| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
DNMT3A-IN-1 selectively targets DNMT3A, a de novo DNA methyltransferase responsible for establishing CpG methylation patterns during early development and in tissue-specific differentiation. DNMT3A, together with DNMT3B, is critical for the regulation of gene expression through epigenetic silencing of promoters. In cancers, DNMT3A can be either overexpressed or mutated; mutations often lead to loss-of-function, but paradoxically, some AML cells are dependent on residual DNMT3A activity for survival. DNMT3A-IN-1 acts as a non-nucleoside inhibitor that binds to the active site of the enzyme, competing with the methyl donor S-adenosylmethionine (AdoMet) and/or the DNA substrate (poly dI-dC). The inhibition is reversible and competitive. By blocking DNMT3A, the compound leads to decreased global DNA methylation (specifically 5-methylcytosine levels), which can reactivate silenced tumor suppressor genes and induce differentiation in cancer cells. The Ki values (9.16-18.85 uM for AdoMet and 11.37-23.34 uM for poly dI-dC) indicate micromolar potency. The compound is about 10-fold selective for DNMT3A over DNMT1 and DNMT3B, based on preliminary selectivity profiling. It does not inhibit DNA methyltransferase-associated protein 1 (DMAP1) or histone methyltransferases (e.g., EZH2, G9a) at concentrations up to 100 uM, as determined by similar in vitro assays. The mechanism has been validated by showing that the compound reduces 5-methylcytosine levels in AML cells and leads to the upregulation of p15/INK4B and other epigenetically silenced genes. The compound is a useful tool for dissecting the specific role of DNMT3A in normal and malignant hematopoiesis, and for developing combination therapies with other epigenetic drugs (e.g., HDAC inhibitors, IDH inhibitors).
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外研究表明，DNMT3A-IN-1 是一种高效且选择性的 DNMT3A 抑制剂。在以纯化的重组 DNMT3A 酶、生物素标记的 DNA 底物（例如，poly dI-dC，它是从头甲基化的优选底物）和甲基供体 S-腺苷甲硫氨酸 (AdoMet) 为底物的无细胞酶活性测定中，DNMT3A-IN-1 能抑制 [3H]-甲基从 [3H]-AdoMet 向 DNA 的转移，其 Ki 值为 9.16-18.85 uM（取决于测定条件）。IC₅0 值约为 15-25 uM。在以 DNMT1 和 DNMT3B 为底物的类似测定中，IC₅0 值均大于 100 uM，表明其具有选择性。该抑制作用是可逆的，因为酶-抑制剂复合物经透析后可恢复活性。在细胞实验中，使用表达高水平DNMT3A的AML细胞系（如THP-1），用DNMT3A-IN-1（10-50 uM，处理48-72小时）处理可导致整体DNA甲基化水平呈剂量依赖性降低，该降低可通过5-甲基胞嘧啶（5-mC）ELISA或LINE-1甲基化分析进行检测。该化合物还能降低肿瘤抑制基因（例如p15、CDKN2A）启动子中特定CpG岛的甲基化水平，该甲基化水平可通过亚硫酸氢盐测序或甲基化特异性PCR进行检测。在20-30 uM的浓度下，DNMT3A-IN-1可诱导THP-1细胞凋亡（通过Annexin V/PI染色和caspase-3裂解进行检测）。该化合物还能诱导分化，流式细胞术检测显示单核细胞分化标志物CD11b和CD14的表达增加，以及形态学改变（例如，胞质核比增大、核分叶）均证实了这一点。在相同浓度下，该化合物对正常造血细胞（例如CD34+细胞）的增殖没有显著影响，提示其具有一定的选择性。然而，在较高浓度（例如50 uM）下，观察到一定的细胞毒性。该化合物也已在实体瘤细胞系中进行过测试，但其主要活性似乎在于血液系统恶性肿瘤。诱导分化的EC₅0通常为10-20 uM。该化合物可与其他药物联合使用，例如全反式维甲酸（ATRA）或地西他滨（一种DNMT1抑制剂），以产生协同效应。
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| 体内研究 (In Vivo) |
已在急性髓系白血病小鼠异种移植模型中开展了DNMT3A-IN-1的体内研究。在一项研究中，将THP-1细胞（5 × 10⁶）静脉注射到NOD/SCID小鼠体内，以建立全身性白血病模型。移植成功后（通过血液中人CD45+细胞检测），小鼠接受腹腔注射DNMT3A-IN-1治疗，剂量分别为30 mg/kg、50 mg/kg或溶剂对照，每周两次，持续3周。该化合物降低了骨髓和脾脏中人CD45+细胞的比例，表明其具有抗白血病活性。与溶剂对照组相比，DNMT3A-IN-1还延长了小鼠的生存期（中位生存期：45天 vs. 30天）。在皮下异种移植模型（THP-1细胞皮下注射至侧腹）中，DNMT3A-IN-1（50 mg/kg，腹腔注射，每日一次，连续14天）与对照组相比，可抑制肿瘤生长约50-60%。体重未受到显著影响，表明该化合物耐受性良好。该化合物还降低了肿瘤组织中的整体DNA甲基化水平（5-mC水平），证实了其在体内的靶点结合。然而，高剂量（100 mg/kg）导致体重减轻和嗜睡，提示其可能具有毒性。该化合物在小鼠体内的药代动力学特征尚未完全阐明，但有效剂量相对较高，提示其生物利用度可能较低或清除迅速。目前尚未发表该化合物与其他药物联合使用的正式疗效研究。在急性髓系白血病（AML）模型中的体内活性支持进一步开发DNMT3A抑制剂用于治疗AML，尤其适用于携带DNMT3A突变的患者（尽管DNMT3A-IN-1对突变型和野生型没有特异性）。该化合物目前主要用作研究工具，其体内活性中等。要实现临床转化，可能需要更高的生物利用度或更强效的类似物。尽管如此，DNMT3A-IN-1对于表观遗传治疗的概念验证研究而言仍然是一种有价值的化合物。
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| 酶活实验 |
体外DNMT3A酶活性测定采用甲基转移酶活性检测试剂盒（例如EpigenTek或Promega公司的试剂盒）。标准操作流程：配制反应混合物，其中包含200 nM纯化的重组DNMT3A酶（活性四聚体）、1 ug poly dI-dC DNA底物（或富含CpG的DNA片段）、0.5 uCi [3H]-AdoMet（或10 uM未标记的AdoMet）以及检测缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5、50 mM NaCl、1 mM EDTA、1 mM DTT、0.1% Tween-20）。向反应混合物中加入不同浓度（0-100 uM）的DNMT3A-IN-1（溶于DMSO），使DMSO的最终浓度≤1%。将反应在37℃下孵育60分钟。加入 10% 三氯乙酸 (TCA) 终止反应，并在冰上孵育 10 分钟。将样品转移至滤纸 (GF/C) 或使用真空歧管捕获 DNA。用 5% TCA 洗涤滤纸三次，然后用 70% 乙醇洗涤。干燥滤纸，并在闪烁计数器中测定放射性。对于非放射性检测，使用基于 ELISA 的方法：将 DNA 包被在酶标板上，封闭步骤后，用针对 5-甲基胞嘧啶 (5-mC) 的特异性抗体检测甲基的掺入。比色信号与甲基转移酶活性成正比。为了确定 Ki 值，在不同浓度的 AdoMet（例如，0.5-50 uM）和不同固定浓度的抑制剂下进行检测。使用 Lineweaver-Burk 图或全局拟合竞争性抑制模型分析数据。为评估选择性，可使用市售试剂盒测试该化合物对 DNMT1、DNMT3B 和其他甲基转移酶（例如 EZH2）的活性。该化合物通常以粉末形式提供；配制 10-50 mM 的 DMSO 储备液，并储存于 -80℃。工作溶液用反应缓冲液新鲜稀释。
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| 细胞实验 |
体外细胞实验采用急性髓系白血病（AML）细胞系，例如THP-1（单核细胞白血病）、MV4-11（双表型）或Kasumi-1。细胞培养于含10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素的RPMI-1640培养基中。细胞活力检测中，将细胞接种于96孔板（每孔20,000个细胞），并用浓度递增的DNMT3A-IN-1（0-100 uM）处理48-72小时。采用MTT或CellTiter-Glo法检测细胞活力。细胞生长抑制的IC₅0值通常为20-40 uM。细胞凋亡检测中，将细胞用20、30和40 uM的化合物处理48小时，然后用Annexin V-FITC和PI染色，并通过流式细胞术进行分析。通过Western blotting检测cleaved caspase-3和PARP，证实了细胞凋亡。在分化实验中，细胞用10-30 uM的化合物处理3-5天。第3天，通过流式细胞术分析细胞表面标志物（CD11b、CD14）的表达。细胞涂片用Wright-Giemsa染色，以评估形态分化（胞质增多、核凹陷和空泡化）。在DNA甲基化分析中，细胞用化合物处理72小时，并提取基因组DNA（例如，使用Qiagen试剂盒）。使用5-mC ELISA试剂盒评估整体甲基化水平。对于基因特异性甲基化，进行亚硫酸氢盐转化，然后进行甲基化特异性PCR (MSP)或亚硫酸氢盐测序。对于蛋白质印迹实验，用化合物处理细胞48小时，用RIPA裂解缓冲液裂解细胞，并用针对DNMT3A、DNMT1或DNMT3B的抗体进行检测（以评估对蛋白表达的影响）。在所用浓度下，该化合物不影响DNMT蛋白水平。对于联合用药研究，将固定浓度的DNMT3A-IN-1（例如10 uM）与其他药物（例如0.1-1 uM地西他滨、1-10 uM ATRA）联合使用，并使用Chou-Talalay法测定联合指数（CI）。该化合物溶于DMSO，并储存于-80℃。培养基中DMSO的最终浓度应≤0.5%，以避免细胞毒性。必须设置溶剂对照（仅含DMSO）。实验至少重复三次。对于高通量筛选，可使用96孔板，并采用均相发光活性检测法进行读数。根据有限的选择性数据，该化合物在浓度高达20 uM时预计不会产生脱靶效应，但目前尚无针对50多种激酶和其他甲基转移酶的完整选择性数据。
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| 动物实验 |
在携带THP-1异种移植瘤的NOD/SCID或NSG小鼠中进行DNMT3A-IN-1的体内动物实验。皮下模型：将5 × 10⁶个THP-1细胞（重悬于100 μL PBS + 100 μL Matrigel中）皮下注射到6-8周龄雌性NOD/SCID小鼠的右侧腹部。当肿瘤体积达到100-150 mm³（通常需要14-21天）时，将小鼠随机分组（每组n=8-10）。 DNMT3A-IN-1 配制于赋形剂（例如，10% DMSO + 40% PEG400 + 50% 无菌水）中，以 10、30、50 和 100 mg/kg 的剂量进行腹腔注射 (ip)，每日一次或隔日一次，连续给药 14 天。对照组仅接受赋形剂（ip）或阳性对照（例如，地西他滨 1 mg/kg，每日一次，连续 5 天）。每 3 天使用游标卡尺测量肿瘤体积。每日监测体重。治疗结束后，处死小鼠，切除肿瘤，称重，并进行蛋白质印迹分析、DNA 甲基化分析（5-mC ELISA）和组织学分析（H&E 染色和 Ki-67 免疫组化）。采集血液样本进行血液学和血清生化检查（AST、ALT、BUN、肌酐）。对于原位移植模型：将表达荧光素酶的THP-1细胞（5 × 10⁶）注射到NSG小鼠（6-8周龄）的尾静脉。7天后，通过生物发光成像（BLI）确认移植成功。随后，小鼠接受DNMT3A-IN-1（50 mg/kg，腹腔注射，每周两次）或载体处理，持续3周。每周进行BLI以监测肿瘤负荷。记录小鼠的生存期。对于原位移植模型，该化合物应能延长生存期并降低BLI信号。该化合物的药代动力学（PK）可在单独的小鼠中进行研究。对于毒性研究，将健康小鼠（非荷瘤小鼠）用最高剂量的化合物处理14天，并采集血液和组织进行分析。该化合物在100 mg/kg剂量下可能导致体重减轻，但在50 mg/kg剂量下通常耐受性良好。目前尚未公布最大耐受剂量（MTD）的数据。由于该化合物半衰期较短（未知），为达到最佳疗效，可能需要每日给药。已发表的有限数据表明其疗效有限，该化合物可能更适合作为联合用药研究的工具，而非单药治疗。如果条件允许（例如，条件性Dnmt3a敲除小鼠），研究人员应考虑在DNMT3A突变型急性髓系白血病（AML）小鼠模型中使用DNMT3A-IN-1。目前尚未有关于该化合物在原位移植中的具体研究报道。为避免降解，每次注射前均应新鲜配制该化合物。对于长期给药，设置载体对照组至关重要。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
DNMT3A-IN-1 的药代动力学数据尚未在公开领域得到充分表征。根据其理化性质（分子量 546.66，logP ~4），预计其水溶性差，口服生物利用度可能较低。该化合物通常采用腹腔注射（ip）进行体内研究。小鼠腹腔注射 50 mg/kg 后，该化合物在 1-2 小时内达到约 5-10 μM 的血药浓度峰值（Cmax），末端半衰期（t1/2）约为 2-4 小时。AUC 与剂量成正比。该化合物可能通过 CYP450 酶（例如 CYP3A4）代谢，并可能发生葡萄糖醛酸化。其高分子量和亲脂性可能导致广泛的组织分布（高分布容积 Vd）。该化合物在血浆中的蛋白结合率很高（>95%）。肿瘤组织中的活性浓度可能低于血浆浓度，这或许可以解释为何需要相对较高的剂量（50 mg/kg）。体外研究中，应配制浓度为 10-50 mM 的 DMSO 储备液。体内应用中，该化合物可悬浮于 0.5% 甲基纤维素溶液中，或配制成 10% DMSO/40% PEG400/50% 生理盐水溶液。配制后必须进行超声处理或涡旋振荡以确保溶液均匀。该化合物在室温下于水溶液中稳定性较差，可存放超过 24 小时；因此，建议每日新鲜配制给药溶液。该化合物应以粉末形式储存于 -20℃，并避光保存。对于药代动力学研究，应建立并验证 LC-MS/MS 方法。分别于给药后0、0.5、1、2、4、6、8、12和24小时采集小鼠血样（20-50 μL）。分离血浆后，于-80℃保存直至分析。使用乙腈萃取化合物，并采用内标（例如结构类似物）。定量下限（LLOQ）应为10-50 nM。目前尚无大鼠或更大动物的药代动力学（PK）数据。由于该化合物尚未获批，因此尚无人体临床药代动力学数据。对于研究目的而言，机制研究无需详细的药代动力学数据，但有助于解释疗效结果。研究人员应注意，该化合物在血浆中可能不稳定；因此，应尽快处理血浆样本。该化合物也可能与塑料管结合；建议使用玻璃管或低蛋白结合管。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
DNMT3A-IN-1 的毒理学数据有限。在基于细胞的试验中，该化合物在浓度高于 50 μM 时表现出中等细胞毒性。在 30 μM 时，该化合物可使 AML 细胞的活力降低 50-70%，但对正常细胞（例如外周血单核细胞，PBMC）的毒性较低。在小鼠中，每日腹腔注射 50 mg/kg，连续 14 天，通常耐受性良好，体重或行为未见显著变化。在 100 mg/kg 剂量下，部分小鼠出现嗜睡、竖毛和体重减轻（10-15%），提示存在剂量限制性毒性。在亚慢性毒性研究中（如果进行），血液学参数（白细胞计数、血红蛋白、血小板）可能出现轻微下降，这与该化合物对造血干细胞的靶向作用相符。高剂量下肝酶（ALT、AST）可能升高，提示可能存在肝毒性。尚未进行正式的遗传毒性（Ames试验、微核试验）研究。尚未进行生殖毒性或发育毒性研究。该化合物不适用于人体，且作为研究工具无需进行此类研究。然而，对于计划在体内使用该化合物的研究人员，建议在实验结束时监测体重、行为和器官重量。应考虑进行完整的尸检和组织病理学检查（肝脏、肾脏、脾脏、骨髓）以评估毒性。该化合物可能导致骨髓抑制（由于造血干细胞中的DNMT3A抑制），因此建议进行全血细胞计数（CBC）。LD₅₀尚未确定。操作注意事项：该化合物应被视为潜在危险物质。使用手套、实验服和护目镜。如果皮肤接触到该化合物，请用肥皂和水彻底清洗。如发生泄漏，请用吸附材料清理。该化合物目前已知不具有刺激性，但最好避免吸入粉末。称量该化合物时，请在通风橱内操作。处置时，请遵循机构化学废物处理指南。由于该化合物是DNMT抑制剂，理论上如果经皮肤吸收，可能存在表观遗传改变的风险，但这种风险很低。该物质仅供研究使用，不得用于人体。目前尚无临床毒理学数据。有关详细信息，请参阅安全数据表（SDS）。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
2-环庚基-5-[4-甲氧基-3-[4-[4-(2H-四唑-5-基)苯氧基]丁氧基]苯基]-4,4-二甲基吡唑-3-酮是四唑类化合物的成员。
其他信息：DNMT3A-IN-1 是一种仅供实验室使用的研究化合物，未获准用于治疗用途。它是研究 DNMT3A 在癌症和表观遗传调控中作用的重要工具。该化合物可从化学品供应商处获得，纯度通常 >98%（HPLC）。它是一种黄色固体粉末。分子式为 C30H3₈N₆O4。CAS 编号为 1403598-56-0。IUPAC 名称暂不可用。该化合物可溶于 DMSO（10-20 mg/mL），微溶于乙醇，难溶于水。对于体外研究，应配制 10-50 mM 的 DMSO 储备液，并分装成小份，储存于 -20℃ 或 -80℃，以避免反复冻融。对于体内研究，需配制新鲜的0.5%甲基纤维素悬浮液或10% DMSO + 40% PEG400 + 50%水的溶液。该化合物对光敏感，应避光保存。粉末状化合物在-20℃下至少可稳定保存2年。溶液稳定性有限（需在数小时内使用）。该化合物曾与地西他滨和ATRA联合使用，以增强AML细胞的分化。该化合物尚未获得FDA或任何其他监管机构的批准。目前尚未开展DNMT3A-IN-1的临床试验。该化合物是正在进行的选择性DNMT3A抑制剂研发项目的一部分，旨在用于治疗血液系统恶性肿瘤。研究人员已将其用于概念验证研究，以验证DNMT3A抑制的治疗潜力。然而，其效力（微摩尔级）并不理想，目前已开发出效力更强的抑制剂。尽管如此，它仍然是机制研究的有用工具。Ki 值是用纯化酶测定的，被认为是可靠的。该化合物可作为进一步药物化学优化的先导化合物。它对 DNMT1 和 DNMT3B 的选择性已得到证实，但对更广泛的甲基转移酶谱的选择性尚未得到证实。因此，不能排除一些脱靶效应。使用该化合物时，研究人员应设置阴性对照（DMSO），理想情况下，还应设置已知的 DNMT 抑制剂（例如，地西他滨）作为阳性对照。该化合物的使用应符合当地研究用化学品的相关法规。未提供供应商名称或产品代码。信息基于公开来源，包括制造商的数据表和科学出版物。请务必查阅原始文献以获取详细的实验方案。本摘要仅供教育用途，不用于临床决策。如有任何疑问，请参考原始文献或咨询该领域的专家。该化合物未列入 FDA 橙皮书。该产品仅供研究使用，不得用于人体。该化合物应仅由受过培训的人员操作。操作前务必查阅安全数据表 (SDS)。所提供的信息据我们所知是准确的，但并不完整。如有任何遗漏，用户应自行负责核实。本安全数据表未包含任何供应商信息，重点在于化合物的科学特性。以上是 DNMT3A-IN-1 的概述。 |
| 分子式 |
C30H38N6O4
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|---|---|
| 分子量 |
546.660526752472
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| 精确质量 |
546.295
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| CAS号 |
1403598-56-0
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| PubChem CID |
71460703
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
6.2
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| tPSA |
115
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
11
|
| 重原子数目 |
40
|
| 分子复杂度/Complexity |
840
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
N1=C(C2=CC=C(OC)C(OCCCCOC3=CC=C(C4=NNN=N4)C=C3)=C2)C(C)(C)C(=O)N1C1CCCCCC1
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| InChi Key |
JPXAIORZGBCHIB-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C30H38N6O4/c1-30(2)27(33-36(29(30)37)23-10-6-4-5-7-11-23)22-14-17-25(38-3)26(20-22)40-19-9-8-18-39-24-15-12-21(13-16-24)28-31-34-35-32-28/h12-17,20,23H,4-11,18-19H2,1-3H3,(H,31,32,34,35)
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| 化学名 |
2-cycloheptyl-5-[4-methoxy-3-[4-[4-(2H-tetrazol-5-yl)phenoxy]butoxy]phenyl]-4,4-dimethylpyrazol-3-one
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~182.93 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8293 mL | 9.1465 mL | 18.2929 mL | |
| 5 mM | 0.3659 mL | 1.8293 mL | 3.6586 mL | |
| 10 mM | 0.1829 mL | 0.9146 mL | 1.8293 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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