Di-8-ANEPPS

别名: 4-(2-[6-(二辛基氨基)-2-萘烯基]乙烯基)-1-(3-硫代丙基)吡啶内盐;4-[2-[6-(二辛基氨基)-2-萘基]乙烯基]-1-(3-磺基丙基)吡啶鎓内盐;膜电位荧光探针DI-8-ANEPPS
目录号: V32583 纯度: ≥98%
Di-8-ANEPPS 是基于萘基苯乙烯的电压敏感染料,其荧光激发和发射光谱随电压变化而变化。
Di-8-ANEPPS CAS号: 157134-53-7
产品类别: New2
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1mg
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产品描述
Di-8-ANEPPS 是一种基于萘基苯乙烯的电压敏感染料,其荧光激发和发射光谱会随着电压的变化而变化。
Di-8-ANEPPS(CAS 157134-53-7)是一种高亲脂性、电压敏感的荧光染料,属于萘苯乙烯(ANEP)家族的快速响应膜电位染料。其分子式为C36H52N2O3S,分子量为592.9,广泛用于监测活细胞和组织中的膜电位。Di-8-ANEPPS在水中不发荧光,但与脂质双层结合后会发出强烈的荧光,其激发/发射最大值分别约为467 nm和631 nm。与Di-4-ANEPPS相比,Di-8-ANEPPS具有更长的碳链尾部,使其能够更稳定地存在于细胞膜的外层,从而适用于长时间电压检测实验。
生物活性&实验参考方法
靶点
Cell membrane lipid bilayer and transmembrane voltage. Di-8-ANEPPS is a voltage-sensitive fluorescent dye that incorporates into cell membranes and exhibits changes in fluorescence in response to membrane potential variations. The dye is not fluorescent in water, but when bound to the lipid bilayer, it becomes strongly fluorescent. Its fluorescence excitation and emission spectra change in response to changes in voltage, with an optical response fast enough to detect transient membrane potential changes in excitable cells.
体外研究 (In Vitro)
用Di-8-ANEPPS染色的鼠细胞暴露于电压钳脉冲,并浸入含Na+的溶液中。Di-8-ANEPPS信号通常反映系统电压,在施加去极化脉冲时会出现不对称的正分量。这被认为反映了从电压钳制的质膜中逸出的动作电位的传播。其时间特征与“中心”信号无异。值得注意的是,信号峰值出现在去极化脉冲前沿之后0.3毫秒[1]。
在体外,Di-8-ANEPPS 可用于无创测量活细胞的跨膜电压。该染料的激发光谱会随膜电位变化而发生偏移,每 100 mV 膜电位变化,荧光强度变化 2-10%。它广泛用于监测神经元和心肌细胞等可兴奋细胞的快速膜电位变化。Di-8-ANEPPS 信号通常反映系统电压,在施加去极化脉冲时会出现不对称的正向分量。与 Di-4-ANEPPS 相比,Di-8-ANEPPS 具有更长的碳链尾部,因此在长时间实验中更加稳定。
体内研究 (In Vivo)
在体内,Di-8-ANEPPS 用于监测组织和整个生物体的膜电位。该染料可应用于暴露的组织或加载到细胞中,用于活体电活动成像。它被用于研究心脏电生理、神经元活动以及其他涉及膜电位变化的生理过程。其快速的响应动力学使其适用于检测动作电位和其他瞬态电事件。
酶活实验
Di-8-ANEPPS 的体外荧光检测方法测量电压依赖性荧光变化。该染料溶解于 DMSO 或乙醇中,并以 1-10 uM 的浓度添加到细胞培养物或膜制备物中。细胞在 467 nm 处激发,并在 631 nm 处测量发射光。通过添加离子载体(例如缬氨霉素)或电刺激诱导膜电位变化。使用荧光显微镜、酶标仪或电生理装置记录荧光信号。
细胞实验
使用 Di-8-ANEPPS 的体外细胞检测方法适用于培养的神经元、心肌细胞或其他可兴奋细胞。将细胞置于含有 1-10 μM Di-8-ANEPPS 的缓冲液中,于 37℃ 孵育 15-30 分钟,使细胞加载染料。洗涤后,将细胞置于显微镜载物台上,并进行电刺激或化学刺激。使用高速摄像机或光电倍增管记录荧光变化。该染料的快速响应动力学使其能够检测动作电位和其他瞬态事件。
动物实验
Di-8-ANEPPS 已在多种模式生物中开展体内动物研究。该染料可局部应用于暴露组织(例如心脏、大脑),或进行静脉注射。利用高速摄像机和相应的激发/发射滤光片进行膜电位光学映射。该染料可用于研究心律失常、神经元网络活动和其他电生理现象。
药代性质 (ADME/PK)
Di-8-ANEPPS 的药代动力学性质具有亲脂性荧光染料的特征。该化合物分子量为 592.9,分子式为 C36H52N2O3S,可溶于 DMF(2 mg/mL)、DMSO(2 mg/mL)和乙醇(100 μg/mL)。它以结晶固体的形式储存在 -20℃。该染料的激发波长最大值分别为 208、253、320 和 501 nm,发射波长为 631 nm。作为一种研究用染料,通常不进行药代动力学研究。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
Di-8-ANEPPS 仅供研究用途,不可用于人体治疗。处理化学品时应遵守标准安全预防措施。该化合物未获准用于临床。
参考文献

[1]. Confocal imaging of transmembrane voltage by SEER of di-8-ANEPPS. J Gen Physiol. 2013 Mar;141(3):371-87.

其他信息
Di-8-ANEPPS 是一种研究级电压敏感荧光染料,用于监测活细胞和组织中的膜电位。它是一种萘基苯乙烯类染料,分子式为 C36H52N2O3S,分子量为 592.9。该染料与脂质双层结合时,其激发/发射波长最大值约为 467/631 nm。它广泛用于监测可兴奋细胞中膜电位的快速变化。尚未获准用于临床。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C36H52N2O3S
分子量
592.87468
精确质量
592.37
CAS号
157134-53-7
PubChem CID
6508718
外观&性状
Brown to red solid powder
LogP
9.841
tPSA
72.7
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
4
可旋转键数目(RBC)
20
重原子数目
42
分子复杂度/Complexity
789
定义原子立体中心数目
0
SMILES
CCCCCCCCN(CCCCCCCC)C1=CC2=C(C=C1)C=C(C=C2)/C=C/C3=CC=[N+](C=C3)CCCS(=O)(=O)[O-]
InChi Key
IXFSUSNUALIXLU-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C36H52N2O3S/c1-3-5-7-9-11-13-25-38(26-14-12-10-8-6-4-2)36-21-20-34-30-33(18-19-35(34)31-36)17-16-32-22-27-37(28-23-32)24-15-29-42(39,40)41/h16-23,27-28,30-31H,3-15,24-26,29H2,1-2H3
化学名
3-[4-[(E)-2-[6-(dioctylamino)naphthalen-2-yl]ethenyl]pyridin-1-ium-1-yl]propane-1-sulfonate
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。  (2). 该产品在溶液状态不稳定,请现配现用。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~1 mg/mL (~1.69 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.6867 mL 8.4336 mL 16.8671 mL
5 mM 0.3373 mL 1.6867 mL 3.3734 mL
10 mM 0.1687 mL 0.8434 mL 1.6867 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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