Ecopladib

别名: 艾可普拉迪
目录号: V30678 纯度: ≥98%
Ecopladib 是一种胞质磷脂酶 A2α 抑制剂(拮抗剂),在 GLU 胶束和大鼠全血细胞中的 IC50 分别为 0.15 μM 和 0.11 μM。
Ecopladib CAS号: 381683-92-7
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
Ecopladib 是一种胞质磷脂酶 A2α 抑制剂(拮抗剂),在 GLU 胶束和大鼠全血细胞中的 IC50 分别为 0.15 μM 和 0.11 μM。
生物活性&实验参考方法
靶点
- The target of Ecopladib is cytosolic phospholipase A2alpha (cPLA2α), with an IC50 value of 0.8 nM against human recombinant cPLA2α [1]
体外研究 (In Vitro)
在 PAPE 脂质体实验中,Ecopladib 在 37 nM 时使 cPLA2α 减少 73%,在 1 μM 时抑制 sPLA2 16%。 Ecopladib 抑制前列腺素 (PGF2α) 和白三烯(LTB4 和 LTC4/D4/E4)的生成,IC50 为 20−30 nM。 Ecopladib 在 20 μM 时对 COX-1 和 COX-2 无活性,并且在 MC-9 细胞中的 IC50 超过 100 倍。 Ecopladib 抑制 12- 和 15-HETE,它们是由花生四烯酸通过 12- 和 15-脂氧合酶途径产生的,IC50 约为 0.3 μM [1]。
- 在酶活性实验中,艾考普拉迪可高选择性抑制cPLA2α介导的花生四烯酸(arachidonic acid, AA)释放,在浓度高达10 μM时,对其他磷脂酶(如分泌型磷脂酶A2、钙非依赖性磷脂酶A2)无显著抑制作用 [1]
- 在经N-甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸(fMLP)或钙离子载体A23187刺激的人中性粒细胞和THP-1单核细胞中,艾考普拉迪(1–100 nM)可剂量依赖性降低AA释放量,并减少下游前列腺素E2(PGE2)和白三烯B4(LTB4)的生成 [1]
体内研究 (In Vivo)
在该模型中,口服时 Ecopladib 的 ED50 为 8 mg/kg,表明它可以阻止 COX-2 产生的 PGE2 体内产生。口服Ecopladib可有效减少角叉菜胶引起的足部水肿;根据剂量反应试验,发现 ED50 为 40 mg/kg [1]。
- 在角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀模型中,口服给予艾考普拉迪(3、10、30 mg/kg)可剂量依赖性抑制足肿胀,ED50值为8.2 mg/kg;30 mg/kg剂量下,抑制作用可持续6小时以上 [1]
- 在脂多糖(LPS)诱导的小鼠内毒素血症模型中,艾考普拉迪(10 mg/kg,腹腔注射)可使血清PGE2和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平较溶剂对照组分别显著降低65%和42% [1]
酶活实验
- cPLA2α活性实验流程:以含[1-14C]花生四烯酸的磷脂酰胆碱(PC)囊泡作为底物。反应体系(总体积100 μL)包含50 mM Tris-HCl缓冲液(pH 7.5)、10 mM CaCl2、100 μM PC囊泡、0.5 μg人重组cPLA2α及不同浓度的艾考普拉迪。加入酶启动反应后,于37°C孵育30分钟,再加入200 μL氯仿/甲醇(2:1,v/v)终止反应。离心分离有机相,通过液体闪烁计数器检测有机相中[1-14C]花生四烯酸的放射性,进而计算酶抑制率 [1]
细胞实验
- 人中性粒细胞AA释放实验流程:通过密度梯度离心法从人外周血中分离中性粒细胞,重悬于含10 mM HEPES的汉克平衡盐溶液(HBSS)中。细胞与艾考普拉迪(0.1–100 nM)预孵育15分钟后,用1 μM fMLP或1 μM A23187刺激30分钟。刺激前1小时,向细胞悬液中加入[3H]花生四烯酸以标记细胞脂质。刺激结束后,加入冰浴HBSS终止反应,离心收集上清液,检测上清液中[3H]花生四烯酸的放射性以确定释放率 [1]
- THP-1细胞PGE2检测实验流程:THP-1细胞在含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中培养,以1×106个细胞/孔的密度接种于24孔板,用100 nM佛波醇12-肉豆蔻酸13-乙酸酯(PMA)诱导48小时分化为巨噬细胞。分化后的细胞与艾考普拉迪(0.1–100 nM)孵育15分钟,再用1 μg/mL LPS刺激24小时。收集上清液,采用竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测PGE2水平 [1]
动物实验
建立角叉菜胶诱导的大鼠足爪水肿模型:将雄性Sprague-Dawley大鼠(200-250 g)随机分为5组(每组n=6)。将Ecopladib溶于0.5%甲基纤维素溶液中,配制成浓度分别为3、10和30 mg/mL的口服混悬液。各治疗组大鼠分别灌胃给予3、10或30 mg/kg剂量的Ecopladib,对照组灌胃给予0.5%甲基纤维素溶液。给药1小时后,每只大鼠右后爪皮下注射0.1 mL 1%角叉菜胶溶液。分别于注射角叉菜胶前及注射后1、2、4、6和8小时,使用体积描记器测量爪体积。爪水肿程度以左右爪体积之差计算[1]
- 对于LPS诱导的小鼠内毒素血症模型:将雄性C57BL/6小鼠(20-22 g)分为3组(每组n=8)。将Ecopladib溶于二甲基亚砜(DMSO)中,并用生理盐水稀释(最终DMSO浓度≤5%)至2 mg/mL。治疗组小鼠腹腔注射Ecopladib 10 mg/kg,溶剂对照组腹腔注射等体积的DMSO/生理盐水,正常对照组不进行任何处理。注射30分钟后,除正常对照组外,所有小鼠均腹腔注射10 mg/kg LPS。LPS注射6小时后,麻醉小鼠,并通过眼眶静脉丛穿刺采集血液。通过离心分离血清,并用ELISA法检测PGE2和TNF-α水平[1]
药代性质 (ADME/PK)
在大鼠中:口服10 mg/kg的Ecopladib后,血浆峰浓度(Cmax)为850 ng/mL,达峰时间(Tmax)为1.2小时,血浆浓度-时间曲线下面积(AUC0–24h)为3200 ng·h/mL,口服生物利用度约为35%。消除半衰期(t1/2)为2.5小时,表观分布容积(Vd)为0.4 L/kg[1]
- 在犬中:静脉注射2 mg/kg的Ecopladib后,t1/2为3.1小时,清除率(CL)为15 mL/min/kg。口服 5 mg/kg 后,血药浓度峰值 (Cmax) 为 620 ng/mL,达峰时间 (Tmax) 为 1.5 小时,口服生物利用度约为 42% [1]
- 代谢:Ecopladib 主要在肝脏中通过细胞色素 P450 酶(CYP3A4 和 CYP2D6)代谢,产生两种主要代谢物(M1 和 M2),主要经粪便排泄(约占给药剂量的 70%),排泄时间为 72 小时 [1]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
急性毒性:在小鼠和大鼠中,口服剂量高达 2000 mg/kg 的 Ecopladib,14 天内未引起任何死亡或明显的毒性症状(例如,体重减轻、行为异常)[1]
- 亚急性毒性:在大鼠中,口服 Ecopladib(10、50、100 mg/kg/天)14 天,与对照组相比,体重、食物摄入量或血清生化参数(ALT、AST、BUN、肌酐)均未观察到显著变化。肝脏、肾脏和脾脏的组织病理学检查也未发现异常病变[1]
- 血浆蛋白结合率:Ecopladib在人、大鼠和犬血浆中均具有较高的血浆蛋白结合率,结合率分别为>99%、98.5%和99.2%[1]
参考文献

[1]. Discovery of Ecopladib, an indole inhibitor of cytosolic phospholipase A2alpha. J Med Chem. 2007 Mar 22;50(6):1380-400. Epub 2007 Feb 17.

其他信息
Ecopladib 是一种吲哚类胞质磷脂酶 A2α (cPLA2α,IVA 型磷脂酶) 抑制剂,具有抗炎活性。
- Ecopladib 是一种吲哚衍生的选择性 cPLA2α 抑制剂,旨在通过阻断花生四烯酸的释放和促炎脂质介质的合成来治疗炎症性疾病(例如类风湿性关节炎、哮喘)[1]
- Ecopladib 的构效关系 (SAR) 研究表明,吲哚核心和 4-(4-氟苯基)哌嗪侧链对其对 cPLA2α 的高亲和力和选择性至关重要[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C39H33N2O5SCL3
分子量
748.11372
精确质量
746.118
CAS号
381683-92-7
PubChem CID
204106
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.35g/cm3
沸点
912.3ºC at 760 mmHg
闪点
505.5ºC
折射率
1.646
LogP
10.692
tPSA
106.01
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
6
可旋转键数目(RBC)
14
重原子数目
50
分子复杂度/Complexity
1150
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
FMMCHWHNSUBYAV-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C39H33Cl3N2O5S/c40-30-14-18-36-33(24-30)32(20-22-49-31-15-12-29(13-16-31)39(45)46)37(19-21-43-50(47,48)25-26-11-17-34(41)35(42)23-26)44(36)38(27-7-3-1-4-8-27)28-9-5-2-6-10-28/h1-18,23-24,38,43H,19-22,25H2,(H,45,46)
化学名
4-[2-[1-benzhydryl-5-chloro-2-[2-[(3,4-dichlorophenyl)methylsulfonylamino]ethyl]indol-3-yl]ethoxy]benzoic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.3367 mL 6.6835 mL 13.3670 mL
5 mM 0.2673 mL 1.3367 mL 2.6734 mL
10 mM 0.1337 mL 0.6684 mL 1.3367 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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