| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Cholinesterase
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| 体外研究 (In Vitro) |
粉防己(STR)是一种常用的中药,通过利尿来缓解水肿。在临床上,STR提取物或其成分广泛用于治疗水肿、排尿困难和风湿病,以调节水代谢。此外,STR与其他中药结合治疗情绪问题已有多年的历史。然而,STR对神经系统的物质基础和机制尚未揭示。在这里,鉴定了不同提取溶剂的STR提取物的主要成分,包括三种主要生物碱,即cyclanoline, fangchinoline, and tetrandrine。采用Ellman法测定STR提取物及其生物碱的胆碱酯酶抑制活性。Cyclanoline和芳樟碱均显示出乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制活性,显示出非竞争性酶抑制作用。相比之下,粉防己碱没有表现出酶抑制作用。根据中值效应原理计算STR生物碱与石杉碱甲或多奈哌齐的协同作用。方喹啉石杉碱甲或多奈哌齐的药物组合协同抑制AChE,在Fa=0.5时的组合指数(CI)<1。此外,分子对接结果表明,方喹啉在外周阴离子位点与AChE残基结合,环羊毛脂在外周离子位点、阴离子位点和催化位点与AC胆碱酯酶残基结合。同时,环羊毛脂在阴离子位点、催化位点和芳香位点与丁酰胆碱酯酶(BChE)残基结合。研究结果支持,来源于STR的生物碱fangchinoline和Cyclanoline可以解释STR的抗AChE功能。因此,STR提取物或其生物碱可能被开发为阿尔茨海默氏症患者的治疗策略[1]。
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| 酶活实验 |
胆碱酯酶活性测定[1]
根据Ellman方法,使用终体积为200μL的96孔微量滴定板测试STR的提取物和生物碱的胆碱酯酶活性。通过用预冷的低盐裂解缓冲液(1:10 w/v;含有1 mM乙二胺四乙酸(EDTA)和乙二醇四乙酸(EGTA)、0.5%曲通X-100、150 mM NaCl、10 mM 4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸(HEPES,pH 7.4)、50μg/mL盐酸苯甲脒、10μg/mL抑肽酶、亮肽和胃蛋白酶抑制剂)匀浆制备小鼠脑裂解液,用于AChE活性测定。AChE测定培养基由含有测试药物的脑裂解物(5 mg/mL)、80 mM Na2HPO4(pH 7.4)、0.1 mM四异丙基焦磷酰胺(iso-OMPA)、0.5 mM DTNB(5′-二硫代双(2-硝基苯甲酸))和0.625 mM ATCh组成。将脑裂解物、Na2HPO4缓冲液和异OMPA溶液的混合物在37°C下孵育10分钟,然后加入DNTB和ATCh溶液。在37°C下重新孵育30分钟后,通过测定405nm处的吸光度来测试AChE活性。 制备小鼠血清(1:50 v/v,用预冷低盐裂解缓冲液稀释)用于BChE活性测定。BChE测定培养基由与AChE测定介质相同的成分组成,除了用稀释的血清溶液和0.1μM BW284c51代替脑裂解物和异OMPA。将稀释血清、Na2HPO4缓冲液和BW284c51溶液的混合物在37°C下孵育10分钟,然后加入DNTB和ATCh溶液。在37°C下重新孵育30分钟后,通过测定405nm处的吸光度来测试BChE活性。AChE/BChE测定反应体系中DMSO的浓度控制在0.5%。设置不含脑裂解物或血清的背景对比度,以消除405nm处的颜色干扰。药物的AChE/BChE抑制活性以对照吸光度值的百分比计算,AChE/BChE抑制率(%)=(1-有抑制剂的吸光度/无抑制剂的吸光度)×100%。加兰他敏用作阳性对照。使用Bio-Rad蛋白质测定试剂盒测量蛋白质浓度)。 米氏常数(Km)、最大速度(Vmax)和抑制常数(Ki)用于评估方喹啉和Cyclanoline的动力学。然后使用初始速度绘制Lineweaver–Burk图,从中计算出Km和Vmax值(水平和垂直截距的绝对值分别为1/Km和1/Vmax)。然后绘制了互反图的斜率与方喹诺林和Cyclanoline的剂量的关系图,Ki值被确定为x轴截距的绝对值。多奈哌齐被用作阳性对照。所有实验均一式三份。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
环己烷碱是一种带电荷的小檗碱生物碱,由(S)-scoulerine的N-甲基化得到。它是一种EC 3.1.1.7(乙酰胆碱酯酶)抑制剂和植物代谢产物。它是一种季铵离子化合物,也是一种小檗碱生物碱。其功能与(S)-scoulerine相关。
据报道,环己烷碱存在于Stephania tetrandra、Cyclea tonkinensis和其他一些有相关数据的生物体中。 天然植物和草药的化学成分是中药有效物质基础。本文提出,生物碱是STR抑制AChE和BChE的主要活性成分。酶活性结果表明,STR提取物的AChE抑制活性随生物碱含量的增加而增强。双苄基异喹啉和原小檗碱是STR抑制AChE/BChE活性的两大主要生物碱类型。其中,双苄基异喹啉生物碱抑制AChE,而水溶性原小檗碱生物碱则同时抑制AChE和BChE活性。方奇诺林是抑制AChE的代表性双苄基异喹啉生物碱,而其结构类似物四氢黄连碱则不具有AChE抑制活性。环己烷碱是主要的原小檗碱生物碱,其对AChE的抑制活性与对BChE的抑制活性相当。此外,方奇诺林和环己烷碱均表现出非竞争性AChE抑制作用。方奇诺林的Ki值远低于环己烷碱。分子对接模拟也支持了这一结果。此外,方奇诺林与石杉碱甲或多奈哌齐联合使用对乙酰胆碱酯酶抑制具有良好的协同作用。[1] |
| 分子式 |
C20H24NO4+
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|---|---|
| 分子量 |
342.40886
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| 精确质量 |
342.169
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| 元素分析 |
C, 70.15; H, 7.07; N, 4.09; O, 18.69
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| CAS号 |
18556-27-9
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| 相关CAS号 |
17472-50-3 (Cl-);18556-27-9;
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| PubChem CID |
3082134
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| 外观&性状 |
Typically exists as
Off-white to light brown solid at room temperature
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| LogP |
-2.19
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| tPSA |
58.92
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
488
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| 定义原子立体中心数目 |
2
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| SMILES |
COC1=C(O)C=C2[C@@H]3CC4C=CC(=C(O)C=4C[N@+]3(C)CCC2=C1)OC
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| InChi Key |
LKLWVKCEYSPQHL-KKSFZXQISA-O
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H23NO4/c1-21-7-6-13-9-19(25-3)17(22)10-14(13)16(21)8-12-4-5-18(24-2)20(23)15(12)11-21/h4-5,9-10,16H,6-8,11H2,1-3H3,(H-,22,23)/p+1/t16-,21-/m0/s1
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| 化学名 |
(7S,13aS)-3,10-dimethoxy-7-methyl-6,8,13,13a-tetrahydro-5H-isoquinolino[2,1-b]isoquinolin-7-ium-2,9-diol
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| 别名 |
Cyclanoline; Cissamine; 18556-27-9; 77QC59KBD2; (-)-Cyclanoline; (7S,13aS)-3,10-dimethoxy-7-methyl-6,8,13,13a-tetrahydro-5H-isoquinolino[2,1-b]isoquinolin-7-ium-2,9-diol; (-)-Cissamine; UNII-77QC59KBD2;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9205 mL | 14.6024 mL | 29.2048 mL | |
| 5 mM | 0.5841 mL | 2.9205 mL | 5.8410 mL | |
| 10 mM | 0.2920 mL | 1.4602 mL | 2.9205 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。