Fludioxonil   中文名称: 咯菌酯

Fludioxonil targets fungal cells by inhibiting mitogen-activated protein kinase (MAPK) in osmotic signal transduction. It binds to copper ions and prevents ATP binding to ATP-binding cassette (ABC) transporter proteins within fungal cells, disrupting the mitochondrial electron transport chain and leading to apoptosis.

氟啶虫酰胺能有效抑制灰葡萄孢菌和核盘菌等真菌病原体的生长。它能破坏细胞骨架完整性，诱导DNA损伤，并促进小鼠神经胶质瘤细胞凋亡。当与靶向真菌抗氧化应激反应的小檗碱和酚类化合物联合使用时，该化合物的活性会增强。

氟啶虫酰胺作为种子处理剂和采后真菌感染防治剂，在体内表现出显著的杀菌效果。它具有非内吸性作用和长效残留活性，能够抑制葡萄糖的转运相关磷酸化，从而减少菌丝生长。但其在植物组织中的吸收和治疗效果通常有限。

对于非细胞酶/受体结合试验，可使用放射性配体结合研究来评估氟啶虫酰胺与真菌 MAPK 通路或 ABC 转运蛋白的相互作用。该化合物与铜离子的结合亲和力及其对 ATP 与转运蛋白结合的影响，可在无细胞体系中使用 ATPase 活性测定或等温滴定量热法测定，以确定结合常数和抑制参数。

氟啶虫酰胺的体外细胞活性测定包括用不同浓度的该化合物处理真菌细胞培养物（例如灰葡萄孢菌、核盘菌或小鼠神经胶质瘤细胞）。细胞生长抑制率可通过光密度或菌落计数法测定。细胞凋亡可通过Annexin V/PI染色流式细胞术进行评估，而细胞骨架完整性和DNA损伤则可通过荧光显微镜和适当的染色剂进行评估。

氟啶虫酰胺的体内动物实验通常包括将该化合物施用于感染真菌的植物模型或实验动物，以评估其疗效和毒性。在植物研究中，用氟啶虫酰胺处理种子或作物，并监测疾病进展。在啮齿动物模型中，采用口服或皮肤给药来评估毒理学终点，并观察临床症状、死亡率和组织病理学变化。

吸收、分布和排泄
本研究探讨了¹⁴C-吡咯标记的氟啶虫酰胺在山羊体内的代谢情况……两只山羊连续四天口服饲喂浓度相当于饲料中100 ppm的放射性标记氟啶虫酰胺。第四天，以氟啶虫酰胺计的放射性残留量分别为：里脊肉0.07 mg/kg，脂肪0.19 mg/kg，肝脏5.8 mg/kg，肾脏2.9 mg/kg，乳汁2.2 mg/kg。经有机溶剂萃取后，肝脏释放出35%的放射性残留，肌肉释放出76%，肾脏释放出50%，脂肪释放出35%，乳汁释放出87%，乳汁释放出90%。用蛋白酶处理肝脏、肾脏和肌肉溶剂萃取后的固体残渣，可释放出剩余放射性的75-91%。经2,4-二硝基氟苯衍生化后，释放的放射性物质中只有不到一半被鉴定为蛋白质。
连续八天，五只产蛋鸡饲喂含有[(14)C-吡咯]氟尼康的明胶胶囊，饲料添加量相当于约89 ppm。绝大多数放射性标记残留物随粪便排出（占总剂量的88-102%）。以氟尼康计，组织和鸡蛋中的放射性残留物含量如下：肝脏，8.9 mg/kg；肌肉，0.12 mg/kg；脂肪皮，0.25 mg/kg；腹膜脂肪，0.17 mg/kg；蛋黄，1.8 mg/kg（第7天）；蛋清，0.054 mg/kg（第7天）。一系列有机溶剂萃取实验表明，肝脏、肾脏、肌肉、脂肪皮、蛋清和蛋黄分别释放了61%、33%、62%、42%、74%和83%的放射性物质（TRR）。将肝脏（33% TRR）、肾脏（54%）和肌肉（34%）溶剂萃取后的剩余固体用蛋白酶溶解，并用2,4-二硝基氟苯进行表征。蛋白酶溶解了肝脏中54%、肾脏中63%和肌肉中67%的未萃取放射性物质。在pH 2条件下，约25%的释放放射性物质（<10% TRR）被2,4-二硝基氟苯衍生化，表明氨基末端存在氨基。碱性水解（15% KOH，95°C）从溶剂萃取的肝脏中释放出所有剩余的放射性物质（33% TRR），但这些放射性物质只能被鉴定为酸性极性化合物。在鸡蛋、肝脏、肾脏、肌肉和脂肪皮中分别检测到约 69%、24%、14%、44% 和 29% 的 TRR……
在一项饲喂试验中，三组奶牛（每组三头牛）分别饲喂添加了 0.55 ppm、1.6 ppm 或 5.5 ppm 氟啶虫酰胺的日粮，持续 28-30 天。氟啶虫酰胺及其代谢物（采用 CGA-192155 (2,2-二氟苯并[1,1]二恶烷-4-羧酸) 测定）的残留仅在最高饲喂水平 (5.5 ppm) 下可检测到……在反刍动物组织中，饲喂水平分别为计算日粮负荷的 60 倍（奶牛）和 80 倍（肉牛）时，均未检测到可定量残留。在 5.5 ppm 的饲喂水平下，氟吡呋喃酮及其代谢物在肝脏和肾脏中的浓度分别为 0.014–0.017 mg/kg 和 0.022–0.025 mg/kg。在脂肪或肌肉中未检测到氟吡呋喃酮。氟吡呋喃酮的经皮吸收率（不包括与皮肤结合的物质）在体内大鼠中较低 (< 5%)，在体外人体皮肤中也较低 (< 0.5%)。在一项体外大鼠皮肤渗透研究中，低剂量下的皮肤吸收率与体内结果相当（< 2%），但高剂量下，皮肤吸收率显著高估了体内吸收率（38%）。代谢物/代谢物：两只山羊连续四天口服放射性标记的氟吡呋喃酮，剂量相当于饲料中100 ppm的浓度……在肌肉中鉴定出的主要成分是氟吡呋喃酮，分别占两只山羊总残留量的24%和43%。同样，氟啶虫酰胺也是网膜脂肪残留物的主要成分，占总残留量的83%。在肌肉中鉴定出的主要代谢物是氟啶虫酰胺2-羟基或5-羟基衍生物的硫酸盐结合物（分别占总残留量的22%和2%）。在肌肉组织中鉴定出的次要代谢物（< 10% TRR）包括氟啶虫酰胺2-O-葡萄糖醛酸苷和5-O-葡萄糖醛酸苷衍生物。（位置编号指吡咯环。）肌肉组织中约50%的残留物和脂肪组织中约83%的残留物被鉴定。肾脏和肝脏中发现了多种成分。在肾脏中鉴定出的成分包括：氟啶虫酰胺2-O-葡萄糖醛酸苷衍生物（23% TRR）；7'-O-葡萄糖醛酸苷衍生物（8% TRR）；5-O-葡萄糖醛酸苷衍生物（15% TRR）；氟啶虫酰胺（2% TRR）；以及2-或5-O-硫酸酯（0.7% TRR），总鉴定率为48%。在肝脏中，仅鉴定出氟啶虫酰胺（14% TRR）。此外，还发现了两种不稳定化合物（24% TRR）。未检测到不含吡咯-苯基连接的化合物。连续八天，五只产蛋鸡饲喂含有[(14)C-吡咯]氟啶虫酰胺的明胶胶囊，饲喂量相当于饲料中氟啶虫酰胺的浓度约为89 ppm……在鸡蛋中检测到的主要代谢物为氟啶虫酰胺1-羟基衍生物的硫酸盐结合物（占总回收率的40%）、琥珀酸衍生物（占总回收率的10%）以及2-羟基或5-羟基衍生物的硫酸盐结合物（占总回收率的13%）。鸡蛋中氟啶虫酰胺的浓度较低（占总回收率的2.1%）。在肝脏中，仅检测到显著的代谢物琥珀酸衍生物，其占总回收率约为6%。在肾脏中鉴定出的代谢物包括2-羟基或5-羟基衍生物的葡萄糖醛酸苷结合物（占总参考值4.7%）、氟啶虫酰胺（占总参考值2.6%）和7'-羟基衍生物（占总参考值2.8%）。在胸肌中，鉴定出的主要成分是氟啶虫酰胺（占总参考值29%）和1-羟基衍生物的硫酸盐结合物。在附着脂肪的皮肤中也观察到了类似的结果，其中含有氟啶虫酰胺（占总参考值9.8%）和1-羟基衍生物的硫酸盐结合物（占总参考值14%）。基于对鸡代谢的特征分析和鉴定，得出结论：家禽代谢涉及吡咯环C-2、C-5和N-1位以及苯并二恶烷环C-7'位的氧化。随后形成硫酸盐或葡萄糖醛酸苷结合物。 C-2羟基吡咯进一步氧化生成2,5-二氧代-2,5-二氢吡咯和琥珀酸衍生物。后两种化合物是家禽特有的。在母鸡中发现的其他代谢物以及在反刍动物中发现的所有代谢物，也在大鼠中发现。氟吡呋喃酮及其代谢物（鉴定为2,2-二氟-1,3-苯并二恶烷-4-羧酸）在冷冻肌肉中至少稳定12个月，在冷冻肝脏、牛奶和鸡蛋中至少稳定18个月。口服放射性标记的氟吡呋喃酮后，放射性标记物质被迅速且广泛吸收（约占给药剂量的80%），分布广泛，代谢广泛，并迅速排泄，主要经粪便（约占80%）和胆汁（约占70%）排出，少量经尿液（约占20%）排出。给药后1小时内即可达到血浆峰浓度。氟吡呋喃酮的消除呈双相性，第一相半衰期为2至5小时，第二相半衰期为30至60小时。氟吡呋喃酮从血液和组织中迅速清除，因此蓄积量极少。氟吡呋喃酮的代谢主要通过吡咯环的氧化进行，产生一种主要代谢物（占给药剂量的57%）和一种次要代谢物（占给药剂量的4%）。苯环羟基化生成相应的酚类代谢物，约占给药剂量的2%。这些I期代谢物随后以葡萄糖醛酸和硫酸盐结合物的形式排出体外，约占给药剂量的75%，此外还有未吸收和未代谢的氟啶虫酰胺。羟基吡咯代谢物的二聚化生成深蓝色代谢物。在一项饲喂试验中，三组奶牛（每组三头）分别饲喂添加0.55 ppm、1.6 ppm或5.5 ppm氟啶虫酰胺的日粮，饲喂28-30天。氟啶虫酰胺及其代谢物（采用 CGA-192155 (2,2-二氟苯并[1,1]二恶烷-4-羧酸) 测定）的残留量仅在最高饲喂水平 (5.5 ppm) 下可定量……仅分析了饲喂 5.5 ppm 日粮的奶牛的组织样本。未检测到氟啶虫酰胺及其代谢物的残留量。肌肉中的定量限 (LOQ) 为 0.01 mg/kg，肝脏、肾脏和脂肪组织（鼻周脂肪和网膜）中的定量限为 0.05 mg/kg。有机腈在肝脏中经细胞色素 P450 酶转化为氰离子。氰离子被迅速吸收并分布于全身。氰离子主要经硫氰酸酯酶或 3-巯基丙酮酸硫转移酶代谢为硫氰酸盐。氰化物代谢物经尿液排出。(L96)

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生物半衰期
口服放射性标记的氟啶酰胺后，放射性标记物质被迅速且广泛吸收（约占给药剂量的80%），分布广泛，代谢广泛，并迅速排泄，主要经粪便（约80%）和胆汁（约70%）排出，少量经尿液排出（约20%）。给药后1小时内达到血浆峰浓度。消除过程为双相，第一相半衰期为2至5小时，第二相半衰期为30至60小时。
氟啶酰胺具有非全身性药代动力学特性，且残留活性持久。作为一种小分子亲脂性化合物（分子量 248.19），预计其具有良好的组织渗透性，但全身分布有限。该化合物主要通过细胞色素 P450 酶代谢，其残留物会长期存在于处理过的表面上，且在环境中降解缓慢。

氟啶虫酰胺的主要毒性机制是其腈基产生有毒的氰离子或氰化氢。氰离子抑制线粒体电子传递链中的细胞色素c氧化酶，从而破坏有氧ATP的生成。依赖有氧呼吸的组织，例如中枢神经系统和心脏，尤其受到影响。氰离子还会与过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和其他酶结合。目前尚未发现对人类具有致癌性。

[1]. effect of phenylpyrrole fungicide fludioxonil on morphological and physiological characteristics of Sclerotinia sclerotiorum. Pesticide Biochemistry and Physiology Volume 106, Issues 1-2, May-June 2013, Pages 61-67.

氟啶虫酰胺是一种苯并二恶烷类化合物，分子式为2,2-二氟-1,3-苯并二恶烷，其4位被3-氰基吡咯-4-基取代。它是一种用于种子处理的杀菌剂，可防治多种病害，包括镰刀菌、丝核菌和链格孢菌病。氟啶虫酰胺具有双重作用，既是雄激素拮抗剂，又是雌激素受体激动剂，同时也是一种抗真菌杀虫剂。它属于苯并二恶烷、吡咯、腈和有机氟化合物类化合物。氟啶虫酰胺是一种用于种子处理的杀菌剂，可防治多种病害，包括镰刀菌、丝核菌和链格孢菌病。它具有非内吸性和长效残留作用。它还能抑制葡萄糖转运相关的磷酸化，从而抑制菌丝生长。
氟啶虫酰胺已注册用于农业，用作种子处理剂和采后保护剂。它对多种真菌病害有效，并以Saphire和Scholar等商品名上市销售。该化合物被列为运输危险品。研究还探索了它通过雌激素受体依赖性途径对癌细胞生长和转移的影响。

C12H6F2N2O2

248.1888

248.039

131341-86-1

86398

White to off-white solid powder

1.6±0.1 g/cm3

420.4±45.0 °C at 760 mmHg

199.4°

208.0±28.7 °C

0.0±1.0 mmHg at 25°C

1.622

3.67

58.04

1

5

1

18

382

0

MUJOIMFVNIBMKC-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C12H6F2N2O2/c13-12(14)17-10-3-1-2-8(11(10)18-12)9-6-16-5-7(9)4-15/h1-3,5-6,16H

4-(2,2-difluoro-1,3-benzodioxol-4-yl)-1H-pyrrole-3-carbonitrile

CGA 173506; Fludioxonil

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。