FB23   中文名称: FB23 inhibitor

mRNA N6-methyladenosine (m6A) demethylase FTO

当用 FB23 处理 72 小时时，急性髓系白血病 (AML) 细胞的 IC50 值为 44.8 μM，而 NB4 和 MONOMAC6 AML 细胞的 IC50 值为 23.6 μM [1]。 FB23 处理显着抑制 MYC 靶标、E2F 靶标和 G2M 检查点信号级联反应，这可能有助于解释 FTO 整流和 FTO KD 如何减少细胞周期和增殖。 FB23 给药可激活细胞展示和 p53 染料 [1]。

---

开发一种选择性和强效的FTO抑制剂（FB23）[1]
此前，我们确定MA是ALKBH5上FTO去甲基化的抑制剂（Huang等人，2015）。FTO/MA的结构复合体清楚地阐明了MA选择性的基本原理，促进了强效FTO抑制剂的结构指导设计。为此，我们应用了以下两个原则：i）保持苄基羧酸作为MA的关键元素，使其对FTO的选择性高于ALKBH5，ii）将二氯取代的苯扩展到一个更深的口袋，这个口袋可以被一个庞大的配体完全占据（图1A和S1A）。抑制剂的合成涉及通过交叉偶联化学将5元杂环引入MA（图S1B）。其中，FB23在抑制FTO介导的去甲基化方面比MA更有效，IC50为0.06μM（图1B），因此比MA增加了140倍（Huang等人，2015）。

为了验证FB23与FTO的直接结合，我们建立了与FTO蛋白结合的FB23的共晶结构。通过分子置换解决了晶体结构，并将其精炼至2.20Å的分辨率（表S1）。与dm3T配体或抑制剂结合的FTO结构复合物的叠加显示，整体蛋白质折叠没有明显差异（图S1C）。2Fo-Fc密度图的轮廓为1.0σ（图1C），模拟退火Fo-Fc-OMIT密度图的曲线为3.0σ（图S1C），表明FB23显示出与底物结合位点互补的非凡形状，占据了整个结合袋。与FTO/MA复合物中观察到的相互作用类似，带有羧酸取代基的FB23中的苯环与核苷酸识别盖形成疏水相互作用，从而排除了与RNA脱甲基酶ALKBH5或DNA修复酶ALKBH2和ALKBH3的非特异性结合。FB23中的羧基与FTO Ser229残基的侧链直接发生氢键。在FB23中，一个氯原子直接与FTO的Arg96中的胍基团接触。此外，在FB23的延伸杂环中的氮或氧与FTO的Glu234的酰胺骨架之间观察到额外的氢键，这可能使抑制剂FB23对FTO的抑制活性比MA更强。总的来说，FTO/FB23结构表明FB23对FTCO具有特异性和更好的抑制作用。

我们进一步研究了FTO和FB23之间的相互作用。在Carr-Purcell Meiboom-Gill（CPMG）核磁共振（NMR）滴定中观察到信号的剂量依赖性衰减（图1D和S1D），还检测到正饱和转移差（STD）信号（图1D），这表明FTO干扰了FB23的状态。我们还进行了细胞热转移分析（CETSA），以进一步验证它们在细胞条件下的相互作用（Martinez-Molina等人，2013）。正如预期的那样，FB23的存在诱导了NB4和MONOMAC6 AML细胞中FTO蛋白的明显热转移（图1E）。因此，NMR滴定和CETSA分析进一步证明FB23是一种直接的FTO抑制剂。

---

FB23显示出适度的抗增殖作用，其衍生物（FB23-2）显示出显著提高的活性[1]
接下来，我们试图研究FB23对AML细胞的抗增殖作用。然而，FB23仅适度抑制NB4和MONOMAC6细胞的增殖，IC50分别为44.8μM和23.6μM（图1F）。通过LC-MS/MS分析检测，我们发现NB4细胞中FB23的细胞内浓度仅为0.02 nmol/百万，MONOMAC6细胞中为0.015 nmol/万（图1G）。因此，FB23对AML细胞增殖的有限抑制作用可能是由于FB23的低细胞摄取。

FTO/FB23复合物的结构表明，对FB23羧酸的优化不会干扰FTO的亲和力和特异性。为了提高FB23的渗透性，我们根据生物异构原理合成了苄基羧酸衍生物。苯甲羟肟酸，称为FB23-2（图1H和S1B），对NB4和MONOMAC6细胞的抗增殖活性显著提高，IC50为0.8-1.5μM（图1I），并在体外保持对FTO去甲基化的抑制活性（图1J）。为了确定绝对构型，我们确定了FB23-2的X射线晶体结构，该结构明确地显示了羟肟酸的氨基氢和羰基之间的分子内氢键（图1H，右图）。此外，我们使用核奥弗豪瑟效应（NOE）分析了FB23-2在溶液中的相对构型，NOE是核自旋极化通过空间而不是化学键的转移。NOESY光谱中H-1和H-10之间强烈的NOE相关性也支持分子内氢键（图S1E）。有了这些证据，FB23-2与FTO的对接导致FB23-2在与结合到FTO的抑制剂FB23的晶体学确定的结合模式完美重叠的位置上非常吻合（图S1F）。接下来，我们通过LC-MS/MS定量检测了FB23-2的细胞摄取（图1K）。值得注意的是，在MONOMAC6和NB4细胞中检测到FB23-2约为0.05-0.2 nmol/百万细胞，这比FB23的细胞摄取高出几倍（见图1G）。同时，在FB23-2处理的AML细胞中也检测到少量的FB23，这可能是FB23-2的水解产物。FB23-2细胞内浓度的增加可能有助于其改善AML细胞的抗增殖作用。

---

FB23和FB23-2在AML细胞中靶向与FTO KD相似的信号通路[1]
为了研究哪些基因和信号通路负责FTO抑制剂的抗白血病功能，我们对FTO KD、FB23处理或FB23-2处理的NB4 AML细胞以及对照细胞进行了转录组全RNA测序（RNA-seq）分析。通过对三种不同比较的独立分析，我们发现FTO KD、FB23治疗和FB23-2治疗都显著抑制了MYC靶点、E2F靶点和G2M检查点信号级联，这可能有助于FTO抑制剂和FTO KD对细胞周期和增殖的抑制作用（图5A和S3A-S3D）。此外，所有三种治疗均持续激活细胞凋亡和p53通路（图5A）。全球基因集富集分析（GSEA）表明，FTO-KD和FB23或FB23-2治疗在调节一组功能重要的信号通路方面显示出相似的效果（图S3E-S3G）。值得注意的是，FTO-KD增加的绝大多数途径（43个中的41条，95.3%）也可以被FB23-2富集（图5B和S3H）；同样，FB23-2抑制的大多数信号通路也受到FTO KD的抑制（图5C和S3H）。这些结果强烈表明，FTO抑制剂，尤其是FB23-2，对AML细胞中控制细胞周期、细胞增殖和细胞存活的关键信号通路具有与FTO KD相同的作用。

此外，我们将shFTO、FB23和FB23-2视为一个单独的组，并重新分析了该组和对照组（包括shNS组和DMSO组）之间的测序数据。FTO-KD和抑制持续刺激细胞凋亡和p53通路（图5D和S3I，以及表S4）；同时，MYC靶点、G2M检查点和E2F靶点被抑制（图5E和S3I以及表S4）。FB23-2治疗显著下调了富含MYC靶V1、MYC靶V2、E2F靶和G2M检查点特征的基因；同时，AML细胞中富含凋亡和p53通路特征的基因下调（图5F）。

Sprague Dawley (SD) 腹腔内单次剂量 3 mg/kg FB23 的药代动力学参数。 FB23 的 Cmax 和 Tmax 值分别为 142.5 ng/mL 和 0.4 小时[1]。

FTO抑制剂对COX-1和COX-2酶的影响[1]
按照制造商的方案，使用COX荧光抑制剂筛查试剂盒评估FTO抑制剂FB23和FB23-2对COX1和COX2酶的抑制作用。简而言之，COX-1和COX-2分别与受试化合物在室温下孵育5分钟，然后将10μl ADHP（10-乙酰基-3,7-二羟基吩恶嗪）加入样品和背景孔中（不含COX酶）。通过快速加入10μl花生四烯酸引发反应，并在室温下孵育2分钟。使用535nm的激发波长和595nm的发射波长来获得信号。

---

基于HPLC的RNA中m6A去甲基化抑制作用的测定[1]
体外ssRNA去甲基化是在对报告的测定进行了一些修改后进行的（Huang等人，2015）。将含有0.25μM FTOΔN31或3μM ALKBH5ΔN66、5μM 15-mer ssRNA（5′-AUGUCA（m6A）CAGCAGC-3′）、300μg、280μg（NH4）2Fe（SO4）2、2 mM L-抗坏血酸和所需浓度的抑制剂的反应在50 mM Tris-HCl（pH 7.5-8.0）中在25°C下孵育30分钟。在90°C下加热5分钟终止反应，然后用核酸酶P1和碱性磷酸酶消化混合物。使用非线性回归，在GraphPad Prism 5.0™上进行剂量反应拟合，根据指定浓度抑制剂存在下m6A去甲基化的抑制百分比对IC50值进行定量。所有反应均进行三次。

---

FTO/FB23配合物的结晶和结构测定[1]
在18°C下用悬滴蒸汽扩散法进行结晶。将8mg/ml的FTOΔN31蛋白与5倍FB23一起孵育，并与含有100mM柠檬酸钠（pH 5.4）、11.5%（w/v）聚乙二醇3350和8%异丙醇的储液混合。使用额外的20%（v/v）甘油对晶体进行冷冻保护。在上海同步辐射研究所（SSRF）的BL18U1和BL17U1光束线上收集了衍射数据。所有X射线数据均使用HKL2000程序进行处理（Otwinowski和Minor，1997），并在CCP4程序中转换为结构因子（协作计算项目，1994）。以FTO/MA复合物（PDB代码4QKN）的结构为搜索模型，在Phaser中通过分子置换求解结构。利用REFMAC5程序对结构复杂FTO/FB23模型进行了计算改进。

---

核磁共振（NMR）滴定[1]
磷酸盐缓冲液（20 mM磷酸钠（pH 7.4）、100 mM NaCl、5%DMSO）用于在布鲁克Avance III-600 MHz光谱仪上采集NMR数据，该光谱仪配备有25°C的低温冷却探头。实验样品分别含有200μM的FB23和0μM、1μM、2μM和3μM的FTO蛋白。

---

细胞热位移测定（CETSA）[1]
CETSA按照之前描述的方案进行（Martinez-Molina等人，2013）。收集NB4和MONOMAC6细胞，并在50 mM Tris-HCl（pH 7.5）、150 mM NaCl和2 mM DTT中裂解。将50μMFB23或DMSO加入上清液中，在25°C下孵育25分钟。在不同温度下变性5分钟后，对样品进行离心，并通过蛋白质印迹分析上清液。所有实验均一式三份。

细胞增殖试验将5000个细胞/孔NB4、FTO KO NB4和MONOMAC6 AML细胞接种并用DMSO或FTO抑制剂处理72小时。根据制造商的说明，用CellTiter 96®AQueous非放射性细胞增殖试验测定细胞增殖。接种10000个细胞/孔的人AML细胞（MA9.3ITD、MA9.3RAS、U937、ML2和MV4-11）和来自AML患者的四个原代细胞，并按指示进行FTO抑制剂处理96小时。将分离自AML小鼠的10000个细胞/孔MA9和FLT3/NPM1原代细胞以及5000个细胞/孔shNS和shFTO NB4细胞接种，并用FTO抑制剂处理24小时、48小时、72小时和96小时，以进行增殖测定。[1]

---

分别用10μM的FB23或FB23-2处理AML细胞NB4和MONOMAC6细胞24小时，以定量FB23FB23和FB23-2的细胞浓度。分析物在XSELECT™HSS T3柱（100 mm×3.0 mm，2.5μm；Waters，USA）上分离。用于洗脱的流动相为（A）0.1%（v/v）甲酸/水和（B）0.1%（v/v）甲酸-乙腈。质谱仪在负MRM模式下运行。对于FB23，母体到产物的转变分别为m/z 375.1→339.1、375.1→298.1，对于FB23-2，母体到产品的转变分别是m/z 390.3→318.0、390.3→289.9[1]。

Pharmacokinetics [1]
Inhibitor FB23-2 was formulated in DMSO at 3 mg/ml. SD rat (male, 7 – 8 weeks old, n = 3) were treated intraperitoneally with 1 ml/kg formulated compound. Blood samples were collected by retro-orbital bleeding at 5 min, 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 6, 8, and 24 hr after the intraperitoneal administration. Blood was collected into EDTA-containing tubes and plasma was obtained by centrifugation at 2,000 g for 5 min. FB23-2 and its hydrolysis metabolite FB23 concentrations in plasma were quantitated by LC-MS/MS method. Noncompartmental analysis with Phoenix 1.4 (Pharsight, USA) was used for all analytical measurements. Area under the concentration-time curve (AUC) was calculated using trapezoidal method. AUC0−∞ = AUC0-t + Ct/ke, ke is elimination rate constant. Elimination half-life (T1/2) = 0.693/ke, mean residence time (MRT) = AUMC/AUC.

---

Quantitation of FB23-2 in plasma [1]
Calibration curve concentrations ranged from 1.00 to 500 ng/ml for FB23-2 and FB23. 50 μl of rat plasma was precipitated by adding 150 μl acetonitrile immediately and vortexed to stabilize FB23-2 at each sample collection. 50 μl of study sample supernatant, 25 μl internal standard solution (probenecid and estrone-3-sulfate: 400/100 nmol/l), and 50.0 μl of 5 mM ammonium acetate solution (containing 0.1% formic acid) were added to a 1.5 ml polypropylene tube, then vortexed and centrifuged at 11,000 × g for 10 min, the supernatant was injected to LC-MS/MS. A LC-30AD liquid chromatographic system coupled to a Triple Quad 5500 mass spectrometer was used for acquiring LC-MS/MS data. Analytes were separated on an Eclipse Plus C18 column (100 mm × 4.6 mm I.D., 3.5 μm;). The mobile phases used for isocratic elution were 25% (A) 5 mM ammonium acetate-formic acid (100/0.1, v/v) and 75% (B) acetonitrile. The flow rate was 0.6 ml/min. The mass spectrometer was operated in the negative MRM mode. The parent-to-product transitions were m/z 390.2→318.0 for FB23-2, m/z 283.9→239.9 for probenecid (internal standard of FB23-2), m/z 375.2→298.2 for FB23, m/z 349.2→269.2 for estrone-3-sulfate (internal standard of FB23). The collision energy was set at −16, −30, −28, and −43 eV. The dwell time for each transition was set at 100 ms.

Microsomal stability assay [1]
The assay was conducted as the previously reported (Di et al., 2006). Briefly, 3 μM FB23-2 was incubated with 0.5 mg/ml rat liver microsomal protein at 37 °C in the presence of 1 mM NADPH cofactor. After incubation for 0, 5, 15, 30 and 60 min, respectively, cold acetonitrile was added to terminate the reactions. The solution was centrifuged, and the supernatants were analyzed using LC–MS/MS method similar with the quantitation of FB23 and FB23-2 in AML cells. The parent-to-product transition of probenecid, internal standard of FB23-2, was m/z 283.9→239.9. The formula for calculation was T1/2 = −0.693/k, and the inherent clearance rate CLint = (0.693/in vitro T1/2) × (incubation volume/mg of microsomal protein) × (mg of microsomal protein/gram of liver) × (gram of liver/kg body weight). Each time-point group includes two repeats.

[1]. Small-Molecule Targeting of Oncogenic FTO Demethylase in Acute Myeloid Leukemia. Cancer Cell. 2019 Apr 15;35(4):677-691.e10.

FTO, an mRNA N6-methyladenosine (m6A) demethylase, was reported to promote leukemogenesis. Using structure-based rational design, we have developed two promising FTO inhibitors, namely FB23 and FB23-2, which directly bind to FTO and selectively inhibit FTO's m6A demethylase activity. Mimicking FTO depletion, FB23-2 dramatically suppresses proliferation and promotes the differentiation/apoptosis of human acute myeloid leukemia (AML) cell line cells and primary blast AML cells in vitro. Moreover, FB23-2 significantly inhibits the progression of human AML cell lines and primary cells in xeno-transplanted mice. Collectively, our data suggest that FTO is a druggable target and that targeting FTO by small-molecule inhibitors holds potential to treat AML.[1]

---

Few inhibitors for regulation of RNA methylation have been characterized, which exists in sharp contrast to factors of DNA and histone epigenetics. Here we report that through structure-based rational designs, we have successfully developed more effective small-molecule inhibitors of FTO. The MA-derived inhibitor FB23 displays significantly improved inhibitory activity on FTO demethylation of m6A-RNA in vitro. Next, we optimized the physicochemical property of FB23, thus leading to the identification of FB23-2 with a significantly improved ability to hinder the proliferation of a panel of AML cell lines, and also inhibits primary AML LSCs in PDX mice, thus suggesting that FTO might serve as a potential molecular target in LSCs in order to inhibit leukemogenesis. The discovery of FB23-2 and its anti-proliferative effects on AML would increase the current intense interest in RNA methylation, especially with regard to the pharmacology.[1]

Importantly, we tend to show our inhibitors target FTO and impair its demethylation, and by targeting FTO our inhibitor causes a significant biological impact. We validated that the effects of FTO inhibitors on AML are linked to certain downstream targets, e.g., MYC, CEBPA, RARA, and ASB2 RNA transcripts. It remains unknown whether FB23-2 impairs FTO’s binding to target transcripts in cells, however. The target engagement of current inhibitors needs further explorations with a more depth, which could show the potential for these inhibitors to help propel the field of epitranscriptomics forward.

In summary, we provide here a proof-of-concept that small-molecule targeting of oncogenic FTO demethylase may be an effective therapeutic strategy for the treatment of AML. Our study demonstrates the feasibility of attenuated FTO demethylation for the induction of differentiation of AML cells. This effect is likely achieved through specifically regulating expression of critical genes and signalling pathways as a result of elevated m6A levels in mRNA transcripts of these genes that are induced by FTO inhibitors. As FTO-mediated demethylation has also been linked to a variety of cancer types, our findings may have a broad impact on cancer therapy by targeting epitranscriptomic RNA methylation.

C18H14CL2N2O3

377.22136259079

376.04

C, 57.31; H, 3.74; Cl, 18.80; N, 7.43; O, 12.72

2243736-35-6

138393314

White to off-white solid powder

5.7

75.4

2

5

4

25

469

0

ClC1C=C(C=C(C=1NC1C=CC=CC=1C(=O)O)Cl)C1C(C)=NOC=1C

VUXZATVQMFSUCM-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C18H14Cl2N2O3/c1-9-16(10(2)25-22-9)11-7-13(19)17(14(20)8-11)21-15-6-4-3-5-12(15)18(23)24/h3-8,21H,1-2H3,(H,23,24)

2-[2,6-dichloro-4-(3,5-dimethyl-1,2-oxazol-4-yl)anilino]benzoic acid

FB23; FB 23; FB23; 2243736-35-6; 2-((2,6-Dichloro-4-(3,5-dimethylisoxazol-4-yl)phenyl)amino)benzoic acid; 2-[[2,6-bis(chloranyl)-4-(3,5-dimethyl-1,2-oxazol-4-yl)phenyl]amino]benzoic acid; Fb23 inhibitor; CHEMBL4572939; SCHEMBL23261118; BDBM589235;FB-23

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~125 mg/mL (~331.37 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

---

注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

View More

注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

---

口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

View More

口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

---

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。