Custirsen   中文名称: 库司替森

Clusterin (also known as TRPM-2, SGP-2, apoJ). Custirsen is an antisense oligonucleotide that specifically binds to clusterin mRNA, leading to RNase H-mediated degradation of the transcript and subsequent reduction in clusterin protein synthesis. Clusterin is a stress-induced, cytoprotective chaperone protein that is upregulated in many cancers following chemotherapy and contributes to treatment resistance. By suppressing clusterin expression, custirsen reduces chemoresistance and promotes apoptosis in cancer cells.

在无细胞体系中，Custirsen 不直接用于评估其酶抑制活性。相反，其活性是通过测量其与互补簇蛋白 mRNA 序列杂交的能力来评估的。反义杂交的特异性通过熔解温度 (Tm) 分析和核酸酶稳定性测定来验证。Custirsen 与其靶序列形成具有高特异性的稳定双链。与未修饰的寡核苷酸相比，硫代磷酸酯骨架赋予其抵抗核酸酶降解的能力。

在体外培养的癌细胞（例如前列腺癌LNCaP、PC-3、DU145细胞）中，custirsen处理可导致簇蛋白mRNA和蛋白水平呈剂量依赖性降低。簇蛋白敲低可增强癌细胞对化疗诱导凋亡的敏感性。体外实验表明，custirsen可增强多西他赛、卡巴他赛和其他化疗药物的细胞毒性。簇蛋白敲低的程度（降低>90%）与凋亡指数的增加呈正相关。Custirsen并不直接抑制细胞增殖，而是调节细胞对细胞毒性药物的反应。

反义活性评估方法是在无细胞杂交实验中，将 custirsen 与靶 RNA 孵育。将寡核苷酸（0.1-10 uM）与合成的簇蛋白 RNA 或体外转录的 mRNA 在杂交缓冲液中混合，加热以使二级结构变性，并使其退火。双链形成可通过天然凝胶电泳、RNase H 酶切实验（加入重组 RNase H 消化杂交体的 RNA 链）或使用标记探针时测量荧光来确认。熔解温度 (Tm) 分析通过紫外分光光度法测定，以确定双链稳定性。

核酸酶稳定性评估方法为：将 custirsen 在胎牛血清或细胞裂解液中于 37°C 孵育不同时间点（0-24 小时）。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳或高效液相色谱法 (HPLC) 分析样品，以检测完整寡核苷酸与降解产物。计算血清中的半衰期。细胞活性研究方面，根据制剂的不同，采用阳离子脂质体转染或自由摄取的方式，用 custirsen (0.1-10 uM) 处理癌细胞系 24-72 小时。采用 qRT-PCR 检测簇蛋白 mRNA，采用 Western blot 或 ELISA 检测簇蛋白蛋白。化疗增敏研究方面，先用 custirsen (0.1-10 uM) 处理细胞 24-48 小时，然后加入化疗药物（例如，多西他赛 1-100 nM）继续处理 48-72 小时。细胞凋亡可通过 Annexin V/PI 流式细胞术、caspase-3/7 活性或碘化丙啶染色亚 G1 期分析进行测量。

custirsen 的体内疗效已在前列腺癌异种移植模型中得到评估。携带皮下人前列腺肿瘤（LNCaP、PC-3）的小鼠接受腹腔或静脉注射 custirsen 治疗。在联合用药研究中，custirsen 在化疗（例如多西他赛、卡巴他赛）前给药，以抑制簇蛋白的表达。在 SYNERGY III 期临床试验中，转移性去势抵抗性前列腺癌 (mCRPC) 患者接受 custirsen 640 mg 静脉注射，分三次给药（第 -9、-7、-5 天），随后每周一次 640 mg，并联合每 3 周一次 25 mg/m² 的卡巴他赛。类似的方案也曾用于多西他赛。在 II 期临床试验中，custirsen 显示出剂量依赖性的簇蛋白表达降低，在前列腺组织和淋巴结中降低超过 90%，并伴有凋亡指数的显著升高。

人体和动物药代动力学研究表明，库斯替森具有双相血浆消除曲线。静脉输注640 mg，120分钟后，血浆峰浓度在输注结束时达到。末端半衰期约为2-5天。库斯替森广泛分布于组织，尤其是肝脏、肾脏、脾脏和淋巴结，较少分布于肿瘤。尿排泄有限（<5%剂量）。血浆清除率低（约0.3-0.6 L/h/kg）。由于其具有抗核酸酶的硫代磷酸酯骨架，未观察到主要代谢物。分布容积约为200-300 mL/kg。重复给药后，库斯替森会在组织中蓄积。

在纳入 294 例接受 custirsen 治疗的各种癌症患者的临床试验中，大多数不良事件为轻度至中度。custirsen 最常见的不良事件包括发热、疲乏、恶心、寒战、注射部位反应和头痛。在 SYNERGY III 期临床试验中，研究人员比较了 cabazitaxel/custirsen 与 cabazitaxel/安慰剂的疗效，结果显示，与单独使用 cabazitaxel 相比，custirsen 联合 cabazitaxel 并未增加总体毒性。两组的 3/4 级不良事件发生率相似。未观察到累积毒性、意外安全性信号或剂量限制性毒性。Custirsen 不具有骨髓抑制作用，也未报告肾脏或肝脏剂量限制性毒性。

[1]. A phase I pharmacokinetic and pharmacodynamic study of OGX-011, a 2'-methoxyethyl antisense oligonucleotide to clusterin, in patients with localized prostate cancer. J Natl Cancer Inst. 2005;97(17):1287-1296.

Custirsen是一种具有潜在抗肿瘤活性的苯并吡喃化合物。作为一种选择性雌激素受体调节剂（SERM），Custirsen可抑制雌激素敏感型乳腺癌细胞的增殖。该药物还能抑制胶质母细胞瘤细胞的生长，并通过一种不依赖于雌激素受体的机制诱导细胞凋亡。目前，Custirsen也正在研究用于治疗原发性脑肿瘤。Custirsen是一种混合骨架反义寡脱氧核苷酸，具有潜在的化疗增敏活性。给药后，Custirsen可阻断睾酮抑制的前列腺素2（TRPM-2）的翻译。这消除了TRPM-2的抗凋亡作用，使细胞对化疗更加敏感，最终导致肿瘤细胞死亡。TRPM-2是一种抗凋亡簇蛋白，在前列腺癌细胞中过表达，并与化疗敏感性相关。 [hr] [strong] [药物适应症] [strong] [br] [已在脑癌和乳腺癌的治疗中进行研究。] 作用机制 CC-8490 是一种选择性雌激素受体调节剂 (SERM)，可抑制雌激素敏感型乳腺癌细胞的增殖。该药物还能抑制胶质母细胞瘤细胞的生长，并通过一种不依赖于雌激素受体的机制诱导细胞凋亡。关于其在脑癌中的作用机制的初步结果表明，CC-8490 通过抑制核因子 (NF)-κB 及其靶基因 IEX-3、SOD2、IL6 和 IL8 发挥作用。药效学 CC-8490 是 Celgene 公司的一种专有苯并吡喃化合物，是一种新型抗癌化合物，目前正在评估其作为脑癌潜在疗法的疗效。美国国家癌症研究所也报道了其在乳腺癌治疗中的潜在抗肿瘤活性。 CC-8490是一种选择性雌激素受体调节剂（SERM），可抑制雌激素敏感型乳腺癌细胞的增殖。此外，该药物还能抑制胶质母细胞瘤细胞的生长，并通过一种不依赖于雌激素受体的机制诱导细胞凋亡。

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Custirsen曾参与多项针对多种癌症的临床试验，包括前列腺癌、非小细胞肺癌（NSCLC）、乳腺癌和卵巢癌。2014年，AFFINITY试验（NCT01578655）和SYNERGY试验（NCT01188187）评估了custirsen联合卡巴他赛或多西他赛治疗转移性去势抵抗性前列腺癌（mCRPC）的疗效。这两项III期临床试验均未达到其主要终点——总生存期获益，导致该药物研发终止。在AFFINITY试验中，635例既往接受过多西他赛治疗的mCRPC患者被随机分配至custirsen联合卡巴他赛组或单用卡巴他赛组；结果显示，两组均未观察到总生存期获益。尽管缺乏临床疗效，custirsen仍是研究簇蛋白生物学和反义寡核苷酸疗法的有用研究工具。截至2024年，custirsen尚未获准用于临床。它也被称为盐形式的卡西替林钠。

C231H312N78O119P20S20

7346.17541599274

7342.999

890056-27-6

76964582

Off-white to light yellow solid powder

-10

3160

47

171

154

468

20600

71

S=P(O)(OC[C@@H]1[C@H]([C@H]([C@H](N2C=NC3C(NC(N)=NC2=3)=O)O1)OCCOC)OP(O)(OC[C@@H]1[C@H]([C@H]([C@H](N2C(N=C(C(C)=C2)N)=O)O1)OCCOC)OP(O)(OC[C@@H]1[C@H](C[C@H](N2C=NC3C(N)=NC=NC2=3)O1)OP(O)(OC[C@@H]1[C@H](C[C@H](N2C=NC3C(NC(N)=NC2=3)=O)O1)OP(O)(OC[C@@H]1[C@H](C[C@H](N2C(N=C(C=C2)N)=O)O1)OP(O)(OC[C@@H]1[C@H](C[C@H](N2C=NC3C(N)=NC=NC2=3)O1)OP(O)(OC[C@@H]1[C@H](C[C@H](N2C=NC3C(NC(N)=NC2=3)=O)O1)OP(O)(OC[C@@H]1[C@H](C[C@H](N2C=NC3C(N)=NC=NC2=3)O1)OP(O)(OC[C@@H]1[C@H](C[C@H](N2C=NC3C(NC(N)=NC2=3)=O)O1)OP(O)(OC[C@@H]1[C@H](C[C@H](N2C(NC(C(C)=C2)=O)=O)O1)OP(O)(OC[C@@H]1[C@H](C[C@H](N2C(N=C(C=C2)N)=O)O1)OP(O)(OC[C@@H]1[C@H](C[C@H](N2C(NC(C(C)=C2)=O)=O)O1)OP(O)(OC[C@@H]1[C@H](C[C@H](N2C(NC(C(C)=C2)=O)=O)O1)OP(O)(OC[C@@H]1[C@H](C[C@H](N2C(N=C(C=C2)N)=O)O1)OP(O)(OC[C@@H]1[C@H](C[C@H](N2C=NC3C(N)=NC=NC2=3)O1)OP(O)(OC[C@@H]1[C@H]([C@H]([C@H](N2C(NC(C(C)=C2)=O)=O)O1)OCCOC)OP(O)(OC[C@@H]1[C@H]([C@H]([C@H](N2C(N=C(C(C)=C2)N)=O)O1)OCCOC)OP(=O)(OC[C@@H]1[C@H]([C@H]([C@H](N2C=NC3C(N)=NC=NC2=3)O1)OCCOC)OP(O)(OC[C@@H]1[C@H]([C@H]([C@H](N2C(NC(C(C)=C2)=O)=O)O1)OCCOC)O)=S)S)=S)=S)=S)=S)=S)=S)=S)=S)=S)=S)=S)=S)=S)=S)=S)=S)O[C@@H]1[C@@H](COP(O)(O[C@@H]2[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]2OCCOC)N2C(N=C(C(C)=C2)N)=O)=S)O[C@H]([C@@H]1OCCOC)N1C=NC2C(N)=NC=NC1=2

RCFZILUHCNXXFY-DEDWCYLFSA-N

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1-[(2R,4S,5R)-5-[[[(2R,3S,5R)-2-[[[(2R,3S,5R)-2-[[[(2R,3S,5R)-2-[[[(2R,3S,5R)-2-[[[(2R,3S,5R)-2-[[[(2R,3S,5R)-2-[[[(2R,3S,5R)-2-[[[(2R,3S,5R)-2-[[[(2R,3S,5R)-2-[[[(2R,3R,4R,5R)-5-(4-amino-5-methyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-2-[[[(2R,3R,4R,5R)-2-[[[(2R,3R,4R,5R)-2-[[[(2R,3R,4R,5R)-5-(4-amino-5-methyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-2-(hydroxymethyl)-4-(2-methoxyethoxy)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-5-(6-aminopurin-9-yl)-4-(2-methoxyethoxy)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-4-(2-methoxyethoxy)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-4-(2-methoxyethoxy)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-4-[[(2R,3S,5R)-3-[[(2R,3S,5R)-3-[[(2R,3S,5R)-3-[[(2R,3R,4R,5R)-3-[[(2R,3R,4R,5R)-5-(4-amino-5-methyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-3-[[(2R,3R,4R,5R)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3-[hydroxy-[[(2R,3R,4R,5R)-3-hydroxy-4-(2-methoxyethoxy)-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy]phosphinothioyl]oxy-4-(2-methoxyethoxy)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-4-(2-methoxyethoxy)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-4-(2-methoxyethoxy)-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxyoxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

H2O : ~50 mg/mL (~6.81 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。