活性氧的积累，并逆转了大脑中酰基辅酶A合成酶长链家族成员4、转铁蛋白受体1、谷胱甘肽过氧化物酶4和铁蛋白重链1蛋白的表达水平。CY处理还逆转了血清中谷胱甘肽、超氧化物歧化酶和丙二醛的水平。总的来说，本研究的结果表明，CY保护大鼠免受缺血性中风的影响，这与减轻炎症和铁下垂有关[2]。
细胞实验
细胞毒性试验[1]
根据先前报道的方法，使用细胞计数试剂盒-8（CCK8）测试了经红花黄色素/Carthamin yellow (CY)处理1天后NP细胞的存活率。将约5×103个NP细胞接种在每张膜上，并转移到96孔板上。与不同浓度的CY一起孵育24小时。在CCK8检查之前去除条件培养基。随后，向每个孔中加入100µl DMEM和10µl CCK8溶液，然后在37°C下孵育CCK8 2.5小时。使用酶标仪测定450 nm处的光密度（OD）。细胞存活率计算如下：对照组的细胞存活率（%）=（ODdrug处理组ODblank）/（ODcontrol组ODblanks）。
细胞凋亡测定[1]
根据先前报道的方法，使用Annexin V/碘化丙啶（PI）双重免疫荧光染色通过流式细胞术测量细胞凋亡。NP细胞与200µM的Carthamin yellow (CY)和/或1µg/ml的LPS一起培养24小时。然后用冷PBS洗涤细胞，并用1X Annexin结合缓冲液重新悬浮。之后，根据制造商的方案，用膜联蛋白V-FITC和碘化丙啶对所有细胞进行染色。流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡率。凋亡事件表现为异硫氰酸荧光素（FITC）+/PI-（早期凋亡）和FITC+/PI+（晚期凋亡或死亡）事件的组合。最终结果以早期、晚期和总凋亡的百分比表示。
基因表达[1]
NP细胞与不同浓度的红花黄色素/Carthamin yellow (CY)和1µg/ml LPS一起孵育24小时。LPS可诱导IVD中的炎症和基质降解。通过AxyPrep™多源总RNA Miniprep试剂盒分离总RNA。然后用PrimeScript™RT试剂盒将1µg RNA转化为互补DNA（cDNA）。使用ABI 7500测序检测系统和SYBR®Premix Ex Taq™进行定量PCR。循环条件如下：在95°C下5秒和60°C下34秒进行40个循环。表I列出了用于扩增靶基因的引物。引物是使用blast in pubmed设计和选择的，GAPDH用作内对照。
蛋白质印迹[1]
对于信号通路蛋白测定，细胞用不同浓度的Carthamin yellow (CY)/红花黄色素和/或1µg/ml LPS处理24小时。对于聚集蛋白聚糖和II型胶原蛋白测定，用不同浓度CY和/或1ug/ml LPS处理细胞5或8天。根据制造商的说明，使用NE-PER®核和细胞质提取试剂提取细胞总蛋白。将20µg蛋白质（每个样品）装入凝胶中，通过7.5-12.5%SDS-PAGE分离，然后转移到0.22µm PVDF膜上。在室温下用5%无脂牛奶封闭膜1小时，随后在4°C下用一抗孵育过夜（1:1000稀释）。在TBST中洗涤三次后，在室温下用相应的二抗探测膜1小时。在TBST中再次洗涤膜，并使用Odyssey红外成像系统观察蛋白质条带。阳性免疫反应带被密度定量并归一化为GAPDH。
免疫组织化学染色[1]
将2×104/ml细胞接种在24孔板中，这些NP细胞与不同浓度的Carthamin yellow (CY)/红花黄色素 和/或1µg/ml LPS一起培养5或8天。在制作细胞载玻片之前，用4%多聚甲醛固定细胞。固定后，用0.1%Triton X-100处理NP细胞15分钟。然后用2%牛血清白蛋白封闭细胞1小时。然后，将细胞载玻片与相应的抗体（包括抗II型胶原和抗聚集蛋白聚糖抗体（1:200稀释；Abcam））在4°C下孵育过夜。对于免疫组织化学，在室温下使用第二抗体15分钟。DAB（麦欣生物）溶液用作发色剂。我们使用倒置显微镜来获取图像。使用Image Pro Plus 6.0软件测量每张照片的积分光密度（IOD）。
动物实验
动物被随机分为以下四组（每组 n=8）：i) 假手术组；ii) MCAO 组；iii) CY (20 mg/kg) 组；iv) CY (40 mg/kg) 组。每天一次，连续两周，对大鼠进行灌胃给予红花黄 (CY)。末次给药后 60 分钟，按照先前描述的方法进行 MCAO 手术。再灌注 24 小时后，测定神经功能评分、脑含水量和梗死体积。采用免疫荧光染色、蛋白质印迹和流式细胞术研究其潜在机制。神经功能评分后，用 400 mg/kg 戊巴比妥钠处死大鼠。立即取出脑组织，收集皮层和血清，并储存于 -80°C 直至后续实验。[2]
参考文献
[1]. Carthamin yellow inhibits matrix degradation and inflammation induced by LPS in the intervertebral disc via suppression of MAPK pathway activation. Exp Ther Med. 2017 Aug;14(2):1614-1620.
[2]. Carthamin yellow improves cerebral ischemia‑reperfusion injury by attenuating inflammation and ferroptosis in rats. Int J Mol Med. 2021 Apr;47(4):52. d
其他信息
红花素是一种羟基肉桂酸。
已有报道称红花黄存在于红花（Carthamus tinctorius）中，并有相关数据报道。
基于以上所述，我们荣幸地报道了红花黄在脂多糖（LPS）诱导的椎间盘炎症和基质降解中的作用。我们发现，红花黄能够间接或直接影响椎间盘中MAPK信号通路的活性和蛋白聚糖（PG）含量。然而，在此基础研究的基础上，仍需开展更多研究。首先，需要更深入地阐明控制红花黄介导的炎症和PG相关信号通路转化的分子机制。其次，需要构建动物实验来验证红花黄在体内的治疗效果。最后，需要通过临床治疗来验证我们的研究结果。综上所述，我们的研究表明，红花黄（CY）可通过抑制LPS诱导的髓核细胞MAPK活化，发挥显著的抗炎和抗退变作用。红花黄（CY）未来可能成为治疗IDD的潜在新型中药。然而，还需要更多进一步的研究来证实这一点。[1]在本研究中，MCAO模型诱导的脑缺血再灌注损伤促进了皮质铁和活性氧（ROS）的积累以及血清脂质过氧化水平的升高，导致脑内铁死亡相关蛋白表达异常，而红花黄（CY）治疗则抑制了MCAO模型诱导的这些改变。上述结果表明，铁死亡可能是MCAO模型大鼠实验性缺血性脑卒中进展和CY治疗效果的部分原因。综上所述，本研究结果表明，CY治疗通过减轻炎症和铁死亡来保护大鼠免受缺血再灌注损伤（图10）。这些结果提示CY可能成为治疗缺血性脑卒中的潜在药物。[2]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C43H42O22
分子量
910.78
精确质量
910.216
元素分析
C, 56.71; H, 4.65; O, 38.65
CAS号
36338-96-2
PubChem CID
135565560
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
密度
1.9±0.1 g/cm3
沸点
1255.2±65.0 °C at 760 mmHg
闪点
375.5±27.8 °C
蒸汽压
0.0±0.3 mmHg at 25°C
折射率
1.859
LogP
6.11
tPSA
425.72
氢键供体(HBD)数目
15
氢键受体(HBA)数目
22
可旋转键数目(RBC)
11
重原子数目
65
分子复杂度/Complexity
2100
定义原子立体中心数目
12
SMILES
O1[C@]([H])(C([H])([H])O[H])[C@]([H])([C@@]([H])([C@]([H])([C@]1([H])C1(C(=C(C(/C(/[H])=C(\[H])/C2C([H])=C([H])C(=C([H])C=2[H])O[H])=O)C(C(/C(/[H])=C2\C(C(C(/C(/[H])=C(\[H])/C3C([H])=C([H])C(=C([H])C=3[H])O[H])=O)=C(C(C\2=O)([C@@]2([H])[C@@]([H])([C@]([H])([C@@]([H])([C@@]([H])(C([H])([H])O[H])O2)O[H])O[H])O[H])O[H])O[H])=O)=C1O[H])=O)O[H])O[H])O[H])O[H])O[H]
InChi Key
WLYGSPLCNKYESI-RSUQVHIMSA-N
InChi Code
InChI=1S/C43H42O22/c44-14-24-30(52)32(54)34(56)40(64-24)42(62)36(58)20(28(50)26(38(42)60)22(48)11-5-16-1-7-18(46)8-2-16)13-21-29(51)27(23(49)12-6-17-3-9-19(47)10-4-17)39(61)43(63,37(21)59)41-35(57)33(55)31(53)25(15-45)65-41/h1-13,24-25,30-35,40-41,44-47,52-58,60-63H,14-15H2/b11-5+,12-6+,21-13-/t24-,25-,30-,31-,32+,33+,34-,35-,40-,41-,42+,43-/m1/s1
化学名
(2Z,6S)-5,6-dihydroxy-4-[(E)-3-(4-hydroxyphenyl)prop-2-enoyl]-6-[(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]-2-[[(3S)-2,3,4-trihydroxy-5-[(E)-3-(4-hydroxyphenyl)prop-2-enoyl]-6-oxo-3-[(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]cyclohexa-1,4-dien-1-yl]methylidene]cyclohex-4-ene-1,3-dione
别名
36338-96-2; Carthamine; Carthamin; Natural Red 26; Carthamus red; Liofresh Red CR; Carthamus Red AP; C.I. Natural Red 26;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.0980 mL 5.4898 mL 10.9796 mL
5 mM 0.2196 mL 1.0980 mL 2.1959 mL
10 mM 0.1098 mL 0.5490 mL 1.0980 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
+
+
计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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