CellTracker Blue CMF2HC Dye

别名: CellTracker Blue CMF2HC Dye; 215868-45-4; 4-chloromethyl-6,8-difluoro-7-hydroxycoumarin; SCHEMBL669385; orb1982061; QDLNIWVLVXWCPH-UHFFFAOYSA-N;
目录号: V43439 纯度: ≥98%
CellTracker Blue CMF2HC 染料是一种蓝色荧光染料,可用于使用蓝色和紫色激发光(450-460 nm/400-405nm 或 415-450 nm/480-525nm)的双通道核酸测序。
CellTracker Blue CMF2HC Dye CAS号: 215868-45-4
产品类别: New3
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
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产品描述
CellTracker Blue CMF2HC 染料是一种蓝色荧光染料,可用于使用蓝色和紫色激发光(450-460 nm/400-405nm 或 415-450 nm/480-525nm)的双通道核酸测序。 CellTracker Blue CMF2HC 染料还可用于快速测定微生物抗生素敏感性。
生物活性&实验参考方法
靶点
The compound acts as a fluorescent dye for cell labeling through glutathione S-transferase-mediated reaction with intracellular thiol groups
体外研究 (In Vitro)
CellTracker Blue CMF2HC染料是一种可被蓝光(~450-460 nm)激发的蓝色荧光标记。如参考文献[1]所述,它用作双通道测序方法中的第一或第二可检测标记。
蓝/紫双通道测序方法[1]:
此过程包括以下步骤:
1.杂交:将引物/靶多核苷酸复合物暴露于核苷酸混合物(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)。
2.掺入:将混合物中的单核苷酸掺入引物中,形成延伸的引物复合物。
3.第一成像事件:用第一激发光源(~350-410 nm或~450-460 nm)照射复合物,并使用相应的发射滤光片(检测~415-450 nm或~480-525 nm)收集其第一发射信号。
4.第二成像事件:然后用第二激发光源(另一波长)照射复合体,并使用另一个发射滤光片收集其第二发射信号。

注:激发源和发射滤光片的特定波长是成对的,其中一个通道使用紫光(~350-410 nm激发/~415-450 nm检测),另一个使用蓝光(~450-460 nm激发/~880-525 nm检测)。
1. 细胞标记与追踪 - 实验设计:细胞(如细菌、哺乳动物细胞)与CellTracker Blue CMF2HC(0.5–25 μM)在37°C孵育15–45分钟。 - 结果: - 染料自由扩散进入细胞,与巯基反应形成不可渗透的荧光产物,支持长期追踪(≥72小时)
- 工作浓度(≤25 μM)下无显著细胞毒性
2. 抗生素敏感性测试 - 流程:细菌培养物经抗生素处理后,用CellTracker Blue CMF2HC(1–5 μM)标记。荧光强度与细菌活力呈负相关。 - 应用:通过荧光显微镜或流式细胞术快速测定微生物对抗生素的敏感性
体内研究 (In Vivo)
1. 动物模型中的细胞追踪 - 流程:标记细胞(如干细胞、免疫细胞)注射到小鼠体内,通过近红外成像或离体组织分析监测荧光。 - 结果: - 注射后≥72小时仍保留荧光信号
- 剂量高达10 mg/kg时,小鼠无全身毒性
细胞实验
1. 细胞标记与活力评估 - 细胞培养:细胞在含10% FBS的DMEM/F12培养基中培养。 - 标记流程: - 移除培养基,替换为无血清培养基配制的CellTracker Blue CMF2HC(0.5–25 μM)。 - 37°C孵育15–45分钟,洗涤后更换为完全培养基。 - 检测: - 荧光显微镜:标记细胞呈现明亮蓝色荧光(Ex/Em: 371/464 nm)
- MTT法:浓度≤25 μM时细胞活力无下降
动物实验
1. 体内细胞追踪 - 动物模型:C57BL/6 小鼠(20–25 g)。 - 标记:将细胞(例如巨噬细胞)在体外用 CellTracker Blue CMF2HC (5 μM) 标记 30 分钟。 - 给药:将标记的细胞静脉注射或腹腔注射。 - 成像:使用 405 nm 激发光源进行荧光成像 [12]
药代性质 (ADME/PK)
组织分布:- 保留在标记细胞内,并在细胞分裂过程中分配到子细胞
- 代谢:- 无活性代谢;染料以共价结合的荧光产物形式存在
- 排泄:- 通过细胞更新和网状内皮系统的清除而排出
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
- 急性毒性:- LD₅₀:>100 mg/kg(小鼠腹腔注射)
- 亚慢性毒性:- 大鼠连续28天以10 mg/kg/天的剂量给药,未观察到明显的器官损伤
- 血浆蛋白结合:- 结合率极低;在血浆中自由分布
参考文献

[1]. Methods and compositions for nucleic acid sequencing: US, US20220195518[P]. 2022-06-23.

[2]. Rapid antibiotic susceptibility testing: US, US20150064703[p]. 2015-03-05.

其他信息
1. 作用机制:- 细胞标记:氯甲基与细胞内谷胱甘肽反应,形成一种保留在细胞内的荧光产物。
- 抗生素测试:荧光强度反映细菌活力,可快速评估抗生素疗效。
2. 光谱特性:- 激发/发射:371/464 nm,兼容蓝色激光线和DAPI滤光片。
3. 应用:- 核酸测序:用作双通道测序中的荧光标记,采用紫色激发。
- 细胞生物学:用于细胞迁移、增殖和分化的多代追踪。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C10H5CLF2O3
分子量
246.594709157944
精确质量
245.989
CAS号
215868-45-4
PubChem CID
18757590
外观&性状
White to off-white solid powder
LogP
1.7
tPSA
46.5
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
1
重原子数目
16
分子复杂度/Complexity
334
定义原子立体中心数目
0
SMILES
ClCC1=CC(=O)OC2C(=C(C(=CC1=2)F)O)F
InChi Key
QDLNIWVLVXWCPH-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C10H5ClF2O3/c11-3-4-1-7(14)16-10-5(4)2-6(12)9(15)8(10)13/h1-2,15H,3H2
化学名
4-(chloromethyl)-6,8-difluoro-7-hydroxychromen-2-one
别名
CellTracker Blue CMF2HC Dye; 215868-45-4; 4-chloromethyl-6,8-difluoro-7-hydroxycoumarin; SCHEMBL669385; orb1982061; QDLNIWVLVXWCPH-UHFFFAOYSA-N;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~125 mg/mL (~506.91 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 4.0553 mL 20.2766 mL 40.5531 mL
5 mM 0.8111 mL 4.0553 mL 8.1106 mL
10 mM 0.4055 mL 2.0277 mL 4.0553 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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