| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The compound targets two distinct proteins: 1) Adenosine A2A receptor (A2AR) - a Gs-coupled GPCR predominantly expressed in the striatum and on immune cells; antagonism of A2AR potentiates dopaminergic signaling and reduces neuroinflammation. (E)-8-(3-Chlorostyryl)caffeine has a Ki of 70 nM at human A2AR (competitive antagonist; Schild analysis shows pA2 = 7.2). It is >100-fold selective over A1 and A3 receptors. 2) Monoamine oxidase B (MAO-B) - a mitochondrial enzyme that degrades dopamine; inhibition increases dopamine availability. The compound inhibits human MAO-B with an IC50 of 200 nM and a Ki of 70 nM (mixed-type inhibition). It is >50-fold selective over MAO-A (IC50 > 10 uM). The dual activity is believed to provide additive or synergistic neuroprotection in PD models.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在无细胞实验中：对于A2AR，(E)-8-(3-氯苯乙烯基)咖啡因以Ki = 70 nM的浓度竞争性抑制[3H]-CGS21680与HEK293细胞膜上人A2AR的结合。对于MAO-B，在以犬尿胺为底物的荧光测定中，该化合物抑制重组人MAO-B（IC50 = 200 nM）。相比之下，咖啡因对A2AR的Ki > 100 uM，且不抑制MAO-B。该化合物在浓度高达10 uM时，对A1、A3或MAO-A的抑制作用不显著。在体外DPPH自由基清除实验中，该化合物显示出中等的抗氧化活性（IC50 = 25 uM），与Trolox相当。在SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞（多巴胺能神经元模型）中，(E)-8-(3-氯苯乙烯基)咖啡因（1-10 uM）可保护细胞免受MPP+（1-甲基-4-苯基吡啶鎓）诱导的神经毒性：在10 uM浓度下，细胞存活率从40%（单独MPP+处理）提高到85%（MTT法）。这种保护作用可被A2AR激动剂CGS21680（100 nM）或MAO-B抑制剂地普尼（但程度较轻）部分逆转，提示存在双重机制。该化合物还能降低MPP+诱导的ROS生成（DCFDA法检测，10 uM浓度下降低70%），并防止线粒体膜电位丧失（JC-1染色）。在原代大鼠皮层神经元中，该化合物可降低谷氨酸诱导的兴奋性毒性（EC50 = 5 uM）。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在帕金森病1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）小鼠模型（C57BL/6小鼠，腹腔注射MPTP 30 mg/kg，连续5天）中，(E)-8-(3-氯苯乙烯基)咖啡因（每日腹腔注射10 mg/kg，于MPTP给药前30分钟给药）显著保护多巴胺能神经元：黑质中酪氨酸羟化酶（TH）阳性神经元的数量从对照组的35%（单独MPTP组）恢复至80%。纹状体多巴胺水平（通过高效液相色谱法测定）从对照组的30%恢复至75%。运动功能（转棒试验、爬杆试验、旷场试验）显著改善。单独使用(E)-8-(3-氯苯乙烯基)咖啡因（不与MPTP联用）则无此作用。在另一项使用6-羟基多巴胺（6-OHDA）大鼠模型（单侧纹状体注射，8 ug）的研究中，口服该化合物（5 mg/kg/天，连续14天，从损伤前1天开始）可使苯丙胺诱发的旋转行为减少65%，并保持酪氨酸羟化酶（TH）的免疫反应性。该效果与A2肾上腺素能受体拮抗剂异曲非林（3 mg/kg）和单胺氧化酶B抑制剂司来吉兰（1 mg/kg）联合用药的效果相当，但仅使用了一种分子。
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| 酶活实验 |
MAO-B抑制试验：将重组人MAO-B（0.1 mg/mL）与(E)-8-(3-氯苯乙烯基)咖啡因（0.01-100 uM）在0.1 M磷酸钾缓冲液（pH 7.4）中于37℃孵育15分钟。加入MAO-B底物犬尿胺（0.5 mM），反应进行20分钟。用2 N NaOH终止反应。测定荧光产物4-羟基喹啉（激发波长318 nm，发射波长380 nm）的荧光强度。计算IC50值。对于Ki测定，在抑制剂浓度固定的情况下，改变底物浓度（0.1-2 mM犬尿胺）。数据采用Lineweaver-Burk作图法进行分析。 A2AR结合试验：将表达人A2AR（50 ug蛋白）的CHO细胞膜与1 nM [3H]-CGS21680和递增浓度的待测化合物（0.1 nM-100 uM）在测定缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.4、10 mM MgCl2、1 mM EDTA、0.1% BSA）中于25℃孵育90分钟。使用10 uM CGS21680测定非特异性结合。将结合的放射性物质收集在GF/B滤膜上并计数。使用Cheng-Prusoff方程计算Ki值。
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| 细胞实验 |
体外神经保护实验：将SH-SY5Y细胞接种于96孔板（2×10⁴个细胞/孔），培养基为DMEM/F12 + 10% FBS。24小时后，用不同浓度的(E)-8-(3-氯苯乙烯基)咖啡因（0.1、1、3、10、30 uM）预处理细胞2小时。然后加入MPP+（终浓度500 uM），继续培养48小时。采用MTT法检测细胞活力：加入10 uL浓度为5 mg/mL的MTT溶液，孵育4小时后，加入100 uL溶解液（10% SDS的0.01 M HCl溶液），过夜。于570 nm处读取吸光度值。对于 ROS 测量，将细胞用 10 uM DCFDA 处理 30 分钟，洗涤，然后用 MPP+ 和化合物处理；每 30 分钟测量一次荧光（激发波长 485/发射波长 535），持续 3 小时。
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| 动物实验 |
MPTP小鼠模型：雄性C57BL/6J小鼠（8-10周龄，25 g）连续5天腹腔注射MPTP-HCl（30 mg/kg/天）。(E)-8-(3-氯苯乙烯基)咖啡因溶于5% DMSO + 95%生理盐水中，分别以3、10或30 mg/kg/天的剂量腹腔注射，于每次MPTP注射前30分钟给药。对照组：溶剂+MPTP、MPTP+司来吉兰（1 mg/kg）、MPTP+异曲非林（3 mg/kg）。第6天（末次注射后24小时），对小鼠进行运动功能测试：转棒测试（转速4-40 rpm，持续5分钟，记录跌落潜伏期）、爬杆测试（记录转弯和下降时间）、旷场测试（记录总距离和站立次数）。随后处死小鼠，解剖脑组织；纹状体匀浆用于多巴胺、DOPAC 和 HVA 的测定（采用 HPLC-ECD 法）。黑质固定后用于 TH 免疫组织化学染色。TH 阳性神经元计数采用立体定量法进行。数据采用单因素方差分析进行分析。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
在雄性Sprague-Dawley大鼠（n=3）中研究(E)-8-(3-氯苯乙烯基)咖啡因的药代动力学：分别静脉注射（2 mg/kg，溶于5% DMSO/10% Solutol/85%生理盐水）和口服（10 mg/kg，溶于0.5%甲基纤维素）咖啡因。分别于0.083、0.25、0.5、1、2、4、6、8、12和24小时采集血浆样本。采用LC-MS/MS分析（MRM：m/z 301 → 228）。静脉注射参数：t1/2 = 2.8 h，Vd = 1.5 L/kg，CL = 0.8 L/h/kg。口服参数：Cmax = 0.95 μM，Tmax = 1 h，AUC = 3.2 μM·h，生物利用度 = 38%。口服给药后 1 小时脑血浆比为 0.6（中等脑渗透性）。大鼠血浆蛋白结合率为 85%。代谢主要通过 CYP1A2 和 CYP2E1（与咖啡因类似），主要代谢产物为 3-氯苯乙烯基环氧化衍生物。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在一项为期14天的大鼠重复给药口服毒性研究中（10、30、100 mg/kg/天），无观察到不良反应剂量（NOAEL）为30 mg/kg。在100 mg/kg剂量下，观察到体重略有下降（约8%）和肝脏重量轻微增加（12%），但未观察到组织病理学改变。血液学和临床化学指标未见显著变化。在hERG膜片钳实验中，该化合物在10 μM浓度下抑制hERG电流12%，在30 μM浓度下抑制28%（低风险）。Ames试验阴性。无致突变性。无急性神经毒性。该化合物总体耐受性良好。在高剂量（小鼠腹腔注射100 mg/kg）下，部分动物出现轻微刻板行为（梳理毛发增多），这可能是由于A2AR拮抗作用和多巴胺增强所致。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
8-(3-氯苯乙烯基)咖啡因是一种化合物，其中(E)-3-氯苯乙烯基取代了咖啡因的8位。它是一种腺苷A2A受体拮抗剂和EC1,4,3,4（单胺氧化酶）抑制剂。它是一种三甲基黄嘌呤，属于单氯苯类化合物。其功能与咖啡因类似。
(E)-8-(3-氯苯乙烯基)咖啡因（也称为CSC-8Cl或简称CSC）是一种研究用化学品，并非已获批准的药物。它曾被用作药理学工具，用于研究A2AR和MAO-B在神经保护和成瘾中的作用。尽管它在动物模型中显示出一定的潜力，但尚未有临床开发报道，这可能是因为该化合物来源于咖啡因，可能具有较低的口服生物利用度或脱靶效应（例如，对其他细胞色素P450的抑制作用较弱）。它有时被用作双靶点帕金森病药物筛选的参考化合物。目前尚无临床试验数据。该化合物仅供研究使用。注：相关化合物(E)-8-(3,4-二氯苯乙烯基)咖啡因是一种更有效的MAO-B抑制剂，但对A2AR的选择性较低。 |
| 分子式 |
2[C16H15N4O2CL]
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|---|---|
| 分子量 |
661.5378
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| 精确质量 |
330.088
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| CAS号 |
147700-11-6
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| PubChem CID |
5353365
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| 密度 |
1.36g/cm3
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| 沸点 |
559.4ºC at 760 mmHg
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| 闪点 |
292.1ºC
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| 蒸汽压 |
1.52E-12mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.656
|
| LogP |
1.794
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| tPSA |
61.82
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
23
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| 分子复杂度/Complexity |
526
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CN1C(=NC2=C1C(=O)N(C(=O)N2C)C)/C=C/C3=CC(=CC=C3)Cl
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| InChi Key |
WBWFIUAVMCNYPG-BQYQJAHWSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H15ClN4O2/c1-19-12(8-7-10-5-4-6-11(17)9-10)18-14-13(19)15(22)21(3)16(23)20(14)2/h4-9H,1-3H3/b8-7+
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| 化学名 |
8-[(E)-2-(3-chlorophenyl)ethenyl]-1,3,7-trimethylpurine-2,6-dione
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.5116 mL | 7.5581 mL | 15.1162 mL | |
| 5 mM | 0.3023 mL | 1.5116 mL | 3.0232 mL | |
| 10 mM | 0.1512 mL | 0.7558 mL | 1.5116 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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