CPM

别名: 1-(4-(7-(二乙基氨基)-4-甲基-2-氧代-2H-色烯-3-基)苯基)-1H-吡咯-2,5-二酮;1-(4-(7-(二乙氨基)-4-甲基-2-氧代-2H-苯并吡喃-3-基)苯基)-1H-吡咯-2,5-二酮
目录号: V46040 纯度: ≥98%
CPM 是一种马来酰亚胺类似物,用作蓝色荧光硫醇反应染料。
CPM CAS号: 76877-33-3
产品类别: New3
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
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产品描述
CPM 是一种马来酰亚胺类似物,用作蓝色荧光硫醇反应染料。CPM 的激发波长和发射波长最大值分别为 384 nm 和 470 nm。
CPM(CAS 76877-33-3),又名 7-二乙氨基-3-(4-马来酰亚胺苯基)-4-甲基香豆素,是一种马来酰亚胺衍生物,用作蓝色荧光硫醇反应染料。其分子式为 C24H22N2O4,分子量为 402.44 g/mol。其激发波长和发射波长最大值分别为 384 nm 和 470 nm。这种香豆素的马来酰亚胺衍生物本身基本不发荧光,但与硫醇反应后会发出荧光,因此可作为检测巯基的灵敏探针。
生物活性&实验参考方法
靶点
The target of CPM is thiol groups (-SH) in proteins and other biomolecules. Its mechanism of action is based on the Michael addition reaction between the maleimide group and the thiolate anion of cysteine residues. This reaction forms a stable thioether bond, covalently attaching the coumarin fluorophore to the thiol-containing molecule. The coumarin moiety becomes highly fluorescent upon conjugation, allowing for sensitive detection of thiols. This reactivity makes CPM a valuable tool for labeling and detecting cysteine-containing proteins.
体外研究 (In Vitro)
在体外,CPM 是一种马来酰亚胺衍生物,可作为蓝色荧光硫醇反应染料。其最大激发波长和发射波长分别为 384 nm 和 470 nm。该化合物广泛用作标记蛋白质和肽中半胱氨酸残基的蓝色荧光硫醇反应染料。它在与硫醇反应之前基本不发荧光,因此是一种检测巯基的灵敏探针。
体内研究 (In Vivo)
由于CPM是一种荧光标记试剂而非生物活性药物,因此通常不研究其体内活性。然而,该化合物可用于标记含硫醇的蛋白质或肽,然后将这些标记物注射到动物体内进行追踪。CPM与硫醇的反应性及其荧光特性使其能够用于体内检测标记分子。
酶活实验
使用CPM的体外酶/受体结合(非细胞)检测通常涉及用染料标记蛋白质或肽。蛋白质标记的标准流程如下:将蛋白质溶解于缓冲液(例如,pH 7.4的PBS)中,并用还原剂(例如,TCEP)处理以还原二硫键。向蛋白质溶液中加入CPM,并将反应混合物在室温下避光孵育1-2小时。标记后的蛋白质通过透析或尺寸排阻色谱法纯化。通过测量384 nm处的吸光度和蛋白质浓度来确定标记程度。
细胞实验
使用CPM的体外细胞分析通常涉及标记细胞内或细胞表面的硫醇。标准流程如下:培养细胞,并在37°C下与CPM(例如,1-10 µM)孵育一段时间(例如,30-60分钟)。然后洗涤细胞以去除未反应的染料。标记后的细胞可通过流式细胞术进行分析,以测量荧光强度,该强度反映了细胞的硫醇含量。或者,可以裂解细胞,并通过SDS-PAGE电泳分离裂解液,然后进行荧光扫描以检测标记的蛋白质。
动物实验
通常情况下,不会对CPM化合物本身进行体内动物实验。然而,可以将CPM标记的蛋白质或肽注射到动物体内进行追踪。标准实验方案如下:将CPM标记的蛋白质静脉注射到小鼠体内。在不同时间点处死动物并收集组织。制备组织切片,并在荧光显微镜下进行分析,以观察标记蛋白质的分布。或者,也可以将组织匀浆,然后定量分析荧光强度。
药代性质 (ADME/PK)
CPM的药代动力学性质并非本研究的主要重点。该化合物是一种荧光染料,用于体外标记硫醇。一旦与蛋白质结合,该结合物的药代动力学性质将由蛋白质而非染料决定。该化合物通常储存在-20°C。其与硫醇的反应性和荧光性质是其应用的主要考虑因素。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
CPM的毒性数据有限。作为一种荧光染料,在标记浓度下,其毒性通常被认为较低。然而,与所有化学试剂一样,处理该化合物时应采取适当的安全预防措施。应避免吸入、摄入和皮肤接触。该化合物不适用于人类。
参考文献

[1]. Grossman SH. Resonance energy transfer between the active sites of myocardial-type creatine kinase (isozyme MB). Biochemistry. 1983 Nov 8;22(23):5369-75.

其他信息
7-二乙氨基-3-(4-马来酰亚胺苯基)-4-甲基香豆素属于香豆素类化合物。其结构为2H-色烯-2-酮,在3、4和7位分别被4-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯并-1-基)苯基、甲基和二乙氨基取代。它是一种硫醇反应性荧光染料,具有荧光染料的功能。它属于香豆素、叔胺、苯和马来酰亚胺类化合物。
CPM是一种马来酰亚胺衍生物,是一种蓝色荧光硫醇反应性染料。其激发和发射最大值分别为384 nm和470 nm。该染料在与硫醇反应之前基本不发荧光。它用于标记蛋白质和肽中的半胱氨酸残基。它并非药物,没有临床用途或已获批准。它仅供研究用途,可从化学品供应商处购买。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C24H22N2O4
分子量
402.44248
精确质量
402.158
CAS号
76877-33-3
PubChem CID
122042
外观&性状
Light yellow to yellow solid powder
密度
1.302 g/cm3
沸点
618.7ºC at 760 mmHg
闪点
328ºC
折射率
1.648
LogP
4.109
tPSA
70.83
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
5
重原子数目
30
分子复杂度/Complexity
756
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
YGIABALXNBVHBX-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C24H22N2O4/c1-4-25(5-2)18-10-11-19-15(3)23(24(29)30-20(19)14-18)16-6-8-17(9-7-16)26-21(27)12-13-22(26)28/h6-14H,4-5H2,1-3H3
化学名
1-[4-[7-(diethylamino)-4-methyl-2-oxochromen-3-yl]phenyl]pyrrole-2,5-dione
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.4848 mL 12.4242 mL 24.8484 mL
5 mM 0.4970 mL 2.4848 mL 4.9697 mL
10 mM 0.2485 mL 1.2424 mL 2.4848 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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