| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 100μg |
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| 500μg |
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| Other Sizes |
| 靶点 |
Ca2+ indicator
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
fluo - 4am是一种荧光染料（λex=494 nm, λem=516 nm）。预装fu -4 AM，可以观察到非常明亮的荧光图像。在负载了fluo-3 am的细胞的平行实验中，得到的荧光图像，虽然在这种情况下清晰可辨，但不是很亮[1]。
这是我们的建议。本协议仅为指南，可根据您的具体需求进行修改)。 1. 计数细胞，每个样本取106个细胞（对照和实验）。 2. 收集细胞（5分钟，3000×g, 4℃），PBS洗涤1次。 3. 用0.5 ml PBS重新悬浮细胞，加入0.5ul Fluo-4-AM （1 mM原液）至终浓度为1 μM。37℃孵育1小时。 4. 用PBS洗涤细胞3次（2分钟，3000×g），最后用1ml PBS重新悬浮。分为2根流式细胞仪管，每根0.5 ml。 5. 用流式细胞术评价染色结果，用CellQuest软件及其他软件分析数据。 |
| 细胞实验 |
用Fluo-4 AM （5 μM, Molecular Probes）在22±2°C下负载细胞30分钟。然后用1-2 ms电流脉冲通过两个铂电极以0.5 Hz的频率对细胞进行场刺激。使用配备63×水浸物镜（NA:1.2）的LSM510 Meta蔡司共聚焦显微镜沿细胞长轴以线扫描模式（1.5 ms/线）测量Fluo-4荧光的变化。激发波长为488 nm，发射光通过505 nm的长通滤光片采集。为了便于细胞间的比较，荧光变化（ΔF）除以测试脉冲前检测到的荧光（F0）。通过测量快速施用咖啡因（10 mM）诱导的胞质Ca2+瞬态振幅来评估SR-Ca2+含量。在静息细胞中，经过5分钟的刺激，记录了自发的Ca2+火花，以达到稳态SR-Ca2+含量。在检测到最大表面的焦平面上估计细胞大小。[2]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
We have developed fluo-4, a new fluorescent dye for quantifying cellular Ca2+ concentrations in the 100 nM to 1 microM range. Fluo-4 is similar in structure and spectral properties to the widely used fluorescent Ca(2+)-indicator dye, fluo-3, but it has certain advantages over fluo-3. Due to its greater absorption near 488 nm, fluo-4 offers substantially brighter fluorescence emission when used with excitation by argon-ion laser or other sources in conjunction with the standard fluorescein filter set. In vitro, fluo-4 exhibited high fluorescence emission, a high rate of cell permeation, and a large dynamic range for reporting [Ca2+] around a Kd(Ca2+) of 345 nM. We have also developed several Ca(2+)-indicators related to fluo-4 having lower affinities for Ca2+ that are useful in cellular studies requiring quantification of higher [Ca2+]. In a variety of physiological studies of live cells, fluo-4 labeled cells more brightly than did fluo-3, when challenged with procedures designed to elevate calcium levels. Fluo-4 is well suited for photometric and imaging applications that make use of confocal laser scanning microscopy, flow cytometry, or spectrofluorometry, or in fluorometric high-throughput microplate screening assays. Because of its higher fluorescence emission intensity, fluo-4 can be used at lower intracellular concentrations, making its use a less invasive practice.[1]
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| 分子式 |
C51H50F2N2O23
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|---|---|
| 分子量 |
1096.93912363052
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| 精确质量 |
1096.28
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| CAS号 |
273221-67-3
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| PubChem CID |
4060965
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| 外观&性状 |
Brown to red solid powder
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| 密度 |
1.47
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| LogP |
4.376
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| tPSA |
301.08
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
27
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| 可旋转键数目(RBC) |
36
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| 重原子数目 |
78
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| 分子复杂度/Complexity |
2220
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
QOMNQGZXFYNBNG-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C51H50F2N2O23/c1-28-7-9-39(54(19-47(62)74-24-69-30(3)57)20-48(63)75-25-70-31(4)58)45(13-28)66-11-12-67-46-14-34(8-10-40(46)55(21-49(64)76-26-71-32(5)59)22-50(65)77-27-72-33(6)60)51-35-15-37(52)41(61)17-42(35)78-43-18-44(38(53)16-36(43)51)73-23-68-29(2)56/h7-10,13-18H,11-12,19-27H2,1-6H3
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| 化学名 |
acetyloxymethyl 2-[2-[2-[5-[3-(acetyloxymethoxy)-2,7-difluoro-6-oxoxanthen-9-yl]-2-[bis[2-(acetyloxymethoxy)-2-oxoethyl]amino]phenoxy]ethoxy]-N-[2-(acetyloxymethoxy)-2-oxoethyl]-4-methylanilino]acetate
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| 别名 |
fluo-4 am; 273221-67-3; FLUO-4-AM FOR FLUORESCENCE PGE. WITH 5; M7XMU4W82G; FLUO-4 AM [MI]; N-[4-[6-[(Acetyloxy)methoxy]-2,7-difluoro-3-oxo-3H-xanthen-9-yl]-2-[2-[2-[bis[2-[(acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]amino]-5-methylphenoxy]ethoxy]phenyl]-N-[2-[(acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]glycine (acetyloxy)methyl ester; Glycine, N-[4-[6-[(acetyloxy)methoxy]-2,7-difluoro-3-oxo-3H-xanthen-9-yl]-2-[2-[2-[bis[2-[(acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]amino]-5-methylphenoxy]ethoxy]phenyl]-N-[2-[(acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]-, (acetyloxy)methyl ester; Glycine, N-(4-(6-((acetyloxy)methoxy)-2,7-difluoro-3-oxo-3H-xanthen-9-yl)-2-(2-(2-(bis(2-((acetyloxy)methoxy)-2-oxoethyl)amino)-5-methylphenoxy)ethoxy)phenyl)-N-(2-((acetyloxy)methoxy)-2-oxoethyl)-, (acetyloxy)methyl ester;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 (2). 该产品在溶液状态不稳定，请现配现用。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.9116 mL | 4.5581 mL | 9.1163 mL | |
| 5 mM | 0.1823 mL | 0.9116 mL | 1.8233 mL | |
| 10 mM | 0.0912 mL | 0.4558 mL | 0.9116 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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