| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Antibody lysine residues (via NHS ester); azide-functionalized molecules (via DBCO for SPAAC); the disulfide bond is cleaved intracellularly by reducing agents (e.g., glutathione).
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| 体外研究 (In Vitro) |
ADC 细胞毒素通过 ADC 连接器与抗体连接，形成 ADC [1]。
DBCO-CONH-SS-NHS酯是一种可裂解的ADC连接子，它整合了DBCO点击化学基团、二硫键和NHS酯基团。这种组合实现了抗体药物偶联物（ADC）的位点特异性偶联和可控的有效载荷释放。DBCO部分以生物正交的方式与叠氮基团结合，在保持天然生物过程的同时，促进快速选择性偶联。该方法对于构建靶向药物递送系统和诊断检测至关重要。NHS酯基团选择性地与抗体上的伯胺反应，从而实现体外和体内的高效标记和追踪，这对于研究蛋白质在细胞微环境中的动力学、相互作用和定位至关重要。二硫键提供了一种在还原条件下（例如，细胞质中高浓度的谷胱甘肽）控制细胞内药物释放的机制。蛋白质可以标记荧光染料或其他标签，从而拓展出多种成像应用。该连接子本身不具有生物活性。它的功能纯粹是结构性的。 |
| 酶活实验 |
磺基-SPDB是一种化学试剂，而非生物活性化合物，其表征主要通过化学方法而非酶/受体分析进行。HPLC确认其纯度（>95%）。¹H NMR光谱验证了其结构，显示了NHS酯（δ ~2.8 ppm）、吡啶二硫基（吡啶芳香质子δ ~7.2-8.5 ppm）和磺酸基（δ ~3.0-4.0 ppm）的特征信号。质谱(MS)确认其分子量为406.44。NHS酯基团的反应活性和特异性通过与模型伯胺（例如苄胺）在缓冲液（例如PBS，pH 7.4）中反应，并利用LC-MS监测反应物随时间的减少来测试；NHS酯在水性缓冲液中的半衰期通常为1-2小时。吡啶二硫代基团的含量通过硫醇释放试验进行定量：化合物与还原剂（例如二硫苏糖醇，DTT）反应，还原剂还原二硫键，释放出在 343 nm 处有吸收的 2-硫代吡啶酮；浓度使用消光系数 (ε343 = 8,080 M-¹cm-¹) 计算。对于抗体偶联，首先在 pH 8.0 下使 NHS 酯与抗体赖氨酸反应，制备模型抗体药物偶联物 (ADC)，然后还原抗体链间二硫键生成游离硫醇，最后与吡啶二硫代基团反应。偶联效率通过 SEC-HPLC 评估，药物抗体比 (DAR) 通过疏水相互作用色谱 (HIC-HPLC) 或 LC-MS 测定。
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| 细胞实验 |
DBCO-CONH-SS-NHS酯是一种用于合成抗体药物偶联物（ADC）和其他生物偶联物的化学连接剂；它不直接用于基于细胞的检测。最终的ADC或生物偶联物需在基于细胞的检测中进行测试。典型的ADC细胞检测包括对抗原阳性细胞和抗原阴性细胞进行ADC活性测试。将靶细胞以每孔5×10³个细胞的密度接种于96孔板中。加入不同浓度的ADC（通常根据抗体浓度为0.001-100 nM），并孵育72-120小时。使用CellTiter-Glo或MTT法检测细胞活力。计算抗原阳性细胞的IC50值。为了验证二硫键的作用（可裂解机制），可在还原剂（如谷胱甘肽，10 mM）存在下进行检测以增强有效载荷的释放，或在内吞抑制剂（如dynasore）存在下进行检测以阻断活性。对于基于DBCO的点击化学应用，可先用叠氮功能化探针处理细胞，然后加入与荧光团偶联的DBCO-CONH-SS-NHS酯，并通过共聚焦显微镜或流式细胞术观察标记情况。二硫键可被还原剂裂解以释放荧光团。
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| 动物实验 |
DBCO-CONH-SS-NHS酯不直接用于动物研究。最终的抗体药物偶联物（ADC）或偶联物需进行体内测试。使用该连接子构建的ADC的典型体内实验方案采用小鼠异种移植模型。将5-10×10⁶个抗原阳性肿瘤细胞悬浮于PBS中，并与Matrigel以1:1的比例混合，皮下注射至雌性无胸腺裸鼠体内。当肿瘤体积达到100-200 mm³时，将小鼠随机分为治疗组（n=8-10）。将ADC配制于PBS或合适的载体中，并通过尾静脉注射（iv），剂量为1-10 mg/kg（基于抗体含量）。对照组仅注射载体或非靶向ADC。每3-4天用游标卡尺测量肿瘤体积，并记录体重。通常每周给药一次，持续2-4周。研究结束后，切除肿瘤，称重，并分析靶蛋白表达和有效载荷释放情况。对于成像应用，可将与成像剂（例如近红外染料）偶联的DBCO-CONH-SS-NHS酯注射到携带表达叠氮标记靶向部分的肿瘤的小鼠体内；点击反应在体内发生，并使用体内成像系统（IVIS）可视化信号。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
DBCO-CONH-SS-NHS酯是一种可裂解的连接子，其药代动力学研究是作为完整的抗体药物偶联物（ADC）或偶联物的一部分进行的。该连接子本身不作为独立实体给药。对于ADC而言，其药代动力学特征主要由抗体部分决定，连接子则影响其稳定性和有效载荷的释放。ADC的药代动力学通常为双相，包括分布相（α相）和末端消除相（β相），基于IgG的ADC的半衰期为4-7天。循环中二硫键的稳定性通过液相色谱-质谱联用（LC-MS）测定血浆中完整ADC与释放的有效载荷浓度随时间的变化来评估。体外血浆稳定性试验：将ADC加入人或小鼠血浆中，在37℃下孵育长达14天，并在多个时间点取样进行分析。DBCO基团在生物体液中稳定。对于小分子偶联物，DBCO基团可与内源性叠氮化物反应或被还原；然而，SPAAC反应具有高度选择性。NHS酯在偶联过程中会发生水解或反应，最终不会出现在偶联产物中。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
DBCO-CONH-SS-NHS酯是一种用于研究的化学连接剂；其毒性评估针对的是完整的抗体药物偶联物（ADC）或偶联物，而非单独的连接剂。对于ADC而言，主要的剂量限制性毒性通常与细胞毒性有效载荷有关（例如，中性粒细胞减少症、周围神经病变、血小板减少症）。二硫键有助于提高安全性，因为它能够使有效载荷靶向释放到肿瘤内部，从而降低全身毒性。在循环系统中过早断裂会增加毒性。DBCO基团被认为是无毒且稳定的。实验室操作时，应按照标准化学安全防护措施处理DBCO-CONH-SS-NHS酯：佩戴手套、实验服和护目镜。NHS酯可与胺类物质（包括皮肤和黏膜中的胺类物质）发生反应，可能引起刺激和致敏。避免吸入和皮肤接触。该化合物应在惰性气氛（氩气或氮气）下于-20℃保存，以防止NHS酯水解和二硫键氧化。溶液应新鲜配制并立即使用。该化合物不适用于人类。目前尚无该特定连接体的详细毒理学数据（LD50、遗传毒性等）。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
DBCO-CONH-SS-NHS酯是一种用途广泛的可裂解连接子，广泛应用于抗体药物偶联物（ADC）、生物偶联物和成像探针的合成。它通过DBCO-SPAAC反应实现无铜点击化学，该反应具有高选择性和快速性，二级反应速率常数高达1 M⁻¹s⁻¹。二硫键允许在还原性环境中（例如，细胞内谷胱甘肽浓度约为1-10 mM，而血浆浓度约为2-20 μM）控制有效载荷的释放。NHS酯用于与抗体、蛋白质或肽上的伯胺基团偶联。该连接子属于不断增长的“可裂解”ADC连接子类别，该类别还包括蛋白酶可裂解连接子（Val-Cit）和pH敏感连接子（腙）。本产品仅供研发用途，不得用于人体治疗。该化合物应储存在-20℃的干燥避光环境中。二硫键易被含硫醇化合物还原；避免与还原剂（如 DTT、TCEP 或 β-巯基乙醇）一起储存。
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| 分子式 |
C28H27N3O6S2
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|---|---|
| 分子量 |
565.660484552383
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| 精确质量 |
565.134
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| CAS号 |
1435934-53-4
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| PubChem CID |
98233194
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| LogP |
1.7
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| tPSA |
164
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
12
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| 重原子数目 |
39
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| 分子复杂度/Complexity |
992
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
S(CCNC(CCC(N1C2C=CC=CC=2C#CC2C=CC=CC=2C1)=O)=O)SCCC(=O)ON1C(CCC1=O)=O
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| InChi Key |
RPNGUSKTYYIUDE-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C28H27N3O6S2/c32-24(29-16-18-39-38-17-15-28(36)37-31-26(34)13-14-27(31)35)11-12-25(33)30-19-22-7-2-1-5-20(22)9-10-21-6-3-4-8-23(21)30/h1-8H,11-19H2,(H,29,32)
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| 化学名 |
(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-[2-[[4-(2-azatricyclo[10.4.0.04,9]hexadeca-1(16),4,6,8,12,14-hexaen-10-yn-2-yl)-4-oxobutanoyl]amino]ethyldisulfanyl]propanoate
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| 别名 |
DBCOCONHSSNHS ester; DBCO CONH S S NHS ester
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~176.78 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7678 mL | 8.8392 mL | 17.6785 mL | |
| 5 mM | 0.3536 mL | 1.7678 mL | 3.5357 mL | |
| 10 mM | 0.1768 mL | 0.8839 mL | 1.7678 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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