| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Cy7.5 maleimide specifically targets free thiol groups (-SH, sulfhydryl groups) on proteins, peptides, and antibodies. The maleimide group reacts rapidly and selectively with thiols at pH 6.5-7.5, forming a stable thioether bond. This reaction enables site-specific labeling of reduced disulfide bonds or naturally occurring cysteine residues in biomolecules. The compound is not a pharmaceutical drug but a chemical labeling tool for fluorescence-based detection and imaging applications.
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| 体外研究 (In Vitro) |
最佳储备液制备方法：1. 制备蛋白A溶液：加入浓度为2 mg/mL的蛋白（抗体）以达到标记效果。蛋白溶液的理想pH值为8.5±0.5。如果pH值低于8.0，则加入1 mg二氧化碳。如果蛋白浓度低于2 mg/mL，标记效率将显著降低。最终建议蛋白浓度范围为2–10 mg/mL，以获得最佳标记效率。如果蛋白未置于含有伯胺（如Tris或甘氨酸）和铵离子的透明缓冲液中，则会影响其标记效率。2. 制备染料：将CY染料与无水DMSO混合，制备10 mM储备液。分装前，应使用玻璃管或涡旋振荡器充分混匀CY储备液，并置于-20°C或-80°C的避光处保存。 3. 染料溶液用量 根据标记蛋白的量，标记过程中需要使用相应的CY染料。CY染料和蛋白的用量如下：如果需要标记500 μL浓度为2 mg/mL的IgG（分子量=150,000），则需要3.95 μL的CY染料。溶解含有1毫克CY染料的试管，需要使用100 μL的DMSO。更具体地说，计算过程如下（以CY3-NHS酯为例）。 mmol (IgG) = mg/mL (IgG) × mL (IgG) / MW (IgG) = 2 mg/mL × 0.5 mL / 150,000 mg/mmol = 6.7 × 10⁻⁶ mmol 2) mmol (CY3-NHS酯) = mmol (IgG) × 10 = 6.7 × 10⁻⁶ mmol × 10 = 6.7 × 10⁻⁵ mmol 三) μL CY3-NHS酯等于 mmol CY3-NHS酯 × MW CY3-NHS酯 / mg/μL CY3-NHS酯，即 6.7 × 10⁻⁵ mmol × 590.15 mg/mmol / 0.01 mg/μL，或 3.95 μL（体积比）。使用方法 1. 反应标记 1) 将计算体积的 10 mg/mL CY 染料缓慢加入新鲜载体中。离心后的样品应短暂收集在反应管底部。加入 0.5 mL 蛋白质样品溶液，轻轻摇晃混匀。切勿复制步骤 2) 将反应管置于黑暗处，充分摇晃，并在原设置下静置 60 分钟（每周 10-15 分钟）。轻轻翻转反应管数次，直至达到 2. 蛋白质脱盐和封闭 SepHadex G-25 柱封闭染料偶联物的示例。阅读制造商说明并准备 SepHadex G-25 柱。2) 将反应混合物加至 SepHadex G-25 柱顶部。当混合物到达上层树脂表面的下限时，加入 PBS（pH 7.2-7.4）。为了完成柱收缩，立即向所需样品中加入额外的 PBS（pH 7.2-7.4）。要制备所需的染料-蛋白质偶联物，请将各组分混合。
在体外，Cy7.5 马来酰亚胺可用于标记含硫醇的蛋白质，从而应用于多种荧光检测方法。其 820 nm 的近红外发射使其能够深入组织，并降低生物样品中的背景自发荧光。在蛋白质标记中，马来酰亚胺基团在 pH 6.5-7.5 的条件下与半胱氨酸硫醇特异性反应。最佳标记条件要求蛋白质存在于不含伯胺（例如 Tris 或甘氨酸）的缓冲液中，且浓度为 2-10 mg/mL。将染料溶解于无水 DMSO 中，配制成 10 mM 的储备液。通常加入 10 倍摩尔过量的染料，以使每个蛋白质分子标记 2-5 个染料分子。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，Cy7.5 马来酰亚胺并非直接给药，而是用于预先标记生物分子，以便在活体动物中进行近红外荧光成像。染料标记的生物分子保留其生物活性，近红外荧光特性使其能够对活体小鼠的组织分布、肿瘤靶向和生物分布进行非侵入性成像（激发/发射波长：770/820 nm）。820 nm 的发射波长可最大限度地减少血红蛋白和水的光散射和吸收，从而实现 1-2 cm 的成像深度。
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| 酶活实验 |
对于非细胞介导的偶联实验，采用标准方案将Cy7.5马来酰亚胺偶联到含硫醇基团的蛋白质上。将蛋白质（2-10 mg/mL）溶于PBS缓冲液（pH 7.2）或100 mM磷酸盐缓冲液（pH 7.0）中。如果需要还原二硫键，则用5-10 mM TCEP在室温下处理30分钟，然后更换缓冲液。将染料溶解于无水DMSO中，配制成10 mM的溶液。向蛋白质溶液中加入10-20倍摩尔过量的染料，并在室温下避光反应2小时或在4℃下过夜。未偶联的染料通过尺寸排阻色谱（Sephadex G-25）或透析去除。标记程度通过280 nm和770 nm处的吸光度测定。
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| 细胞实验 |
对于体外细胞实验，将细胞（例如 HeLa、MDA-MB-231）接种于玻璃底培养皿或 96 孔板中。使用所述方案，用 Cy7.5 马来酰亚胺标记目标蛋白（例如抗体、转铁蛋白）。将细胞与标记蛋白（通常浓度为 1-50 ug/mL）在培养基中于 37℃ 孵育 30-60 分钟。对于活细胞成像，用 PBS 洗涤细胞以去除未结合的标记物，并置于不含酚红的培养基中培养。使用配备 785 nm 激光器和 820 nm 发射滤光片的共聚焦显微镜采集图像。对于固定细胞成像，洗涤细胞，用 4% 多聚甲醛固定，然后进行封片。
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| 动物实验 |
在体内动物研究中，采用小鼠异种移植瘤模型。将皮下移植瘤（100-200 mm³）的裸鼠（6-8周龄）通过尾静脉注射Cy7.5标记的肿瘤靶向抗体（例如，抗HER2或抗EGFR），剂量为100-200 μL PBS，其中含有100-200 μg标记抗体。小鼠用2%异氟烷麻醉，并在注射后0、6、12、24、48和72小时，使用配备770 nm激发和820 nm发射滤光片的体内成像系统采集近红外荧光图像。对肿瘤区域的荧光强度进行定量分析。在最后一个时间点，取出器官进行离体成像。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
Cy7.5 马来酰亚胺的分子量为 807.46 g/mol，最大激发波长/发射波长分别为 770 nm 和 820 nm，适用于深层组织近红外成像。该化合物可溶于 DMSO，可配制成 10 mM 的储备液。由于马来酰亚胺基团易水解，用于蛋白质标记时，工作液应在使用前立即配制。该染料应储存于 -20℃，避光防潮。溶液在密封避光防潮条件下，于 -80℃ 可稳定保存 6 个月，于 -20℃ 可稳定保存 1 个月。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
马来酰亚胺基团具有化学活性，直接接触可引起皮肤和眼睛刺激。处理该化合物时应遵循标准化学品安全操作规程：佩戴手套、实验服和护目镜。该化合物不适用于人类治疗或诊断用途。目前尚无具体的急性毒性数据，但应将其视为潜在刺激物进行处理。在用于标记的浓度（微摩尔至低毫摩尔）下，细胞培养中未观察到明显的毒性。马来酰亚胺基团水解生成低毒性的N-羟基琥珀酰亚胺。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
Cy7.5 马来酰亚胺属于花菁染料家族，其特征在于两个氮原子通过奇数个甲基单元连接，这使得该染料具有较长的吸收/发射波长、较高的消光系数和良好的水溶性。马来酰亚胺官能团可与巯基选择性反应，这使其特别适用于在特定位点（例如还原铰链区半胱氨酸残基）标记抗体和蛋白质。该染料广泛应用于荧光显微镜、流式细胞术、蛋白质印迹和活体成像等科研领域。本产品仅供科研使用。
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| 分子式 |
C51H55CLN4O3
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|---|---|
| 分子量 |
807.46
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| 精确质量 |
806.396
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| CAS号 |
2270866-73-2
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| PubChem CID |
162477420
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| 外观&性状 |
Green to dark green solid powder
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| tPSA |
72.7
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
12
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| 重原子数目 |
59
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| 分子复杂度/Complexity |
1760
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1=CC=CC2=C3C(N(C)/C(=C\C=C4/CCCC(C=CC5=[N+](CCCCCC(NCCN6C(=O)C=CC6=O)=O)C6=CC=C7C=CC=CC7=C6C5(C)C)=C/4)/C3(C)C)=CC=C12.[Cl-] |t:17|
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| InChi Key |
XCNYYRVWJSOPSW-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C51H54N4O3.ClH/c1-50(2)43(53(5)41-25-23-37-16-8-10-18-39(37)48(41)50)27-21-35-14-13-15-36(34-35)22-28-44-51(3,4)49-40-19-11-9-17-38(40)24-26-42(49)54(44)32-12-6-7-20-45(56)52-31-33-55-46(57)29-30-47(55)58;/h8-11,16-19,21-30,34H,6-7,12-15,20,31-33H2,1-5H3;1H
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| 化学名 |
6-[(2Z)-1,1-dimethyl-2-[(2Z)-2-[3-[(E)-2-(1,1,3-trimethylbenzo[e]indol-3-ium-2-yl)ethenyl]cyclohex-2-en-1-ylidene]ethylidene]benzo[e]indol-3-yl]-N-[2-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)ethyl]hexanamide;chloride
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.2385 mL | 6.1923 mL | 12.3845 mL | |
| 5 mM | 0.2477 mL | 1.2385 mL | 2.4769 mL | |
| 10 mM | 0.1238 mL | 0.6192 mL | 1.2385 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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