| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 500mg |
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| 靶点 |
This compound functions as an ADC linker; the DBCO group binds to azides, the aldehyde binds to aminooxy/hydrazine groups, and the disulfide bond is cleaved by intracellular reducing agents.
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| 体外研究 (In Vitro) |
ADC 由抗体和 ADC 细胞毒素组成，它们通过 ADC 连接子连接在一起[1]。
DBCO-SS-醛是一种可裂解的ADC连接子，包含用于应变促进点击化学的DBCO基团和用于肟连接的醛基，支持多种稳定且用途广泛的抗体-药物偶联物（ADC）合成。DBCO基团是一种应变炔烃，可与叠氮基功能化的分子发生SPAAC（无铜点击化学）反应，无需铜催化剂即可实现快速且生物正交的偶联，这对于保持敏感生物分子的完整性至关重要。醛基可分别与肼基或氨氧基反应生成腙键或肟键。二硫键可在还原条件下（例如，高细胞内谷胱甘肽浓度）选择性、可控地释放有效载荷。该连接子是用于生物偶联的多功能化学连接子的一部分，可用于将药物分子偶联到抗体上。这种策略性连接使抗体药物偶联物（ADC）能够选择性地靶向并将细胞毒性药物递送至癌细胞，从而最大限度地减少对健康细胞的损伤，并提高癌症治疗的疗效。该连接子本身不具有生物活性。它广泛用于ADC的合成，以及蛋白质标记、表面功能化和诊断检测方法的开发。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
作为连接子，DBCO-SS-醛并非设计用于直接发挥体内活性。使用该连接子构建的抗体药物偶联物（ADC）的体内疗效取决于抗体的特异性和有效载荷的效力。二硫键提供了一种可裂解的机制，用于细胞内药物释放。SPAAC反应（DBCO-叠氮化物）具有高度选择性和快速性，可在体内进行，用于预靶向成像或治疗应用。醛基可用于与抗体或其他靶向配体偶联。二硫键在血液中（低谷胱甘肽浓度，~2-20 uM）稳定，但在细胞质（高谷胱甘肽浓度，~1-10 mM）和溶酶体的还原性环境中会被裂解。这确保了有效载荷主要在靶细胞内释放。在体内，使用二硫键连接子的ADC已在肿瘤模型中显示出疗效。 DBCO基团可能与生物叠氮化物发生一定的反应，但内源性叠氮化物的浓度极低，因此该反应具有高度特异性。连接子的体内稳定性和有效性针对每种抗体药物偶联物（ADC）进行了优化。
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| 酶活实验 |
作为一种化学连接剂，DBCO-SS-醛通过化学分析进行表征。其纯度（≥95%）经高效液相色谱（HPLC）确认。结构通过核磁共振氢谱（¹H NMR）和高分辨率质谱（HRMS）进行验证。¹H NMR（DMSO-d₆）谱图显示：DBCO芳香质子在δ 7.2-7.8 ppm处呈多重峰；醛基质子在δ ~9.8-10.0 ppm处呈单峰；亚甲基在δ 2.5-3.5 ppm处呈多重峰。分子量（565.66）经电喷雾质谱（ESI-MS）确认。DBCO基团的含量通过在室温下于PBS或DMSO中与标准叠氮化物（例如4-叠氮苯甲酸）反应来定量，监测DBCO峰的消失（210-250 nm紫外吸收或HPLC）。 SPAAC反应速度很快（k2 ~0.1-1 M-¹s-¹）。醛基含量可通过在酸性条件下与标准肼（例如2,4-二硝基苯肼，DNPH）反应来定量，生成腙，该腙可通过紫外-可见分光光度法进行定量（DNPH衍生物的吸光度在360-380 nm处）。二硫键含量可通过硫醇释放法进行定量：将化合物在缓冲液（例如0.1 M Tris-HCl，pH 8.0，含1 mM EDTA）中，用还原剂（例如DTT或TCEP）于37℃处理30-60分钟，生成两个硫醇基团。硫醇通过埃尔曼试剂（DTNB）进行定量，该试剂可产生黄色生色团（TNB），其在 412 nm 处有吸光度（ε=14,150 M-¹cm-¹）。
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| 细胞实验 |
作为连接子，DBCO-SS-醛不直接用于细胞实验。最终的偶联物（例如，抗体药物偶联物 (ADC)、荧光探针）需要进行测试。对于使用该连接子构建的 ADC，典型的细胞实验包括测试 ADC 对抗原阳性和抗原阴性肿瘤细胞的活性。将靶细胞以每孔 5×10³ 个细胞的密度接种于 96 孔板中，培养基中含有 10% 的胎牛血清 (FBS)。过夜贴壁后，加入不同浓度的 ADC（通常根据抗体含量为 0.001-100 nM），并孵育 72-120 小时。使用 CellTiter-Glo 或 MTT 法检测细胞活力。计算抗原阳性细胞的 IC50 值。为了验证二硫键的作用（可裂解机制），可以在还原剂（例如谷胱甘肽 (10 mM)）存在下进行实验以增强有效载荷的释放，或者在内吞抑制剂（例如 Dynasore）存在下进行实验以阻断活性。对于荧光标记，将叠氮基功能化的荧光团与连接子的DBCO基团进行点击反应，并将所得缀合物添加到细胞中。或者，醛基可以与氨氧基探针偶联。通过共聚焦显微镜研究摄取和定位。
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| 动物实验 |
将最终的偶联物（而非单独的连接子）给药给动物。使用DBCO-SS-醛构建的ADC的典型体内实验方案采用小鼠异种移植模型。将5-10×10⁶个抗原阳性肿瘤细胞皮下注射到雌性无胸腺裸鼠体内。当肿瘤体积达到100-200 mm³时，将小鼠随机分为治疗组（n=8-10）。将ADC配制在PBS中，并通过尾静脉以1-10 mg/kg的剂量（基于抗体含量）进行静脉注射。通常每周给药一次，持续2-4周。每2-3天用游标卡尺测量肿瘤体积，并记录体重。对于预靶向成像应用，首先注射抗体-叠氮化物偶联物，待其清除后，再注射DBCO-SS-醛探针（例如，DBCO-SS-醛-荧光团）；SPAAC反应在体内发生，并显示信号。肿瘤微环境因素（例如谷胱甘肽）可以还原二硫键，从而释放有效载荷或成像剂。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
最终抗体药物偶联物 (ADC) 的药代动力学 (PK) 取决于其整体，而非仅取决于连接子。对于以 DBCO-SS-醛构建的 ADC，其 PK 由抗体部分表征。DBCO 基团在循环中稳定，二硫键在血浆中也稳定（谷胱甘肽含量低）。分布容积 (Vd) 低，与血浆容积相似。清除率 (CL) 低，主要通过分解代谢。在小鼠体内，基于 IgG1 的 ADC 的半衰期通常为 4-7 天。血浆中的硫醇可以低速率还原二硫键，导致部分有效载荷释放。醛基通常与氨氧基/肼基偶联，在最终偶联物中不以游离醛的形式存在。对于预靶向应用，小分子探针（例如，DBCO-SS-醛-荧光团）的药代动力学迅速：半衰期短（数分钟至数小时），经肾脏快速清除。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
评估的是最终抗体药物偶联物（ADC）的毒性，而非连接子的毒性。对于使用二硫键连接子构建的ADC，循环中过早断裂可能导致脱靶毒性。DBCO基团具有良好的生物相容性。实验室操作DBCO-SS-醛时，应采取标准化学安全防护措施：佩戴手套、实验服和护目镜。醛基可能刺激皮肤和眼睛。避免吸入。该化合物仅供研究使用。在-20℃干燥、避光、惰性气氛下储存，以防止二硫键氧化。避免与还原剂共存。
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| 参考文献 |
[1]. Beck A, et al. Strategies and challenges for the next generation of antibody-drug conjugates. Nat Rev Drug Discov. 2017 May;16(5):315-337.
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| 其他信息 |
DBCO-SS-醛是一种可裂解的ADC连接剂，用于合成抗体药物偶联物（ADC）。它也是一种点击化学试剂，含有一个用于无铜SPAAC反应的DBCO基团和一个用于肟/腙连接的醛基。二硫键可在还原条件下实现药物的控释。DBCO-SS-醛是一种用途广泛的化学连接剂，可用于生物偶联，在分子与蛋白质、肽或其他生物分子的结合中发挥着关键作用。其应用包括抗体药物偶联物、蛋白质标记、点击化学和功能性生物材料。它能够对各种生物学研究中的蛋白质进行精确的可视化、追踪和定量分析。该化合物仅供研究使用，不得用于人体治疗。应在-20℃干燥避光保存。
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| 分子式 |
C??H??N?O?S?
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|---|---|
| 分子量 |
571.71
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 别名 |
DBCOSSaldehyde; DBCO SS aldehyde
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7491 mL | 8.7457 mL | 17.4914 mL | |
| 5 mM | 0.3498 mL | 1.7491 mL | 3.4983 mL | |
| 10 mM | 0.1749 mL | 0.8746 mL | 1.7491 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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