Etanercept   中文名称: 依那西普

依那西普 在体外可抑制人TNF的活性。它调节由TNF诱导或调控的生物学反应，例如黏附分子（E-选择素、ICAM-1）的表达，以及白细胞介素-6 (IL-6)、基质金属蛋白酶-3 (MMP-3) 和 IL-1 的产生。[3]

依那西普（10 mg/kg；皮下注射；每 3 天一次，持续 3 周）显着降低了平均关节炎评分和放射学评分 [4]。

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依那西普 在多种体内炎症模型（包括关节炎）中有效。
在类风湿关节炎 (RA) 临床试验中观察到显著改善：对于甲氨蝶呤 (MTX) 疗效不佳的患者，加用 ETN（25mg，每周两次）治疗24周后，71%的患者达到ACR20应答（安慰剂+MTX组为27%），39%达到ACR50应答（安慰剂+MTX组为3%）。
在早期RA中，ETN单药治疗（25mg，每周两次）12个月后，72%的患者无影像学侵蚀进展（MTX组为60%）。
在针对已确诊RA的TEMPO试验中，联合治疗 (ETN+MTX) 优于任一单药：ACR20应答率联合组为85%，ETN单药组为76%，MTX单药组为75%；ACR50应答率分别为69%、48%、43%；联合组中48%的患者达到临床缓解。
每周一次50mg的给药方案显示出与25mg每周两次方案相当的疗效。
在银屑病关节炎 (PsA) 中，ETN（25mg，每周两次）治疗12周后，87%的患者达到PsARC应答（安慰剂组23%），73%达到ACR20应答（安慰剂组13%）。[3]

动物/疾病模型： 六周龄雄性Lewis大鼠（佐剂诱导关节炎（AIA）模型）[4]
剂量： 10 mg/kg
给药途径： 皮下注射；每3天一次，持续3周
实验结果： 平均关节炎评分显著降低；放射学评分在治疗结束时显著降低。

代谢/代谢产物
在生物体组织中，由于还原性环境，V3+ 和 V4+ 占主导地位；然而，在高氧血浆中，会形成 V5+。
在生物体组织中，由于还原性环境，V3+ 和 V4+ 占主导地位；然而，在高氧血浆中，会形成V5+。
每日口服10-20 mg/kg偏钒酸铵的小牛，肝脏中钒的含量为0.3至5.1 ppm（湿组织），肾脏中为6.0至40 ppm。
健康志愿者单次皮下注射25 mg后，血清达峰时间平均为51小时，最大浓度（Cmax）为1.46 mcg/mL（范围0.37-3.47）。
消除半衰期约为68小时。
每周两次给药方案可维持稳态浓度。每周一次皮下注射 50 mg 的给药方案在稳态下显示出相似的药代动力学特征。
肾功能或肝功能损害无需调整剂量，且男性和女性以及不同年龄组（65-87 岁 vs <65 岁）的药代动力学特征相似。
同时服用甲氨蝶呤 (MTX) 不会改变依那西普的药代动力学特征。[3]

毒性概述
鉴别与用途：钒酸铵是一种橙色粉末。它被用作药物分析毒理学中的喷雾显色剂。人体暴露与毒性：目前尚无相关数据。动物研究：饮用水中添加钒酸铵（10 或 20 mg/L）对皮下注射 1,2-二甲基肼 (DMH) 治疗 20 周的小鼠大肠肿瘤的发生发展没有影响。虽然胸苷掺入量增加，但钒酸铵对 DMH 诱导的肿瘤发生率或类型没有影响。以钒酸铵形式喂食 15 mg/kg 钒的大鼠 2 个月后，出现心室压力升高和肺动脉高压，但全身循环未见变化。
当以0.005-1 mg钒/kg的剂量，连续21天（较高剂量）至6个月（较低剂量）对大鼠和小鼠进行口服钒酸铵给药时，发现0.05 mg钒/kg的剂量是导致大鼠和小鼠条件反射活动功能紊乱的阈值。生态毒性研究：0.02 mg/L的钒酸铵会干扰淡水藻类小球藻（Chlorella pyrenoidosa）的细胞分裂，而0.25 mg/L的浓度则具有致死性。
鉴别与用途：偏钒酸铵是一种白色或微黄色结晶性粉末。它用于羊毛织物的染色和印花；木材染色；钒黑和“不褪色墨水”的生产；陶器钒光泽的制作；作为显影剂；显微镜苏木精染色；钒酸铵可用作分析化学试剂。由于其在高温下易转化为五氧化二钒，因此常被用作五氧化二钒的替代品。人体暴露及毒性：一名工人在6小时内用铲子将粉末铲入料斗时，接触了大量干燥的钒酸铵粉尘。开始工作2小时内，该工人报告出现眼眶后方头痛、流泪、口干和舌头变绿的症状。手指、阴囊和大腿皮肤出现明显的绿色变色。据报告，该工人鼻塞，精神萎靡。第二天，他的睾丸肿胀且触痛。暴露后的第三天，他出现喘息、呼吸困难和咳出绿色痰液的咳嗽。在接下来的两周内，他多次咯血。喘息和呼吸困难持续约1个月；胸部症状在事故发生3周后达到最严重程度。在最后一次接触后6周的检查中，除左侧鼻孔部分阻塞和鼻黏膜发红外，他无其他症状。胸部检查未见异常。肺功能评估显示肺容量、用力呼气流量和气体交换均正常。外周血嗜酸性粒细胞轻度增多。在人成纤维细胞培养中，VO3-可诱导DNA合成和细胞生长。未发现偏钒酸铵会增加人白细胞中结构性染色体畸变的频率，但发现其显著增加了数目畸变、微核和卫星体相关染色体的数量。采用α卫星着丝粒特异性DNA探针进行荧光原位杂交（FISH）检测人淋巴细胞微核试验，证实了钒的非整倍体致病性。动物实验：小鼠接受20 mg/kg钒的偏钒酸铵溶液后，出现急性肾小管坏死、肺出血和淋巴组织坏死。一项为期3个月的研究中，大鼠饮用水中添加浓度为200 mg/L（以钒计）的偏钒酸铵。动物表现出体重增长迟缓和贫血。大体病理学检查显示，部分动物肝脏和肾脏出现实质营养不良，肾小管内形成管状结构。据报道，犬和兔急性暴露于钒氧化物和钒盐（包括偏钒酸铵）后（口服和皮下注射）会出现神经生理效应，包括中枢神经系统紊乱（条件反射和神经肌肉兴奋性受损）。此外，还研究了钒酸铵在仓鼠中的致畸性。每组20只妊娠仓鼠分别于妊娠第5至10天腹腔注射0、0.47、1.88和3.75 mg/kg的钒酸铵。妊娠雌鼠于第15天处死。结果显示，各剂量组小鼠的骨骼畸形发生率显著增加，雌雄比例显著下降。偏钒酸铵可提高酿酒酵母D7菌株的转化率和回复率；在未进行代谢活化的情况下，其活性最高。小鼠经胃内灌注给药后，骨髓微核试验结果显示偏钒酸铵呈阳性。相反，在给药后24小时和36小时进行的染色体结构畸变试验中，对照组和给药组之间未发现差异。在浓度为 5-40 uM 的偏钒酸铵研究中，中国仓鼠 V79 细胞的 hprt 基因和 hprt-/gpt+ 转基因细胞系 G12 的 gpt 位点均表现出微弱的诱变性。雌性小鼠每 3 天腹腔注射 2.5、5 或 10 mg/kg 的偏钒酸铵，持续 3、6 或 9 周，结果显示，在长达 6 周的时间内，其对大肠杆菌内毒素致死性的抵抗力呈剂量依赖性增加，而对李斯特菌致死性的抵抗力则呈剂量依赖性降低。还观察到肝脾肿大，脾脏巨核细胞和红细胞前体生成增加。

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妊娠和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
依那西普极少分泌到母乳中，且婴儿吸收不良，这与其约 150,000 Da 的高分子量相符。产后至少等待 2 周再恢复治疗可最大程度地减少药物向婴儿的转移。目前尚无母亲服用依那西普期间母乳喂养婴儿的长期随访数据。尚不清楚较大婴儿出现不良反应的风险，但认为可能性不大。大多数专家和专业指南认为，该药物对哺乳婴儿的风险较低，可以在哺乳期间使用。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
一位患有类风湿性关节炎的女性在产后3个月开始每周两次皮下注射依那西普25毫克，之后改为每周一次皮下注射50毫克。她的婴儿母乳喂养至6个月大（未说明喂养程度）。据报道，该婴儿3岁时健康状况良好。
一项针对患有慢性关节炎的女性的病例对照研究发现，有5名女性在妊娠和哺乳期间接受了依那西普治疗（未说明治疗程度）。与未接触药物的哺乳期婴儿相比，5名婴儿在出生第一年的生长指标、发育里程碑、疫苗接种和疾病方面均未观察到差异。
6名婴儿由患有类风湿性关节炎或强直性脊柱炎的母亲进行母乳喂养（2名纯母乳喂养，4名部分母乳喂养），这些母亲在怀孕期间以及入组研究前均接受依那西普治疗。一位母亲报告其婴儿出现非严重皮疹和高音调哭闹，这些症状均无需干预即可自行消退。所有婴儿在6个月龄健康体检时，生长指标均在正常范围内。
西班牙开展了一项针对接受生物制剂DMARDs治疗的风湿病患者的全国性前瞻性登记研究。三名母亲服用依那西普的婴儿接受了母乳喂养（未说明喂养程度），未报告婴儿出现轻度或重度不良事件。
◉ 对哺乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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毒性数据
LC50（大鼠）= 7.8 mg/m3/4h
LC50（大鼠）= 340 mg/m3/4h

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相互作用
如今，钒化合物常被添加到营养补充剂中，并且正在被开发用于治疗糖尿病。此前研究表明，与硫酸钒 (VS) 相比，双(麦芽酚)氧钒(IV) (BMOV) 的组织吸收量增加。我们的主要目标是验证络合作用增加钒吸收的假设，并且这种效应与氧化态无关。次要目标是比较钒络合和氧化态对组织中铁、铜和锌的影响。Wistar大鼠分别饲喂偏钒酸铵（AMV）、钒硫酸盐（VS）或钒酸二甲酯（BMOV）（饮用水中浓度均为1.2 mM）。12周后，BMOV或AMV组的组织钒吸收量均高于VS组（p<0.05）。BMOV导致组织锌含量降低，骨骼铁含量增加。在细胞吸收模型（Caco-2细胞）中比较了这三种化合物。10分钟时，VS组的钒吸收量高于BMOV或AMV组，但BMOV组（仅250 μM，60分钟）的钒吸收量远高于AMV或VS组。这些结果表明，络合作用或氧化态本身均不足以预测相对吸收率、组织蓄积或微量元素相互作用。
我们实验室之前的研究已证实，钒（一种膳食微量营养素）在体内大鼠肝癌、结肠癌和乳腺癌模型中具有潜在的抗癌作用。本文中，我们通过研究几种化学致癌的生物标志物，特别是细胞增殖和氧化性DNA损伤，进一步探讨了这种必需微量元素的抗肝癌作用。我们通过在基础饲料中每日添加0.05%的2-乙酰氨基芴（2-AAF），每周5天，诱导雄性Sprague-Dawley大鼠发生肝癌。同时，我们向大鼠自由补充偏钒酸铵形式的钒（0.5 ppm，相当于4.27 μmol/L）。与致癌物对照组相比，持续给予钒可降低肝脏相对重量、结节发生率（79.99%）、结节总数和结节数量（p<0.001；68.17%），并改善肝细胞结构。钒治疗进一步恢复了肝脏尿苷二磷酸（UDP）-葡萄糖醛酸转移酶和UDP-葡萄糖脱氢酶的活性，抑制了脂质过氧化，并在启动-促进模型中阻止了糖原贮积癌前病灶的形成（p<0.01；63.29%）。长期钒治疗还降低了溴脱氧尿苷（BrdU）标记指数（p<0.02），并抑制了肝细胞癌前病变期间的细胞增殖。最后，短期钒暴露可显著降低癌前大鼠肝脏中8-羟基-2'-脱氧鸟苷的生成（p<0.001；56.27%）、DNA质量长宽比（p<0.01）以及带尾DNA的平均频率（p<0.001）。该研究表明钒可能在抑制细胞增殖和预防体内早期DNA损伤方面发挥作用。钒对2-AAF诱导的大鼠肝癌早期阶段具有化学预防作用。
包括钒(V)在内的金属元素对生物分子（包括组织中的谷胱甘肽(GSH)）中的巯基(-SH)具有很强的亲和力。鉴于此，我们进一步研究了钒酸铵[NH₄VO₃]与谷胱甘肽（一种毒性生物标志物）的相互作用，以及谷胱甘肽在全血成分（包括血浆和胞质组分）的解毒和结合过程中的作用。我们检测了不同浓度钒酸铵[NH₄VO₃]对全血成分（血浆和胞质组分）中还原型谷胱甘肽水平的影响。结果表明，血浆和胞质组分中谷胱甘肽的消耗量均与钒酸铵的浓度呈正相关，且随着孵育时间的延长，谷胱甘肽水平的降低更为显著。这些研究结果表明，钒酸铵引起的谷胱甘肽（GSH）水平变化可能是由于钒与谷胱甘肽形成加合物（即V-SG）或氧化型谷胱甘肽生成增加（2GSH + V(+5) 生成 GSSG）所致。GSH代谢状态的这种变化为钒酸铵的毒性机制以及谷胱甘肽的保护作用提供了一些信息。
本研究检测了注射亚致死剂量偏钒酸铵（5 mg/kg/天）的大鼠肝脏、肾脏和睾丸中热休克蛋白（Hsp）72/73和葡萄糖调节蛋白（Grp）94的表达模式。此外，为了评估绿茶的保护作用，部分动物被给予富含抗氧化化合物的绿茶煎剂作为唯一饮品。在对照组动物中，应激蛋白的表达具有器官依赖性：抗Grp94抗体在肾脏和肝脏中检测到96 kDa和98 kDa两条条带，而在睾丸中仅检测到98 kDa条带；抗Hsp72/73抗体显示，组成型Hsp73存在于所有器官中，而诱导型Hsp72仅存在于肾脏和睾丸中。在钒处理的大鼠肾脏中，Hsp73表达上调约50%，而Hsp72表达下调50-80%。在肝脏和睾丸中未观察到类似效应。在钒处理的大鼠肝脏和肾脏中，Grp94表达分别上调50%和150%，而在睾丸中未发现变化。在以绿茶为唯一饮料的大鼠中，无论对照组还是钒处理组，肝脏中96 kDa蛋白的表达水平均降低。然而，饮用绿茶未能阻止钒处理大鼠肾脏中钒诱导的Hsp72表达下调。
有关偏钒酸铵（共10种）的更多相互作用（完整）数据，请访问HSDB记录页面。

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非人类毒性值
大鼠吸入LC50：0.34 mg/L/4 hr
大鼠口服LD50：162 mg/kg体重
大鼠口服LD50：58.1 mg/kg
大鼠皮肤LD50：2102 mg/kg
大鼠腹腔注射LD50：18 mg/kg
大鼠皮下注射LD50：23 mg/kg
大鼠吸入LC50：7.8 mg/m³/4 hr>感染：在安慰剂对照试验中，与安慰剂相比，未观察到感染（包括严重感染）的频率或性质增加。然而，一些观察性研究报告称，非严重呼吸道感染的发生率有所增加。
结核病（TB）：上市后监测报告了病例，包括粟粒性结核。建议进行潜伏性结核病筛查。
自身免疫性疾病：已观察到新的抗核抗体（ANA：11% vs 安慰剂组 5%）和抗双链DNA抗体（抗dsDNA：15% vs 安慰剂组 4%）的产生。已有药物诱发系统性红斑狼疮（SLE）样综合征的病例报告，停药后症状缓解。
恶性肿瘤/淋巴瘤：登记数据显示，接受抗TNF治疗的类风湿关节炎（RA）患者的淋巴瘤标准化发病率比（SIR）升高（依那西普联合或不联合英夫利昔单抗治疗的SIR为3.8），但这可能反映了选择性偏倚（病情更严重）。尚未确定因果关系。
脱髓鞘综合征：已有报道称，中枢神经系统脱髓鞘疾病（例如，多发性硬化症、视神经炎）的发生与依那西普（ETN）的使用存在时间上的关联。
充血性心力衰竭（CHF）：在针对纽约心脏协会（NYHA）II-IV级CHF患者的前瞻性试验中，与安慰剂相比，ETN在降低死亡率或CHF住院率方面未显示出任何益处，且在一项试验中，ETN组的感染率有增加的趋势。[3]

[1]. Etanercept: An overview. J Am Acad Dermatol. 2003;49(2 Suppl):S105-S111.

[2]. Goldenberg MM. Etanercept, a novel drug for the treatment of patients with severe, active rheumatoid arthritis. Clin Ther. 1999;21(1):75-2.

[3]. Etanercept in the treatment of rheumatoid arthritis. Ther Clin Risk Manag. 2007;3(1):99-105.

[4]. Etanercept improves endothelial function via pleiotropic effects in rat adjuvant-induced arthritis. Rheumatology (Oxford). 2016;55(7):1308-1317.

偏钒酸铵为白色结晶粉末。微溶于水，密度大于水。在 410 °F (210 °C) 时分解。可能释放有毒气体。中等毒性。具有刺激性。用作油漆、油墨和染料的干燥剂。加热时会失去氨。
另见：依那西普（注释已移至）。

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依那西普 是一种二聚体融合蛋白，由人 75 kDa TNF 受体 (p75) 的两个胞外结构域与人 IgG1 的 Fc 段连接而成。它采用重组DNA技术在哺乳动物细胞表达系统中生产。
它已获准用于治疗类风湿性关节炎（RA）和银屑病关节炎（PsA）。
它可以作为单药治疗，也可以与甲氨蝶呤（MTX）联合使用，联合治疗在延缓RA的放射学进展方面显示出更优的疗效。
它能改善RA患者的健康相关生活质量（HRQOL）和功能状态（HAQ），并可能减少医疗资源利用，提高就业率。[3]

H4NO3V

116.978161811829

185243-69-0

516859

Colorless to light yellow liquid

200 °C (with decomposition)

1

3

0

5

36.5

0

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。