Cystine

别名: NSC-13203; L-cystine; 56-89-3; L-Dicysteine; beta,beta'-Dithiodialanine; NSC 13203; Cystine L-胱氨酸 ; 双巯丙氨酸(食品级); 双巯丙氨酸;3,3'-二硫代二丙氨酸;双-β-硫化丙氨酸;L-胱氨酸(食品级);胱氨酸;L-(-)-胱氨酸;L-(-)-Cystine L-(-)-胱氨酸;L-半胱氨酸;L-胱氨酸 L-CYSTINE;L-胱氨酸 USP标准品;L-胱氨酸 标准品;L-胱氨酸(RG);L-胱氨酸(食品级)(CP2010);L-胱氨酸,BR;L-胱胺酸
目录号: V19033 纯度: ≥98%
L-胱氨酸是一种氨基酸 (AA),是体内的硫醇,在细胞调节过程中发挥重要作用。
Cystine CAS号: 56-89-3
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
500mg
1g
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Other Forms of Cystine:

  • L-Cystine-d4 (L-胱氨酸 d4)
  • L-Cystine-34S2
  • L-Cystine-3,3'-13C2 (L-胱氨酸-13C2)
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InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
L-胱氨酸是一种氨基酸,在体内以硫醇的形式存在,并在细胞调控过程中发挥重要作用。L-胱氨酸是由氨基酸L-半胱氨酸通过二硫键连接的二聚体。它是血浆和细胞外液中胱氨酸的主要存在形式。L-胱氨酸通过特定的转运蛋白进入细胞,并在细胞内被还原为L-半胱氨酸,作为谷胱甘肽(GSH)合成和蛋白质生成的重要来源。研究表明,L-胱氨酸在铁死亡敏感性、胱氨酸病病理、肾脏蓄积、细菌氧化应激防御以及作为Nrf2细胞保护通路诱导剂等方面发挥作用。[1][3][4][5][6] 胱氨酸是一种天然存在的氨基酸,由两个半胱氨酸分子氧化形成,是半胱氨酸的二聚体。它并非人体发育必需氨基酸。它对蛋白质中二硫键的形成至关重要,有助于维持蛋白质的稳定性和正确折叠。该化合物的分子量为240.30,分子式为C6H12N2O4S2。
生物活性&实验参考方法
靶点
System xc- (cystine/glutamate antiporter, SLC7A11/SLC3A2). [1][6]
Keap1 (Kelch-like ECH-associated protein 1). L-cystine treatment increases Nrf2 protein half-life from 19.4 min to 30.9 min. [6]
FliY-YecSC (ABC transporter, high affinity, Km = 110 nM). [5]
YdjN (low affinity symporter, Km = 1.1 µM). [5]
Cystine is a dimer of cysteine and is involved in the formation of disulfide bonds in proteins. It is a component of proteins and is essential for their stability and proper folding. It is also used in the body to create glutathione, an important antioxidant.
体外研究 (In Vitro)
在肝细胞癌Huh6和Huh7细胞中,系统xc抑制剂(柳氮磺胺吡啶、erastin)在生理浓度为83 µM的L-胱氨酸培养基中的生长抑制作用强于在200 µM的商业培养基中的生长抑制作用。RSL3(GPX4抑制剂)未显示出差异。在Huh7细胞中,柳氮磺胺吡啶在83 µM L-胱氨酸培养基中的GI50为209 µM,而在200 µM L-胱氨酸培养基中的GI50为371 µM。[1] 在HeLa细胞中,L-胱氨酸(0.1-1.6 mM)可剂量依赖性地增加Nrf2蛋白的表达,其中0.8 mM的效果最佳。时间进程研究表明,Nrf2在30分钟内即可被诱导,并在4小时达到峰值。 [6] RNA-seq 和 RT-PCR 结果表明,L-胱氨酸(0.8 mM,16 小时)上调了多个 Nrf2 下游基因(NQO1、HMOX1、GCLC、GCLM、SRXN1、TXNRD1、AKR1C1 和 OSGIN1)的表达,其中 OSGIN1 的诱导作用最强。[6] L-胱氨酸以剂量依赖的方式激活了 ARE-荧光素酶报告基因(mGST-ARE 和 hNQO1-ARE)。[6] L-胱氨酸处理(0.8 mM,4 小时)使 Nrf2 蛋白的半衰期从 19.4 分钟延长至 30.9 分钟,并降低了 Nrf2 的泛素化水平。 [6] 在大肠杆菌中,鉴定出两种L-胱氨酸转运蛋白:YdjN(低亲和力,Km = 1.1 µM,Vmax = 14.7 pmol [10^9 cells]^-1 min^-1)和FliY-YecSC(高亲和力,Km = 110 nM,Vmax = 6.41 pmol [10^9 cells]^-1 min^-1)。ΔydjNΔyecS突变体不能以L-胱氨酸作为唯一硫源生长。[5] L-胱氨酸(0.8 mM,16 h)可降低H2O2诱导的ROS生成,并保护HeLa细胞免受H2O2或阿霉素诱导的细胞凋亡,siRNA敲低实验表明,该作用依赖于Nrf2。 [6] 在大肠杆菌中,fliY 或 ydeD 基因的缺失会增加 H2O2 胁迫下的脂质过氧化作用(MDA 水平比野生型高 2.1-2.3 倍)。[5] L-半胱氨酸处理不会改变 Nrf2 或 Keap1 的 mRNA 水平。[6] L-半胱氨酸不能诱导 Nrf2 的表达。[6] 胱氨酸对于蛋白质中二硫键的形成至关重要,有助于维持蛋白质的稳定性和正确折叠。它是一种非必需氨基酸。胱氨酸可用作抗氧化剂,保护组织免受辐射和污染的侵害。它还能刺激造血系统,促进白细胞和红细胞的生成。
体内研究 (In Vivo)
在大鼠中,静脉注射L-[^35S]胱氨酸后,血浆放射性消失呈双相曲线,快速半衰期为7 ± 1分钟,慢速半衰期为104 ± 5分钟。肾皮质细胞内L-[^35S]胱氨酸的峰值积累(分布比14.2)在30分钟时达到。[4]
大鼠肾皮质中L-[^35S]胱氨酸的代谢产物包括胱氨酸、半胱氨酸、还原型谷胱甘肽和一种未鉴定的化合物(可能是牛磺酸、半胱氨酸亚磺酸盐或胱氨酸)。血浆中仅检测到胱氨酸。[4]
输尿管结扎对大鼠肾脏中L-胱氨酸代谢产物的细胞积累没有显著影响。 L-赖氨酸(450 µmol)与L-胱氨酸联合给药可增强细胞内35S产物的积累并增加胱氨酸的清除率(15-30分钟时的分数清除率为24.0 ± 0.7%,而未联合赖氨酸时为4.02 ± 0.52%)。[4]
在一名胱氨酸病患者中,通过FTIR、OPTIR和AFM-IR对肾脏活检进行分析,发现微米级和纳米级均存在L-胱氨酸(六边形形态)和L-半胱氨酸(矩形形态)晶体。 [3]
在大肠杆菌中,Hpx-ΔydeDΔfliY突变细胞(缺乏Cys/CySS穿梭系统)用膜不透性H2O2探针染色后,周质空间(约占细胞的11%)中显示出H2O2的积累。[5]
胱氨酸在胱氨酸病(一种溶酶体贮积症)患者的溶酶体中积累。它与肾脏范可尼综合征和肾小球功能丧失有关。胱氨酸在体内用于合成谷胱甘肽。
酶活实验
大肠杆菌中L-胱氨酸的摄取测定:收集生长至对数生长期中期的细胞,用KPM溶液(10 mM MgSO4,0.1 M K2HPO4,pH 6.5)洗涤,并重悬至OD660 = 0.4。将细胞悬液用D-葡萄糖活化,于37°C孵育10分钟。加入指定浓度的L-[^14C]-胱氨酸启动摄取。室温孵育10分钟后,用GF/C滤膜过滤收集细胞,洗涤三次,并通过液体闪烁计数法测定放射性。初始摄取速率至少在20分钟内呈线性关系。使用Hanes-Woolf作图法计算动力学参数(Km,Vmax)。 [5]
周质H₂O₂检测:将细胞用1 mM五氟苯磺酰基-2',7'-二氟尿苷(BES-H₂O₂,一种细胞不渗透性荧光探针)在室温下染色30分钟。洗涤后,在荧光显微镜下观察染色细胞(激发波长485 nm,发射波长530 nm)。染色模式分为无染色、胞质染色和周质染色。[5]
脂质过氧化(TBARS)测定:收集细胞,加入TBARS溶液(0.01%丁基羟基甲苯、20%三氯乙酸、0.65%硫代巴比妥酸)。将样品在100℃加热25分钟,冷却,离心,并在532 nm处测定吸光度。根据标准曲线计算MDA当量浓度。 [5]
胱氨酸可通过无细胞实验评估其形成二硫键的能力和抗氧化活性。然而,其特异性的酶促或受体结合实验尚未得到充分研究。其在蛋白质稳定性中的作用可通过生化方法进行研究。
细胞实验
细胞活力检测(CellTiter-Glo):将细胞接种于96孔板(2000个细胞/孔)。24小时后,更换培养基,加入含有200 µM或83 µM L-胱氨酸以及指定药物的培养基。细胞分别用柳氮磺胺吡啶(Huh6细胞培养72小时,Huh7细胞培养24小时)、erastin(72小时)或RSL3(72小时)处理。使用CellTiter-Glo试剂盒检测细胞活力。GI50定义为使细胞活力降低50%的剂量。[1] PI染色检测细胞膜通透性:处理后,用PBS洗涤细胞,并在黑暗中用1 µg/mL碘化丙啶孵育30分钟。采集明场和荧光图像(激发/发射波长535/617 nm)。每组随机选取三张图像,计算PI阳性细胞的百分比。 [1]
脂质过氧化(C11-BODIPY):处理后,加入1 µM C11-BODIPY探针,于37°C孵育30分钟。用胰蛋白酶消化收集细胞,并通过流式细胞仪检测5000个细胞的荧光强度(激发/发射波长488/525 nm)。[1]
Western blot检测Nrf2蛋白:用含5% 2-巯基乙醇的Laemmli样品缓冲液收集细胞。将样品煮沸、超声处理,进行SDS-PAGE电泳分离,转移至PVDF膜,然后分别与抗Nrf2、抗Keap1、抗HMOX1、抗SRXN1、抗TXNRD1、抗AKR1C、抗GAPDH或抗泛素抗体孵育,最后与HRP标记的二抗孵育。 [6]
ARE 报告基因检测:将 pGL4.37-mGST-ARE luc 或 pGL4.37-hNQO1-ARE luc 载体与 pCMV Renilla 荧光素酶载体共转染至细胞中。转染 24 小时后,用 L-胱氨酸或 SFN 处理细胞 16 小时。使用 Dual-Glo 荧光素酶检测试剂盒测定萤火虫荧光素酶和 Renilla 荧光素酶活性。[6]
泛素化检测:将细胞用 0.8 mM L-胱氨酸或 5 µM SFN 以及 10 µM MG132 处理 4 小时。用含 1% SDS 的 TBS 缓冲液裂解细胞。煮沸后,将裂解液稀释,并用蛋白 A/G 琼脂糖珠进行预清除。将Nrf2与抗Nrf2抗体在4℃下孵育过夜进行免疫沉淀,然后用Protein A/G磁珠捕获。洗脱免疫沉淀的蛋白,并进行Western blot分析以检测泛素。[6]
活性氧(ROS)检测(DCFDA):细胞用0.8 mM L-胱氨酸预处理16小时,然后在黑暗中用10 µM DCFDA孵育30分钟。加入H₂O₂,用酶标仪测量DCF荧光强度(激发/发射波长485/535 nm)。[6]
Caspase-3/7活性测定:细胞在裂解缓冲液(0.5% Nonidet P-40,0.5 mM EDTA,150 mM NaCl,50 mM Tris,pH 7.5)中裂解。将细胞裂解液与 80 µM Ac-DEVD-AMC 底物在 37°C 下孵育 1 小时。测量荧光强度(激发/发射波长 365/450 nm)。[6]
MTT 法检测细胞活力:将细胞用 L-胱氨酸处理 8 小时,然后用阿霉素处理 24 小时。加入 MTT (2 mg/mL) 孵育 2 小时。将生成的甲臜溶解于酸化的异丙醇中,并在 570 nm 处测量吸光度。[6]
siRNA 转染:使用 Lipofectamine 3000 将对照 siRNA 或 Nrf2 siRNA 转染至细胞中。6 小时后,加入含 20% FBS 的 DMEM 培养基培养 18 小时,然后更换为新鲜培养基培养 48 小时,之后进行 L-胱氨酸处理。 [6]
利用CRISPR-Cas9技术敲除Keap1:将Keap1 CRISPR/Cas9敲除质粒转染至HeLa细胞。通过流式细胞术分选GFP阳性细胞,并以单细胞密度接种于细胞中以进行克隆形成实验。通过Western blot验证Keap1敲除。检测五个克隆(KO1-KO5)对L-胱氨酸的反应。[6]
实时定量RT-PCR:将总RNA(1 µg)反转录为cDNA。使用SYBR Green Master Mix和针对Nrf2、Keap1、NQO1、HMOX1、GCLM、TXNRD1、SRXN1、AKR1C1、OSGIN1、GAPDH或18S rRNA的特异性引物进行qPCR。使用∆CT法计算mRNA丰度。 [6]
在基于细胞的检测中评估胱氨酸,以研究其在蛋白质折叠和氧化还原调控中的作用。用胱氨酸处理细胞,并测量其对谷胱甘肽水平和蛋白质稳定性的影响。此外,还在胱氨酸病模型中对其进行研究。
动物实验
L-胱氨酸蓄积大鼠模型:成年雄性Sprague-Dawley大鼠(150-250 g)经静脉注射L-[³⁵S]胱氨酸(1.6 mM,每只大鼠1.14 µCi)。在指定时间点(0-90分钟),将大鼠麻醉并断头处死。采集血液,取出肾脏。将肾脏切成两半,并用Stadie-Riggs切片机进行连续切片。从外极到外髓质各取4片切片。评估细胞内和细胞外放射性。计算分布比(每毫升细胞内液每分钟计数/每毫升血浆每分钟计数)。[4]
输尿管结扎:在麻醉下,将左侧输尿管在肾盂下方结扎。1小时(或10分钟)后,向大鼠注射L-[³⁵S]胱氨酸。 45分钟(或10分钟)后取组织。[4]
清除率研究:大鼠用硫喷妥钠麻醉。进行气管切开术、膀胱插管和颈静脉插管。输注10%甘露醇(溶于0.9%氯化钠溶液)。[甲氧基-3H]菊粉作为启动和维持输注。采集对照尿样后,大鼠接受静脉注射L-[35S]胱氨酸(1.6 mM,8.0 µCi),同时或不同时注射L-赖氨酸(450 µmol)。收集三次15分钟的尿液,并在中点采集血样。计算分数清除率(胱氨酸/菊粉)。[4]
在动物模型中,胱氨酸被用于研究其在蛋白质代谢和抗氧化防御中的作用。它已被用于胱氨酸病模型的研究。然而,具体的动物实验方案尚未得到充分记录。
药代性质 (ADME/PK)
大鼠静脉注射L-[³⁵S]胱氨酸后,血浆中L-[³⁵S]胱氨酸的放射性强度下降,快速半衰期为7 ± 1分钟,慢速半衰期为104 ± 5分钟。[4]
注射L-[³⁵S]胱氨酸后,在大鼠血浆中检测到的唯一³⁵S标记化合物是胱氨酸。[4]
胱氨酸的分子量为240.30,分子式为C₆H₁₂N₂O₄S₂,CAS号为56-89-3。该化合物为白色结晶性粉末,微溶于水。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
在 HeLa 细胞中,浓度高达 1.6 mM 的 L-胱氨酸可诱导 Nrf2 表达,且未观察到明显的毒性。[6] 在大肠杆菌中,L-胱氨酸转运蛋白基因(ydjN、yecS、fliY)的缺失并不影响正常条件下的生长,但会增加其对 H₂O₂ 胁迫的敏感性(延长滞后期)。[5] L-胱氨酸被认为是一种无毒的氨基酸衍生物,适用于细胞保护,且安全性良好。[6] 目前尚无关于胱氨酸的详细毒性数据。该化合物是一种天然存在的氨基酸,通常被认为安全。它被用于科研和营养应用。
参考文献

[1]. Extracellular Concentration of L-Cystine Determines the Sensitivity to System xc- Inhibitors. Biomol Ther (Seoul). 2022 Mar 1;30(2):184-190.

[2]. Enhancement of antigen-specific immunoglobulin G production in mice by co-administration of L-cystine and L-theanine. J Vet Med Sci. 2007 Dec;69(12):1263-70.

[3]. Cystinuria and cystinosis are usually related to L-cystine: is this really the case for cystinosis? A physicochemical investigation at micrometre and nanometre scale. Comptes Rendus. Chimie, Volume 25 (2022) no. S1, pp. 489-502.

[4]. Cellular accumulation of L-cystine in rat kidney cortex in vivo. J Clin Invest. 1973 Feb;52(2):454-62.

[5]. Uptake of L-cystine via an ABC transporter contributes defense of oxidative stress in the L-cystine export-dependent manner in Escherichia coli. PLoS One. 2015 Apr 2;10(3):e0120619.

[6]. Fresh Medium or L-Cystine as an Effective Nrf2 Inducer for Cytoprotection in Cell Culture. Cells. 2023 Jan 12;12(2):291.

其他信息
在胱氨酸尿症(常染色体隐性遗传病)中,L-胱氨酸晶体呈现六方晶系形态,与其晶体结构(六方晶系,P6₁22空间群)一致。[3]
在胱氨酸病(溶酶体贮积症)中,异常沉积物此前被认为是纯L-胱氨酸,但实际上呈现矩形晶体形态。纳米尺度的物理化学研究(OPTIR、AFM-IR)表明,L-胱氨酸和L-半胱氨酸均存在,提示胱氨酸病与L-半胱氨酸的矩形晶体有关,这些晶体会发生相变转化为L-胱氨酸。[3]
在大肠杆菌中,Cys/CySS穿梭系统(YdeD输出蛋白和FliY-YecSC输入蛋白)向周质空间提供还原当量以清除H₂O₂,从而保护膜脂免受过氧化作用。两种转运蛋白均受H₂O₂诱导:ydeD(3.5倍)、fliY(2.5倍)、yecS和yecC(2倍)。[5] L-胱氨酸通过胱氨酸/谷氨酸反向转运蛋白(SLC7A11)进入细胞。这种摄取可被erastin和柳氮磺胺吡啶阻断。进入细胞后,L-胱氨酸被还原为L-半胱氨酸,用于GSH合成或蛋白质生成。[5][6] 新鲜的DMEM培养基(含0.2 mM L-胱氨酸)可诱导HeLa、HEK293、AC16和MCF7细胞中Nrf2蛋白的表达。单独使用L-胱氨酸可产生这种效应,而L-半胱氨酸、葡萄糖或谷氨酰胺则不能。 [6]
L-半胱氨酸是含硫氨基酸半胱氨酸的L-对映异构体。它可用作面粉处理剂、人体代谢产物、酿酒酵母代谢产物、小鼠代谢产物以及EC 1.2.1.11(天冬氨酸半醛脱氢酶)抑制剂。它是L-半胱氨酸的半胱氨酸衍生物,也是一种非蛋白质L-α-氨基酸。它是L-半胱氨酸阴离子的共轭酸。它是D-半胱氨酸的对映异构体。它是L-半胱氨酸两性离子的互变异构体。它是一种共价连接的二聚体,是由半胱氨酸氧化形成的非必需氨基酸。两个半胱氨酸分子通过二硫键连接形成半胱氨酸。L-半胱氨酸存在于大肠杆菌(K12菌株、MG1655菌株)中或由其产生。据报道,西班牙鼠尾草、大豆和其他一些具有相关数据的生物体中含有L-半胱氨酸。胱氨酸并非20种必需氨基酸之一。胱氨酸是一种含硫衍生物,由半胱氨酸的硫醇侧链氧化形成。它具有抗氧化特性,能够保护组织免受辐射和污染损伤,并延缓衰老过程。它还参与蛋白质合成。胱氨酸在骨组织和皮肤中的许多蛋白质中含量丰富,也存在于胰岛素和消化酶中,例如嗜铬原A、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶原。(NCI04)
胱氨酸是一种共价连接的二聚体,由半胱氨酸氧化形成,属于非必需氨基酸。两个半胱氨酸分子通过二硫键连接形成胱氨酸。
药物适应症
据称L-半胱氨酸具有抗炎特性,可以对抗多种毒素,并可能有助于治疗骨关节炎和类风湿性关节炎。在L-半胱氨酸获准用于治疗上述任何疾病之前,还需要进行更多研究。迄今为止的研究主要集中在动物模型上。
作用机制
在某些情况下,例如对乙酰氨基酚过量,肝脏中的谷胱甘肽会耗竭,使组织承受氧化应激,并导致细胞完整性丧失。L-半胱氨酸是合成谷胱甘肽的主要前体。
药效学
L-半胱氨酸是一种共价连接的二聚体,是由半胱氨酸氧化形成的非必需氨基酸。两个半胱氨酸分子通过二硫键连接形成胱氨酸。胱氨酸是尿液中天然存在的化学物质;当胱氨酸沉积在肾脏时,会形成结石(坚硬的矿物质沉积物)。胱氨酸是由两个半胱氨酸分子通过二硫键连接而成的化合物。胱氨酸对于维生素B6的正常利用至关重要,它还有助于烧伤和伤口的愈合,并能分解支气管炎和囊性纤维化等疾病中的粘液沉积。胱氨酸还有助于胰岛素向胰腺的供应,这对于碳水化合物和淀粉的吸收至关重要。它可以提高肺、肝、肾和骨髓中的谷胱甘肽水平,这可能通过减少老年斑等方式对身体产生抗衰老作用。
胱氨酸是一种天然存在的氨基酸,其CAS号为56-89-3。它对蛋白质中二硫键的形成至关重要。胱氨酸会在胱氨酸病患者的溶酶体中积聚。它被用于研究蛋白质结构和代谢。它是一种天然存在的化合物。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C6H12N2O4S2
分子量
240.29
精确质量
240.023
元素分析
C, 29.99; H, 5.03; N, 11.66; O, 26.63; S, 26.68
CAS号
56-89-3
相关CAS号
L-Cystine-d4;1192736-38-1;L-Cystine-34S2;113512-08-6;(S)-L-Cystine-15N2;L-Cystine-3,3'-13C2;2483736-13-4
PubChem CID
67678
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.6±0.1 g/cm3
沸点
468.2±45.0 °C at 760 mmHg
熔点
260-261ºC
闪点
237.0±28.7 °C
蒸汽压
0.0±2.5 mmHg at 25°C
折射率
1.653
LogP
1.23
tPSA
177.24
氢键供体(HBD)数目
4
氢键受体(HBA)数目
8
可旋转键数目(RBC)
7
重原子数目
14
分子复杂度/Complexity
192
定义原子立体中心数目
2
SMILES
C([C@@H](C(=O)O)N)SSC[C@@H](C(=O)O)N
InChi Key
LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N
InChi Code
InChI=1S/C6H12N2O4S2/c7-3(5(9)10)1-13-14-2-4(8)6(11)12/h3-4H,1-2,7-8H2,(H,9,10)(H,11,12)/t3-,4-/m0/s1
化学名
(2R)-2-amino-3-[[(2R)-2-amino-2-carboxyethyl]disulfanyl]propanoic acid
别名
NSC-13203; L-cystine; 56-89-3; L-Dicysteine; beta,beta'-Dithiodialanine; NSC 13203; Cystine
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
0.1 M NaOH : ~3.33 mg/mL (~13.86 mM)
0.1 M HCL : 2.5 mg/mL (~10.40 mM)
DMSO :< 1 mg/mL
H2O : < 0.1 mg/mL
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 4.1616 mL 20.8082 mL 41.6164 mL
5 mM 0.8323 mL 4.1616 mL 8.3233 mL
10 mM 0.4162 mL 2.0808 mL 4.1616 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

临床试验信息
NCT Number Recruitment interventions Conditions Sponsor/Collaborators Start Date Phases
NCT02910531 Active, not recruiting Dietary Supplement:
Alpha lipoic acid
Drug: Placebo
Cystinuria Thomas Chi, MD June 19, 2017 Phase 2
NCT04818034 Recruiting Drug:Dapagliflozin Cystinuria University of California,
San Francisco
May 2, 2025 Phase 2
NCT04126135 Recruiting Drug: Cytisine
Drug: Nicotine
Replacement Therapy
Nicotine Addiction Loma Linda University January 27, 2022 Phase 3
NCT05058859 Not yet recruiting Drug: Dapagliflozin Cystinuria University of California,
San Francisco
August 1, 2024 Phase 2
NCT06343272 Recruiting Dietary Supplement:
EAA supplementation
Advanced Gastrointestinal
Cancers
Fondazione IRCCS
Policlinico San
Matteo di Pavia
March 22, 2022 Not Applicable
生物数据图片
  • Putative CySS importer genes in E. coli. (A) ABC type CySS importer gene operon and the encoded protein constitution on the cytoplasmic membrane in Lactobacillus reuteri and the homologous counterpart in E. coli. (B) Symporter type CySS importer gene and the encoded protein constitution on the cytoplasmic membrane in Bacillus subtilis and the homologous counterpart in E. coli. The identities in amino acid sequences of homologous genes are indicated. CySS, cystine.[1]. PLoS One. 2015 Apr 2;10(3):e0120619.
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