DASPEI

别名: 2-[4-(二甲氨基)苯乙烯基]-1-乙基碘化吡啶
目录号: V50632 纯度: ≥98%
DASPEI 是一种基于苯乙烯的阳离子线粒体染料,具有较大的斯托克斯位移。
DASPEI CAS号: 3785-01-1
产品类别: New3
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
100mg
250mg
500mg
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产品描述
DASPEI 是一种阳离子苯乙烯基线粒体染料,具有较大的斯托克斯位移。DASPEI 的激发波长和发射波长分别为 550 nm 和 573 nm,具有较长的荧光寿命和较高的灵敏度。DASPEI 可用于活细胞中线粒体的染色,具有良好的标记性能,也可用于独立于神经元活动对突触前神经末梢进行染色。
DASPEI(2-[4-(二甲氨基)苯乙烯基]-1-乙基吡啶碘化物)是一种阳离子苯乙烯基染料,可用作线粒体活性染色剂,具有较大的斯托克斯位移(甲醇溶液中激发/发射波长为461/589 nm)。它可用于评估线粒体膜电位、细胞活力以及对突触前神经末梢进行染色,且染色过程不受神经元活动的影响。
生物活性&实验参考方法
靶点
DASPEI specifically targets and accumulates in mitochondria due to the negative membrane potential characteristic of these organelles. Once inside, it undergoes a conformational change that enhances its orange fluorescence. It is also used for labeling hair cells in larval zebrafish and several types of epithelial cells.
体外研究 (In Vitro)
使用指南 1. DASPEI 工作液成分 1.1 配制储存液。使用 10 mM DASPEI DMSO。注意:建议将 DASPEI 储存液分装后避光保存于 -20 °C 或 -80 °C。 1.2 工作液的配制 要配制 5–10 μM DASPEI 工作液,可使用预先配制的无血清细胞培养基或 PBS 稀释的储存液。注意:请在根据实际情况调整浓度后立即使用 DASPEI 工作液。 2. 悬浮细胞的制备和染色 2.1 离心细胞,加入 PBS,每次 5 分钟,重复洗涤两次。细胞密度为 1×10⁶/mL。 2.2 加入 1 mL DASPEI 工作液,静置 30 至 60 分钟。 2.3 以 400 g 离心 3–4 分钟,弃去上清液。 2.4 用PBS洗涤细胞两次,每次5分钟。2.5 将细胞重悬于1毫升PBS或无血清水中,并使用流式细胞仪或荧光显微镜进行观察。3. 基于黏附的细胞染色 3.1 将贴壁细胞培养在无菌盖玻片上。3.2 吸除多余细胞,并将盖玻片从培养基中取出。3.3 倒入100微升染料工作液,轻轻摇晃使所有细胞均被覆盖(相当于30微升)。3.4 吸除染料工作液,洗涤细胞两到三次,每次5分钟,并使用荧光显微镜进行观察。
在体外,DASPEI(50-200 uM)可将活细胞中的线粒体染成橙色荧光,从而可以观察线粒体的形态并评估线粒体膜电位。该染料的吸收速度相对较慢,且与膜电位相关。它能够检测缺氧和阿尔茨海默病细胞模型中线粒体膜电位的变化。在细胞活力研究中,DASPEI染色与毛细胞存活率相关。
体内研究 (In Vivo)
在活体实验中,DASPEI 用于标记斑马鱼幼体的毛细胞和两栖动物的机械感受器。它可用于透明生物体线粒体健康状况的活体成像。该染料通常不用作哺乳动物的治疗药物,而是作为神经发育研究的工具。
酶活实验
对于非细胞评估,将纯化的线粒体或具有特定膜电位的脂质体与 DASPEI(1-200 uM)在缓冲溶液中孵育。测量荧光强度(激发/发射波长 = 550/573 nm 或 461/589 nm)以确定膜电位与染料积累之间的关系。
细胞实验
对于基于细胞的检测,将细胞(例如 CHO 细胞、PC12 细胞、原代神经元)接种于 96 孔或 24 孔板中,并在 37°C 下用 DASPEI(50-200 uM)处理 15-60 分钟。洗涤后,使用荧光酶标仪或共聚焦显微镜测量荧光强度。对于细胞活力研究,可同时进行台盼蓝排除法或钙黄绿素-AM 染色。
动物实验
对于活体成像,将斑马鱼幼体(3-5日龄)在含有DASPEI(2-10 μM)的E3培养基中孵育30-60分钟,洗涤后麻醉。使用荧光立体显微镜或共聚焦显微镜对内耳毛细胞和侧线神经丘进行活体成像。
药代性质 (ADME/PK)
目前尚无DASPEI的药代动力学数据。作为一种亲脂性阳离子染料,DASPEI预计会迅速分布到线粒体含量高的组织(肝脏、肾脏、心脏)。该染料在线粒体内积聚,并具有较长的体内滞留时间。目前尚未发表正式的药代动力学研究。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
DASPEI的毒性数据有限。在工作浓度(2-200 μM)下,DASPEI通常被认为对短期活细胞成像无毒。长时间暴露或高浓度可能诱发线粒体功能障碍或光毒性。目前尚无LD50值或正式的毒理学研究数据。
参考文献

[1]. Leise EM. Selective retention of the fluorescent dye DASPEI in a larval gastropod mollusc after paraformaldehyde fixation. Microsc Res Tech. 1996 Apr 15;33(6):496-500.

[2]. E M Leise. Selective retention of the fluorescent dye DASPEI in a larval gastropod mollusc after paraformaldehyde fixation. Microsc Res Tech. 1996 Apr 15;33(6):496-500.

其他信息
2-(4-二甲氨基苯乙烯基)-1-乙基吡啶碘化物是一种花菁染料和有机碘化物盐。它含有2-(4-二甲氨基苯乙烯基)-1-乙基吡啶鎓。
DASPEI 是一种研究级荧光探针,并非治疗药物。它广泛应用于细胞生物学和神经生物学领域,用于线粒体和突触前末端的染色。其较大的斯托克斯位移可减少自身猝灭,并实现多重成像。DASPEI 尚未获准用于人体,也未注册任何临床试验。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C17H21N2+.I-
分子量
380.26604
精确质量
380.075
CAS号
3785-01-1
相关CAS号
42457-53-4 (Parent)
PubChem CID
5713123
外观&性状
Purple to purplish red solid powder
熔点
267ºC (dec.)(lit.)
LogP
0.234
tPSA
7.12
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
2
可旋转键数目(RBC)
4
重原子数目
20
分子复杂度/Complexity
277
定义原子立体中心数目
0
SMILES
CC[N+]1=CC=CC=C1/C=C/C2=CC=C(C=C2)N(C)C.[I-]
InChi Key
AMAXNNVXIBDEMV-UHFFFAOYSA-M
InChi Code
InChI=1S/C17H21N2.HI/c1-4-19-14-6-5-7-17(19)13-10-15-8-11-16(12-9-15)18(2)3;/h5-14H,4H2,1-3H3;1H/q+1;/p-1
化学名
4-[(E)-2-(1-ethylpyridin-1-ium-2-yl)ethenyl]-N,N-dimethylaniline;iodide
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~41.67 mg/mL (~109.58 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.6297 mL 13.1486 mL 26.2971 mL
5 mM 0.5259 mL 2.6297 mL 5.2594 mL
10 mM 0.2630 mL 1.3149 mL 2.6297 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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