| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 5mg | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
mGluR/metabotropic glutamate receptor; phosphoserine phosphatase
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
DL-AP3可通过控制神经元活力和凋亡来减轻OGD引起的损伤。此外，DL-AP3对神经元的保护作用可能与p-Akt1和细胞色素C蛋白的表达有关。该研究可能为DL-AP3在治疗脑梗死中的应用提供理论依据。然而，DL-AP3是否可用于临床治疗脑梗死仍需要在体内模型中进行长期研究。[1]
脑梗死是一种缺血性卒中，是造成不可逆脑损伤的主要原因之一。尽管最近已经研究了多种神经保护剂，但DL-2-氨基-3-膦酰基丙酸（DL-AP3）在治疗氧糖剥夺（OGD）诱导的神经元损伤方面的潜力尚未明确。本研究旨在探讨DL-AP3在原代神经元细胞培养中的作用。原代神经元分为四组：（1）未治疗的对照组；（2）DL-AP3组用10μMDL-AP3处理；（3）OGD组，神经元在OGD条件下培养；（4）OGD+DL-AP3组，首先建立OGD模型，然后用10μM的DL-AP3处理细胞。使用细胞计数试剂盒-8和流式细胞术测量神经元活力和凋亡。Western blot检测磷酸化Akt1（p-Akt1）和细胞色素c的表达。结果表明，DL-AP3不影响DL-AP3组神经元的存活率和凋亡，也不改变p-Akt1和细胞色素c的表达（p>0.05）。在OGD+DL-AP3组中，DL-AP3显著减弱了OGD对神经元存活率的抑制作用（p<0.001），并减少了OGD诱导的凋亡（p<0.01）。此外，经DL-AP3处理后，OGD诱导的p-Akt1下调和细胞色素c上调在一定程度上得到了恢复（p<0.05或p<0.001）。总体而言，DL-AP3可以通过影响神经元的存活率和凋亡，以及调节p-Akt1和细胞色素c的表达来保护原代神经元免受OGD诱导的损伤。[1] DL-AP3减轻OGD诱导的损伤[1] 为了探索DL-AP3在缺氧条件下对神经元的影响，神经元在OGD条件下培养，并用DL-AP3处理。DL-AP3组中DL-AP3不影响神经元存活率（p>0.05）。在OGD组中，OGD在24小时和72小时后显著降低了神经元存活率（p<0.001）。然而，在OGD+DL-AP3组中，DL-AP3显著减弱了OGD对神经元存活率的抑制作用（p<0.001）。所有组的细胞活力测定结果如图1A所示。[1] 在DL-AP3组中，DL-AP3对细胞凋亡没有显著影响（p>0.05）。然而，OGD显著增加了OGD组的凋亡细胞率（p<0.001），但这种作用在OGD+DL-AP3组中显著减弱（p<0.01）。四组细胞凋亡的结果如图1B所示。 DL-AP3通过调节p-Akt1和细胞色素C的表达，保护神经元免受OGD诱导的损伤[1] 为了进一步研究DL-AP3对OGD诱导的损伤作用的分子机制，测定了神经元中p-Akt1和细胞色素C的蛋白表达。在DL-AP3组中，DL-AP3没有改变p-Akt1和细胞色素C的蛋白质水平（p>0.05）。然而，OGD组显著下调了p-Akt1的水平（p<0.001），上调了细胞色素C的水平（p<0.001）。然而，DL-AP3显著恢复了OGD+DL-AP3组中p-Akt1水平的降低和细胞色素C的增加（分别为p<0.001和p<0.05）。图2A和B显示了四组中p-Akt1和细胞色素C蛋白表达的结果。 |
| 细胞实验 |
将原代神经元分为4组：（1）对照组，不进行任何处理；（2）DL-AP3组，用10 µM DL-AP3处理6小时；（3）OGD组，神经元在OGD条件下培养12小时；（4）OGD + DL-AP3组，先建立OGD模型，然后用10 µM DL-AP3处理细胞6小时。[1]
OGD模型的建立如前所述。简而言之，神经元用无葡萄糖的厄尔平衡盐溶液洗涤，然后放置在37°C下充满气体混合物（95%N2和5%CO2）的模块化培养箱中。为了终止OGD，神经元在正常条件下孵育。 细胞活力分析[1] 根据制造商的说明，使用细胞计数试剂盒-8测定神经元存活率。简而言之，收集四组的原代神经元，并将其接种在96孔板上，每孔2×103个细胞。孵育24-72小时后，向每个孔中加入20µL CCK-8，再孵育3小时。最后，用酶标仪在450nm波长下测量吸光度。 细胞凋亡分析[1] 根据制造商的说明，使用Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒进行细胞凋亡。简而言之，收集四组神经元，并将其重新悬浮在200µL含有10µL膜联蛋白-V-FITC的结合缓冲液中。在室温下黑暗中孵育30分钟后，向每个样品中加入300µL磷酸缓冲盐水和5µL碘化丙啶溶液，然后使用流式细胞术分析凋亡细胞。 蛋白质印迹分析[1] 收集四组细胞，并在裂解缓冲液中裂解。根据手册，使用BCA蛋白检测试剂盒测定上清液的蛋白质浓度。使用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分离等量的蛋白质，并将其转移到聚偏二氟乙烯膜上。然后，在4°C下用一抗对膜进行染色：p-Akt1（1:1000，ab66138）、细胞色素C（1:5000；ab133504）或肌动蛋白（1:1000；ab1801）过夜。随后，将印迹与辣根过氧化物酶偶联的二抗在室温下孵育1小时。使用增强化学发光检测试剂盒对条带进行可视化，并使用Image Lab软件对数据进行分析。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
2-amino-3-phosphonopropanoic acid is a non-proteinogenc alpha-amino acid that is alanine in which one of the hydrogens of the terminal methyl group has been replaced by a dihydroxy(oxido)-lambda(5)-phosphanyl group. It has a role as a metabotropic glutamate receptor antagonist and a human metabolite. It is a non-proteinogenic alpha-amino acid, a member of phosphonic acids and an alanine derivative.
1-Amino-propan-2-one-3-phosphate is a metabolite found in or produced by Escherichia coli (strain K12, MG1655). In this study, we found that DL-AP3 could recover the down-regulation effects of OGD on the protein expression of p-Akt1 and could suppress the release of cytochrome C induced by OGD. These findings imply that the possible mechanism of DL-AP3 in protecting neurons from injury might be via up-regulating the expression of p-Akt1 and suppressing the release of cytochrome C. Our results demonstrated that DL-AP3 could attenuate OGD-induced injury by controlling neuronal viability and apoptosis. In addition, the protective effects of DL-AP3 on neurons might be associated with the expression of p-Akt1 and cytochrome C proteins. Our study may provide a theoretical basis for the possible application of DL-AP3 in treating cerebral infarction. However, whether DL-AP3 can be used in clinical treatment of cerebral infarction still requires long-term investigations in in vivo models. [1] |
| 分子式 |
C3H8NO5P
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|---|---|
| 分子量 |
169.0728
|
| 精确质量 |
169.014
|
| 元素分析 |
C, 21.31; H, 4.77; N, 8.28; O, 47.31; P, 18.32
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| CAS号 |
20263-06-3
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| PubChem CID |
3857
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| 密度 |
1.763 g/cm3
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| 沸点 |
481.6ºC at 760 mmHg
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| 熔点 |
227-229 °C(lit.)
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| 闪点 |
245.1ºC
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| 蒸汽压 |
1.34E-10mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.558
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| LogP |
-5.2
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| tPSA |
130.66
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
10
|
| 分子复杂度/Complexity |
174
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
P(CC(C(O)=O)N)(O)(O)=O
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| InChi Key |
LBTABPSJONFLPO-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C3H8NO5P/c4-2(3(5)6)1-10(7,8)9/h2H,1,4H2,(H,5,6)(H2,7,8,9)
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| 化学名 |
2-amino-3-phosphonopropanoic acid
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| 别名 |
DL-AP-3; DL-AP3;DL-AP 3; AP3; 5652-28-8; 2-amino-3-phosphonopropanoic acid; 2-Amino-3-phosphonopropionic acid; 3-phosphonoalanine; Phosphonoalanine; DL-2-Amino-3-phosphonopropionic acid; 2-Amino-3-phosprop; ...; 20263-06-3; AP 3; AP-3
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 5.9147 mL | 29.5735 mL | 59.1471 mL | |
| 5 mM | 1.1829 mL | 5.9147 mL | 11.8294 mL | |
| 10 mM | 0.5915 mL | 2.9574 mL | 5.9147 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
SARS-CoV-2 3CLpro-IN-20
布罗福韦酯
月桂酸
京尼平龙胆双糖苷
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