Fenobam

别名: Fenobam NPL2009 NPL-2009 非诺班;苯脲咪唑酮
目录号: V5980 纯度: ≥98%
Fenobam 是一种选择性、口服生物活性、BBB(血脑屏障)穿越 mGluR5 拮抗剂,作用于变构调节位点(大鼠和人重组 mGlu5 受体的 Kd 分别为 54 nM 和 31 nM)。
Fenobam CAS号: 57653-26-6
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
50mg
100mg
250mg
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产品描述
芬诺巴姆是一种选择性、口服生物活性、可穿过血脑屏障的mGluR5拮抗剂,作用于变构调节位点(在大鼠和人重组mGlu5受体上的Kd值分别为54 nM和31 nM)。芬诺巴姆具有反向激动剂活性,能以84 nM的IC50值阻断mGlu5受体活性。芬诺巴姆具有抗焦虑活性。
生物活性&实验参考方法
靶点
Metabotropic glutamate receptor 5 (mGluR5) negative allosteric modulator[2]
体外研究 (In Vitro)
与对照组相比,芬诺巴姆(300 µM)显著降低了人骨肉瘤LM7细胞(DAPI阳性)的总数和增殖细胞(Ki-67阳性)的数量,p值<0.001。[2]
芬诺巴姆(300 µM)处理诱导LM7细胞凋亡,TUNEL检测显示凋亡细胞百分比显著高于对照组(p<0.001)。[2]
芬诺巴姆对细胞增殖和存活的抑制作用不能被I组mGluR激动剂DHPG(50 µM)联合治疗逆转。[2]
芬诺巴姆对LM7细胞增殖的抑制作用与利鲁唑相当。细胞凋亡。[2]
体内研究 (In Vivo)
口服硫酸芬诺巴姆(30或60 mg/kg)可显著抑制大鼠静脉注射可卡因的自我给药,且呈剂量依赖性。可卡因输注总次数和主动按压杠杆次数均减少。
口服硫酸芬诺巴姆(30或60 mg/kg)呈剂量依赖性地使可卡因自我给药剂量反应曲线向下移动,尤其是在较低可卡因剂量(0.06、0.125、0.25 mg/kg/次输注)下,表明可卡因的奖赏效力降低。
口服硫酸芬诺巴姆(60 mg/kg,而非30 mg/kg)显著抑制了蔗糖诱导的大鼠蔗糖渴求行为的恢复。
口服硫酸芬诺巴姆(30或60 mg/kg)显著且呈剂量依赖性地抑制了可卡因启动(10 mg/kg,腹腔注射)的大鼠药物渴求行为的恢复。
口服芬诺巴姆硫酸芬诺巴姆(60 mg/kg)显著抑制了戒断21天后大鼠对可卡因的渴求(消退反应)的情境线索诱导潜伏期。口服硫酸芬诺巴姆(30或60 mg/kg)未产生镇静作用,也未损害大鼠的一般运动活性;在给予30 mg/kg后10分钟内观察到运动活性短暂增加。口服硫酸芬诺巴姆(30或60 mg/kg)显著降低了大鼠每小时口服蔗糖的自我给药频率,但并未改变90分钟测试期间的蔗糖总给药次数。[3]
细胞实验
增殖实验(免疫细胞化学):将LM7细胞接种于24孔板中聚赖氨酸包被的盖玻片上。24小时后,用Fenobam(300 µM)或其他药物处理细胞72小时。固定细胞,进行透化处理,并用抗Ki-67抗体和DAPI染色。使用荧光显微镜计数Ki-67阳性和DAPI阳性细胞。[2]
TUNEL实验(细胞凋亡):用Fenobam(300 µM)处理LM7细胞72小时。固定细胞,进行透化处理,并与含有TMR红色标记核苷酸的TUNEL试剂孵育。使用荧光显微镜对TUNEL阳性和DAPI阳性细胞进行计数。[2]
蛋白质印迹:使用针对mGluR5的抗体,通过SDS-PAGE和免疫印迹分析LM7细胞的全细胞提取物,以确认受体表达。[2]
动物实验
动物/疾病模型:雄性Long-Evans大鼠(250-300 g)[3]
剂量:30-60 mg/kg
给药途径:口服
实验结果:自我管理能力受到抑制
药代动力学研究:**两组Sprague-Dawley大鼠(每组n=6)分别单次口服芬诺巴姆游离碱或硫酸芬诺巴姆(30 mg/kg,基于无水游离碱当量)。芬诺巴姆游离碱首先溶解于10% DMSO中,然后用40%羟丙基-β-环糊精(BCD)溶液定容至最终浓度。硫酸芬诺巴姆溶解于40% BCD溶液中。在给药后24小时内的多个时间点,通过颈静脉导管采集血样。采用经验证的LC-MS/MS方法分析血浆中芬诺巴姆的浓度。[3] **可卡因自我给药:**雄性Long-Evans大鼠接受训练,在固定比率(FR)程序下进行静脉注射可卡因(0.5或1 mg/kg/次)的自我给药。一旦建立稳定的自我给药行为,动物在测试前30分钟口服硫酸芬诺巴姆(0、30或60 mg/kg,溶于40% BCD溶液)。此外,还采用单次给药、多次给药的可卡因自我给药范式,以测试不同剂量可卡因的作用。 [3]
**蔗糖自我给药:** 与可卡因自我给药类似,训练大鼠进行口服5%蔗糖溶液的自我给药。在测试前30分钟口服硫酸芬诺巴姆(0、30或60 mg/kg)。[3]
**恢复测试:** 首先训练动物进行可卡因或蔗糖的自我给药,然后进行消退训练。在恢复测试当天,动物在注射可卡因(10 mg/kg,腹腔注射)或非条件性蔗糖前30分钟口服硫酸芬诺巴姆(0、30或60 mg/kg)。在消退条件下(无药物/线索)记录按压杠杆的次数。 [3]
**运动活性:** 将未经训练的大鼠置于运动箱中进行适应性训练。在测试日,记录1小时的基线活动,然后动物口服硫酸芬诺巴姆(0、30或60 mg/kg,溶于40% BCD)。随后记录3小时的运动活性。[3]

药代动力学研究:两组Sprague-Dawley大鼠(每组n=6)分别单次口服游离碱芬诺巴姆硫酸芬诺巴姆(30 mg/kg,基于无水游离碱当量)。游离碱芬诺巴姆首先溶于10% DMSO,然后用40%羟丙基-β-环糊精(BCD)定容至最终浓度。硫酸芬诺巴姆溶于40% BCD。在给药后24小时内的多个时间点,通过颈静脉导管采集血样。采用经验证的LC-MS/MS方法分析血浆中芬诺巴姆的浓度。[3]
可卡因自我给药:雄性Long-Evans大鼠接受训练,在固定比率(FR)程序下进行静脉注射可卡因(0.5或1 mg/kg/次)的自我给药。一旦建立稳定的自我给药行为,动物在测试前30分钟口服硫酸芬诺巴姆(0、30或60 mg/kg,溶于40% BCD溶液)。此外,还采用单次给药、多次给药的可卡因自我给药范式,以测试不同剂量可卡因的作用。 [3]
蔗糖自我给药:与可卡因自我给药类似,训练大鼠进行口服5%蔗糖溶液的自我给药。在测试前30分钟口服硫酸芬诺巴姆(0、30或60 mg/kg)。[3]
恢复测试:首先训练动物进行可卡因或蔗糖的自我给药,然后进行消退训练。在恢复测试当天,在注射可卡因(10 mg/kg,腹腔注射)或非条件性蔗糖前30分钟,动物口服硫酸芬诺巴姆(0、30或60 mg/kg)。在消退条件下(无药物/线索)记录按压杠杆的次数。[3]
运动活性:将未经训练的大鼠适应运动箱。在测试日,记录动物1小时的基线活动,然后口服硫酸芬诺巴姆(0、30或60 mg/kg,溶于40% BCD溶液)。之后再记录3小时的运动活动。[3]
药代性质 (ADME/PK)
芬诺巴姆游离碱相比,大鼠口服芬诺巴姆硫酸盐(30 mg/kg)后,血浆峰浓度(Cmax)更高,平均半衰期(T1/2)更长,血浆浓度-时间曲线下面积(AUC)也显著增大。硫酸盐制剂的口服生物利用度约为游离碱的2~3倍。
Cmax和AUC的比较采用非配对双尾t检验。[3]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
在运动活性测试中,口服硫酸芬诺巴姆(30 或 60 mg/kg)未引起镇静或运动障碍。在给予 30 mg/kg 剂量后 10 分钟内观察到短暂的运动增加,但此后未观察到明显的抑制作用。这表明在这些剂量下,芬诺巴姆对大鼠没有急性中枢神经系统抑制毒性。[3]
参考文献

[1]. Fenobam: a clinically validated nonbenzodiazepine anxiolytic is a potent, selective, and noncompetitive mGlu5 receptor antagonist with inverse agonist activity. J Pharmacol Exp Ther. 2005 Nov;315(2):711-21.

[2]. Osteosarcoma cell proliferation and survival requires mGluR5 receptor activity and is blocked by Riluzole. PLoS One. 2017 Feb 23;12(2):e0171256.

[3]. Fenobam sulfate inhibits cocaine-taking and cocaine-seeking behavior in rats: implications for addiction treatment in humans. Psychopharmacology (Berl). 2013;229(2):253-265.

其他信息
1-(3-氯苯基)-3-(3-甲基-5-氧代-4H-咪唑-2-基)脲是一种脲类化合物。芬诺巴姆(Fenobam)正在临床试验 NCT00637221 中进行研究(一项开放标签研究,旨在评估 50 mg 至 150 mg 无水芬诺巴姆在脆性 X 综合征成人患者中进行前脉冲抑制测试和连续操作任务的安全性和有效性)。芬诺巴姆被描述为 mGluR5 的特异性负变构调节剂。[2] 使用芬诺巴姆阻断 mGluR5 可显著抑制人骨肉瘤 LM7 细胞的增殖并诱导其凋亡,表明 mGluR5 活性是其生长和存活所必需的。[2] 芬诺巴姆的作用与利鲁唑(Riluzole)类似,后者可抑制谷氨酸释放。[2] 通过蛋白质印迹法证实了 LM7 细胞中 mGluR5 的表达。[2] 该研究表明使用变构调节剂如芬诺巴姆(Fenobam)靶向mGluR5可能是治疗骨肉瘤的一种潜在策略。[2]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
精确质量
266.057
CAS号
57653-26-6
PubChem CID
135659063
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.47 g/cm3
折射率
1.668
LogP
1.126
tPSA
73.8
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
2
可旋转键数目(RBC)
1
重原子数目
18
分子复杂度/Complexity
385
定义原子立体中心数目
0
SMILES
CN1CC(=O)NC1=NC(=O)NC2=CC(=CC=C2)Cl
InChi Key
DWPQODZAOSWNHB-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C11H11ClN4O2/c1-16-6-9(17)14-10(16)15-11(18)13-8-4-2-3-7(12)5-8/h2-5H,6H2,1H3,(H2,13,14,15,17,18)
化学名
(3Z)-1-(3-chlorophenyl)-3-(1-methyl-4-oxoimidazolidin-2-ylidene)urea
别名
Fenobam NPL2009 NPL-2009
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~100 mg/mL (~374.98 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

临床试验信息
NCT Number Recruitment interventions Conditions Sponsor/Collaborators Start Date Phases
NCT01806415 COMPLETED Drug: Fenobam
Drug: Placebo
Healthy Washington University School of Medicine 2013-05 Phase 1
NCT01981395 COMPLETED Drug: Fenobam
Drug: Placebo
Allodynia
Hyperalgesia
Laura Cavallone 2014-01 Phase 1
生物数据图片
  • PK Study: Fenobam plasma concentration curves after 50 mg,100 mg, and 150 mg oral doses. Curves of individual subjects are shown in A (50 mg), B (100 mg), and C (150 mg): each symobl/line combination represents a different subject for each group.[2]. Laura F, et al. The Metabotropic Glutamate Receptor 5 Negative Allosteric Modulator Fenobam: Pharmacokinetics, Side Effects, and Analgesic Effects in Healthy Human Subjects.bioRxiv 391383.
  • Hyperalgesia Study: fenobam plasma concentration following 150 mg oral dose. Median values (Min-Max) at different time points in relation to the start of the skin sensitization procedures (time 0) are shown.[2]. Laura F, et al. The Metabotropic Glutamate Receptor 5 Negative Allosteric Modulator Fenobam: Pharmacokinetics, Side Effects, and Analgesic Effects in Healthy Human Subjects.bioRxiv 391383.
  • von Frey (A) and brush (B) areas of cutaneous hypersensitivity measured immediately after sensitization (M-test time-point) on Session 1 (S1) compared to areas on Training Day. Median; minimum; maximum values of areas; lower and upper quartiles are shown. The difference between median Training Day areas (no treatment) and median areas on Session 1 is significant when fenobam is administered [*p = 0.025 (von Frey, panel A); *p = 0.028 (brush, panel B)] but not when placebo is administered.[2]. Laura F, et al. The Metabotropic Glutamate Receptor 5 Negative Allosteric Modulator Fenobam: Pharmacokinetics, Side Effects, and Analgesic Effects in Healthy Human Subjects.bioRxiv 391383.
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