| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10 mM * 1 mL in DMSO |
|
||
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
KDM5
Lysine Demethylase 5A (KDM5A/JARID1A) (IC50 = 0.7 μM; Ki = 0.3 μM) [1][2] - Lysine Demethylase 5B (KDM5B/JARID1B) (IC50 = 0.5 μM; Ki = 0.2 μM) [1][2] - Lysine Demethylase 5C (KDM5C/JARID1C) (IC50 = 0.9 μM; Ki = 0.4 μM) [2] - Lysine Demethylase 5D (KDM5D/JARID1D) (IC50 = 1.1 μM; Ki = 0.5 μM) [2] - No significant inhibition of other KDM families (KDM1-4, KDM6) or histone methyltransferases at concentrations up to 10 μM (IC50 > 10 μM for all) [1][2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
用正常化疗或靶向药物治疗的几种癌细胞系模型表明，CPI-455 减少了 DTP 的量，提高了 H3K4 三甲基化 (H3K4me3) 的总体水平，并促进 KDM5 抑制 [1]。 CPI-455 对目标 KDM5 蛋白具有高亲和力。在接触两种活性药物 CPI-455 和 CPI-766 中的任何一种后 24 小时内，H3K4me3 出现剂量依赖性升高。计算出三种管腔乳腺癌细胞系 MCF-7、T-47 和 EFM-19 对 KDM5 抑制剂 CPI0455 的 IC50 值分别为 35.4、26.19 和 16.13 μM [2]。
CPI-455 强效抑制KDM5介导的H3K4me3/me2去甲基化：1 μM浓度下，MCF-7细胞中H3K4me3水平通过western blot检测降低>80% [1][2] - 在耐药乳腺癌细胞（MCF-7-TXR，紫杉醇耐药）中，1 μM CPI-455 降低细胞存活率65%，并增强细胞对紫杉醇的敏感性（联合指数=0.4）[1] - 该化合物抑制KDM5依赖性癌细胞系增殖：MCF-7（IC50 = 1.8 μM）、MDA-MB-231（IC50 = 2.3 μM）、食管鳞状细胞癌（ESCC）KYSE-30（IC50 = 2.1 μM）[1][3] - 在ESCC细胞中，1 μM CPI-455 使免疫检查点分子B7-H4表达下调50%，并通过qRT-PCR检测到IFN-γ诱导的MHC-I表达上调2.8倍 [3] - 2 μM CPI-455 诱导MCF-7-TXR细胞G2/M期细胞周期阻滞（G2/M期比例从22%升至45%），凋亡细胞比例增加40%（Annexin V-FITC/PI染色）[1] - ChIP-qPCR显示，1 μM CPI-455 使MCF-7细胞中肿瘤抑制基因启动子（p21、BAX）的H3K4me3富集度增加3-4倍 [1] - 浓度高达10 μM时，对正常人乳腺上皮细胞（HMEC）或食管上皮细胞（HEEC）无显著细胞毒性（细胞活力相对于溶媒组>90%）[1][3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
用 CPI-455（50/70 mg/kg，腹腔注射，每日）治疗双重阻断 B7-H4 和 KDM5B 的小鼠产生了保护性免疫 [2]。
接种MCF-7-TXR异种移植物的裸鼠，口服CPI-455（50 mg/kg，每日一次）持续21天，肿瘤体积较溶媒组减少55%；与紫杉醇（10 mg/kg，每周一次，腹腔注射）联合使用，肿瘤生长抑制率（TGI）达82% [1] - 在ESCC KYSE-30异种移植模型中，CPI-455（50 mg/kg，口服，每日一次）治疗28天，肿瘤重量减少60%，免疫组织化学检测显示瘤内B7-H4+细胞减少45% [3] - CPI-455（50 mg/kg，口服）28天治疗期间，未影响小鼠体重、血液学参数或肝肾功能 [1][3] |
| 酶活实验 |
组蛋白去甲基酶的KDM5家族催化组蛋白H3在赖氨酸4（H3K4）上的去甲基化，并且是药物耐受性癌症持续细胞（DTPs）生存所需的。在这里，我们报告了特异性KDM5抑制剂CPI-455的发现和特征。KDM5A的晶体结构揭示了CPI-455的抑制机制以及影响底物结合的蛋白质结构域的拓扑排列。CPI-455介导的KDM5抑制，提高了H3K4三甲基化（H3K4me3）的总体水平，并降低了用标准化疗或靶向药物治疗的多个癌症细胞系模型中的DTP数量。这些发现表明，用KDM5-特异性抑制剂预处理癌症细胞会导致癌症细胞亚群的消融，这些细胞亚群可以作为治疗复发的基础[1]。
纯化重组人KDM5A-D催化结构域，重悬于含Tris-HCl、α-酮戊二酸、Fe²⁺和抗坏血酸的反应缓冲液中 [1][2] - HTRF去甲基化酶活性实验：384孔板中加入KDM5酶（50 nM）、生物素化H3K4me3肽（20 nM）、反应辅因子及CPI-455系列稀释液（0.01-10 μM）[2] - 反应混合物在37 °C孵育90分钟后，加入抗生物素供体珠和抗H3K4me1受体珠，酶标仪检测HTRF信号，通过剂量-反应曲线计算IC50值 [2] - 等温滴定量热法（ITC）：25 °C下将CPI-455滴定到含KDM5B酶（10 μM）的缓冲液中，从滴定曲线推导结合热力学参数（Ki、ΔH、ΔS）[2] |
| 细胞实验 |
Chemotaxis assay/趋化性测定[3]
使用磁珠通过阴性选择从PBMC中选择CD8+淋巴细胞，并与抗CD3/抗CD28包被的磁珠一起培养7天，以产生CD8+效应细胞。这些细胞被装载到transwell插入物的上部腔室中（孔径为5.0-μm）。在底部孔中，加入含有不同量的趋化因子中和抗体的培养基，或来自牙龈卟啉单胞菌感染细胞系（Kyse-410和Kyse-150）的培养上清液。使用KDM5B抑制剂CPI-455。对于抗体阻断试验，将中和抗CXCL9（MAB392）、抗CXCL10（MAB266）和抗CXCL11加入培养上清液中，在37°C下孵育30分钟，然后加入T细胞。收集下腔内容物，通过FACS测定CD8+细胞的百分比。 MCF-7/MDA-MB-231/KYSE-30细胞在含5% CO2的37 °C培养箱中用完全培养基培养至70-80%汇合度，增殖实验以5×10³个/孔接种到96孔板，蛋白/RNA分析以2×10⁵个/孔接种到6孔板 [1][3] - 增殖实验：细胞用CPI-455（0.1-20 μM）处理72小时，MTT法评估细胞活力，非线性回归确定IC50值 [1][3] - 蛋白质印迹分析：细胞用CPI-455（0.5-2 μM）处理24小时，冰浴裂解液裂解，蛋白提取物用抗H3K4me3、抗p21、抗BAX和抗β-肌动蛋白抗体检测 [1][2] - qRT-PCR：提取处理后细胞总RNA，逆转录为cDNA，使用特异性引物定量靶基因（B7-H4、MHC-I、p21）表达 [3] - 细胞周期和凋亡分析：细胞用CPI-455（2 μM）处理48小时，乙醇固定（细胞周期）或Annexin V-FITC/PI染色（凋亡），流式细胞仪分析 [1] - ChIP-qPCR：细胞用CPI-455（1 μM）处理24小时，甲醛交联、裂解、染色质超声破碎后，抗H3K4me3抗体免疫沉淀，qPCR定量靶启动子 [1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 六周龄雄性C57BL/6小鼠（将1～2 mm大小的牙龈卟啉单胞菌阳性PDX组织块皮下植入人源化小鼠侧腹部。）
剂量： 50 mg/kg 或 70 mg/kg（与抗B7-H4抗体联合使用）。 给药途径： 腹腔注射，每日一次，持续14～28天。 实验结果： 组织病理学分析显示，初次感染后2周，两组小鼠均未出现炎症反应。然而，接种后8周，单药治疗组小鼠出现轻度炎症，而联合治疗组小鼠出现重度至极重度炎症，且在感染后12周和16周仍持续存在。使用 CPI-455 选择性靶向 H3K4 特异性 JmjC 去甲基化酶进行治疗，可增加感染后 CXCL11、CXCL9 和 CXCL10 的水平，并在感染后 48 小时达到峰值。 体内肿瘤研究[3] 将 1 至 2 mm 的牙龈卟啉单胞菌阳性 PDX 组织块皮下植入人源化小鼠的侧腹部。注射后，将小鼠随机分为不同组（每组 n = 10）。小鼠接受 CPI-455（50 mg/kg 或 70 mg/kg，每日腹腔注射）和抗 B7-H4 抗体（188；500 μg/只，每周腹腔注射）治疗，随后分别从第 6 天和第 20 天开始依次给予 CPI-455 和抗 B7-H4 抗体；分别采用分阶段联合治疗方案，从第6天开始使用CPI-455，持续14天；从第13天开始联合使用抗B7-H4抗体，持续3周；或采用延长分阶段联合治疗方案，使用CPI-455，持续28天。根据相应方案给药的动物（每组10只小鼠）每日监测长达2个月，并记录客观缓解率和生存率。[3] 另纳入一组小鼠（每组5只）进行机制研究。该组小鼠在肿瘤接种后第30天处死。在肿瘤出现终末逃逸（部分缓解，PR）或完全缓解（完全缓解，CR）之前，通过手术切除残余肿瘤，并进行免疫组化（IHC）和流式细胞术分析。确定了与淋巴细胞浸润相关的 IHC 和流式细胞术结果，并显示了该独立队列中每个治疗组 [（i）接受对照治疗的动物，（ii）接受抗 B7-H4 抗体单药治疗的动物，（iii）接受 75 mg/kg CPI-455 单药治疗的动物，以及（iv）接受 75 mg/kg 剂量 CPI-455 延长分阶段治疗的动物] 的代表性小鼠，TV (mm3) = π/6 × 长度 × 宽度2。当肿瘤体积（TV）超过 2,500 mm³ 时，患有进行性疾病或用于后续分析的小鼠被实施安乐死。 对于 MCF-7-TXR 异种移植：将 5×10⁶ 个细胞皮下植入 6-8 周龄雌性裸鼠的右侧腹部 [1] - 当肿瘤体积达到 100-150 mm³ 时，将小鼠随机分为 4 组（每组 n=6）：载体组、CPI-455 单药治疗组、紫杉醇单药治疗组、联合治疗组 [1] - CPI-455 配制于 0.5% 甲基纤维素 + 0.2% Tween 80 的水中，以 50 mg/kg 的剂量每日一次口服给药，持续 21 天 [1][2] - 紫杉醇以 10 mg/kg 的剂量每周一次腹腔注射给药，持续 3 周；每2天测量一次肿瘤体积，每周测量一次体重[1] - 对于食管鳞状细胞癌KYSE-30异种移植瘤：将5×10⁶个细胞皮下植入裸鼠体内，肿瘤形成后，用CPI-455（50 mg/kg，口服，每日一次）治疗28天[3] - 在实验终点收集肿瘤组织，用于免疫组织化学（B7-H4染色）和流式细胞术（免疫细胞浸润分析）[3] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
单次口服给药（50 mg/kg）后，CPI-455 在小鼠体内的口服生物利用度为 68%，在大鼠体内为 75% [2]
- 血浆半衰期 (t1/2) 在小鼠体内为 4.2 小时，在大鼠体内为 5.8 小时 [2] - 该化合物组织分布良好，在 MCF-7-TXR 异种移植小鼠中肿瘤/血浆浓度比为 2.6 [2] - 血浆蛋白结合率在人血浆中为 92%，在小鼠血浆中为 88%，在大鼠血浆中为 90% [2] - 体外代谢稳定性：CPI-455 在人肝微粒体中的半衰期为 38 分钟，在小鼠肝微粒体中的半衰期为 45 分钟 [2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外细胞毒性：用 CPI-455 (0.1-10 μM) 处理 72 小时后，正常 HMEC 和 HEEC 细胞的活力未见显著降低 (IC50 > 10 μM) [1][3]
- 在小鼠和大鼠中，CPI-455 (50 mg/kg，口服，每日一次，持续 28 天) 未引起体重、血液学参数（白细胞、红细胞、血小板）或肝肾功能指标（ALT、AST、BUN、Cr）的显著变化 [2][3] - 在浓度高达 10 μM 时未观察到 hERG 钾通道抑制，表明心脏毒性风险低 [2] - 在接受治疗的动物中未观察到明显的毒性反应（例如，胃肠道不适、脱发）[1][3] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
病原体能够劫持免疫防御机制，从而为感染部位产生的超突变恶性细胞创造耐受性环境。以免疫检查点为靶点的免疫疗法已展现出巨大的潜力。同样重要的是，通过表观遗传重编程免疫逃逸表型，以协同方式激活免疫系统，可以改善免疫疗法的疗效。这些进展促成了表观遗传学和免疫疗法的联合应用。我们此前已证实，从食管鳞状细胞癌（ESCC）病变中分离出的牙龈卟啉单胞菌是与这种致命疾病相关的主要病原体。本研究探讨了牙龈卟啉单胞菌感染期间宿主免疫的相关机制，并证实实验感染的食管鳞状细胞癌（ESCC）细胞会通过增加B7-H4和赖氨酸去甲基化酶5B的表达来做出反应。这使得我们能够随后在慢性感染模型和针对异种移植人肿瘤的免疫模型中，对抗B7-H4和组蛋白去甲基化酶抑制剂的免疫治疗效果进行体内分析。我们使用三种不同的临床前小鼠模型进行联合治疗，结果表明小鼠对牙龈卟啉单胞菌感染和肿瘤攻击均表现出较强的抵抗力。这可能是由于在微环境中产生了T细胞介导的免疫应答并形成了免疫记忆。在ESCC患者中，B7-H4和KDM5B的共表达与细菌载量的相关性显著高于单独表达任一分子。这些结果突显了牙龈卟啉单胞菌逃避免疫的独特能力，并确定了可用于治疗的潜在靶点，以改善对牙龈卟啉单胞菌感染和相关肿瘤发展的控制。[3]
CPI-455 是一种选择性 KDM5 家族（JARID1A-D）小分子抑制剂，该家族可催化组蛋白 H3 赖氨酸 4 (H3K4me3/me2) 的去甲基化。[1][2] - 其作用机制涉及与 KDM5 酶的 α-酮戊二酸结合口袋结合，阻断辅因子结合并抑制去甲基化酶活性，从而增加肿瘤抑制基因启动子处的 H3K4me3 富集。[1][2] - CPI-455 通过靶向耐药的持续性细胞并使其对化疗（例如紫杉醇）敏感，从而克服癌症的耐药性。[1] - 在食管鳞状细胞癌中， CPI-455 通过下调免疫检查点分子 B7-H4 和上调 MHC-I 表达来增强抗肿瘤免疫力，从而促进肿瘤抗原呈递 [3] - 该化合物具有良好的口服生物利用度、适中的半衰期和低毒性，支持其在 KDM5 依赖性癌症的临床前研究和潜在临床研究中的应用 [2] |
| 分子式 |
C16H15CLN4O
|
|
|---|---|---|
| 分子量 |
314.77
|
|
| 精确质量 |
278.116
|
|
| 元素分析 |
C, 69.05; H, 5.07; N, 20.13; O, 5.75
|
|
| CAS号 |
1628208-23-0
|
|
| 相关CAS号 |
CPI-455 hydrochloride;2095432-28-1
|
|
| PubChem CID |
78426698
|
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
|
| 沸点 |
488.7±55.0 °C at 760 mmHg
|
|
| 闪点 |
249.3±31.5 °C
|
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.2 mmHg at 25°C
|
|
| 折射率 |
1.670
|
|
| LogP |
2.46
|
|
| tPSA |
68.5
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
|
| 重原子数目 |
21
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
611
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
|
| SMILES |
0
|
|
| InChi Key |
VGXRQCOVGLGFIM-UHFFFAOYSA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C16H14N4O/c1-10(2)13-14(11-6-4-3-5-7-11)19-15-12(8-17)9-18-20(15)16(13)21/h3-7,9-10,18H,1-2H3
|
|
| 化学名 |
7-oxo-5-phenyl-6-propan-2-yl-1H-pyrazolo[1,5-a]pyrimidine-3-carbonitrile
|
|
| 别名 |
|
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
|
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.1769 mL | 15.8846 mL | 31.7692 mL | |
| 5 mM | 0.6354 mL | 3.1769 mL | 6.3538 mL | |
| 10 mM | 0.3177 mL | 1.5885 mL | 3.1769 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 Identification and characterization of a potent and selective KDM5 inhibitor with reversible activity in cells.Nat Chem Biol.2016 Jul;12(7):531-8. |
|---|
 CPI-455 selectively affects H3K4 methylation in several cell models.Nat Chem Biol.2016 Jul;12(7):531-8. |
 Crystal structure of KDM5A.Nat Chem Biol.2016 Jul;12(7):531-8. |
 Inhibitor binding at the KDM5A active site. |
|---|
 KDM5 activity is increased in DTP modelsin vitroandin vivo.Nat Chem Biol.2016 Jul;12(7):531-8. |
 KDM5 inhibition suppresses the emergence of drug-tolerant cells.Nat Chem Biol.2016 Jul;12(7):531-8. |
LD-110
LSD1-IN-45
DDP-38003
NCD-25
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
