FRAX486

别名: FRAX486; FRAX 486; FRAX-486
目录号: V21362 纯度: ≥98%
FRAX486 是一种新型、有效的 p21 激活激酶 (PAK) 抑制剂(PAK1、PAK2、PAK3 和 PAK4 的 IC50 分别为 14、33、39 和 575 nM)。
FRAX486 CAS号: 1232030-35-1
产品类别: PAK
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
10mg
25mg
50mg
100mg
250mg
500mg
1g
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纯度/质量控制文件

纯度: ≥98%

产品描述
FRAX486 是一种新型高效的 p21 激活激酶 (PAK) 抑制剂(对 PAK1、PAK2、PAK3 和 PAK4 的 IC50 值分别为 14、33、39 和 575 nM)。FRAX486 能够逆转癫痫发作以及多动症和重复运动等行为异常,这一事实支持了“逆转脊髓异常的药物疗法也能治疗神经系统和行为学症状”的假设。在成年 Fmr1 基因敲除小鼠中,单次注射 FRAX486 即可恢复所有这些表型,这表明 FXS 成年患者的诊断后治疗可以迅速启动。体外和体内实验均表明,FRAX486 可减少青春期晚期精神分裂症相关的树突棘退化。
FRAX486(CAS号:1232030-35-1,分子量513.39,分子式C25H23Cl2FN6O)是一种强效的p21活化激酶(PAK)抑制剂。其对PAK1、PAK2、PAK3和PAK4的IC50值分别为14 nM、33 nM、39 nM和575 nM。FRAX486能够穿过血脑屏障,给药后1小时即可到达大脑,并在大脑中停留长达24小时。
生物活性&实验参考方法
靶点
PAK1 (IC50 = 14 nM); PAK2 (IC50 = 33 nM); PAK3 (IC50 = 39 nM); PAK4 (IC50 = 575 nM)
FRAX486 targets p21-activated kinases (PAKs), specifically PAK1, PAK2, PAK3, and to a lesser extent PAK4. PAKs are serine/threonine kinases that play roles in cell proliferation, migration, and survival. By inhibiting PAK1, PAK2, and PAK3 with high potency (IC50 values of 14, 33, and 39 nM, respectively), FRAX486 blocks downstream signaling pathways.
体外研究 (In Vitro)
FRAX486 可导致 WPMY-1 细胞中肌动蛋白丝的降解,且呈浓度依赖性(1–10 μM)。在 1 至 10 μM 的 FRAX486 浓度范围内,也观察到细胞增殖速率的降低。在 WPMY-1 细胞中,FRAX486 的细胞毒性具有浓度和时间依赖性。早在 1–5 μM 的浓度下,FRAX486 就对 WPMY-1 细胞的肌动蛋白组织、存活和增殖产生影响。虽然在这些浓度下可能仅部分抑制 PAK4,但可以预期 PAK1-3 会被完全抑制[2]。体外实验表明,FRAX486 是一种强效的 PAK 抑制剂,对 PAK1、PAK2、PAK3 和 PAK4 的 IC50 值分别为 14、33、39 和 575 nM。激酶活性测定已证实其对 I 组 PAK 具有强效且选择性的抑制作用。它具有穿透细胞的能力已得到证实。
体内研究 (In Vivo)
FRAX486能够穿过血脑屏障。给药后1小时即可到达大脑,并在大脑中停留长达24小时。其在靶组织中的最大浓度在8小时后达到。每日给药后,大脑中FRAX486的水平趋于稳定。FRAX486并非仅仅降低棘突密度(无论基因型或表型如何),而是特异性地挽救了Fmr1基因敲除小鼠的棘突表型,该表型存在于顶端神经元中。此外,FRAX486还能减轻刻板行为和多动症,这两种特征是脆性X综合征小鼠模型的特征[3]。
在体内,FRAX486能够穿过血脑屏障。给药后1小时即可到达大脑,并在大脑中停留长达24小时,其在靶组织中的最大浓度在8小时后达到。这使其成为研究中枢神经系统中PAK功能的重要工具。
酶活实验
FRAX486 的体外激酶活性测定旨在评估其对 PAK1、PAK2、PAK3 和 PAK4 活性的抑制作用。将该化合物与每种激酶和肽底物在 ATP 存在下孵育。IC50 值由剂量反应曲线确定。
细胞实验
将WPMY-1细胞以50,000个/孔的密度接种于16孔盖玻片上。培养24小时后,分别用FRAX486(1、5、10 μM)、IPA3(1、5、10 μM)或DMSO处理细胞。再过24小时后,将培养基更换为含有10 mM 5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)的无胎牛血清(FCS)培养基,该培养基中含有溶剂或抑制剂。20小时后,用3.7%甲醛固定细胞。采用“EdU-Click 555”细胞增殖分析法检测EdU的掺入情况。该分析法利用荧光标记的5-羧基四甲基罗丹明(5-TAMRA)检测EdU掺入DNA的量。所有细胞核均用DAPI进行复染。荧光显微镜用于检测细胞(发射波长:479 nm;激发波长:546 nm)。
FRAX486 的体外细胞实验包括用该化合物处理细胞并测量 PAK 磷酸化水平。在多种细胞系中评估其对细胞增殖、迁移和存活的影响。这些实验证实了其细胞穿透能力。
动物实验
小鼠:使用禁食的雄性C57BL/6小鼠。FRAX486的静脉注射剂量为3 mg/kg,配制浓度为1 mg/mL的20% (w/v) 2-羟丙基-β-环糊精水溶液;口服剂量为30 mg/kg,配制浓度为3 mg/mL的水溶液。在体内试验中,FRAX486于出生后第35天至第60天之间每日腹腔注射一次[10 μg/g体重],使脑内药物浓度超过175 nM。
已开展FRAX486的体内动物实验以评估其脑渗透性。实验中,给动物注射该化合物,并在不同时间点测量其脑内药物浓度。同时,也评估了其对脑内PAK信号通路的影响。
药代性质 (ADME/PK)
FRAX486的分子量为513.39,分子式为C25H23Cl2FN6O。其密度为1.4±0.1 g/cm3,沸点为689.9±65.0 °C。纯度>98%。通常储存在-20°C。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
FRAX486仅供研究使用,不可用于人体。其安全性正在临床前研究中进行评估。作为一种强效的PAK抑制剂,其毒性与其作用机制相关。操作时应采取标准安全预防措施。
参考文献

[1]. Proc Natl Acad Sci U S A . 2014 Apr 29;111(17):6461-6.

[2]. PLoS One . 2016 Apr 12;11(4):e0153312.

[3]. Proc Natl Acad Sci U S A . 2013 Apr 2;110(14):5671-6.

其他信息
FRAX486 是一种强效的 PAK 抑制剂,对 PAK1、PAK2、PAK3 和 PAK4 的 IC50 值分别为 14、33、39 和 575 nM。它能够穿过血脑屏障,快速到达大脑并在脑内停留长达 24 小时。它是一种用于研究 PAK 在中枢神经系统中功能的化合物。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C25H23CL2FN6O
分子量
513.4
精确质量
512.129
元素分析
C, 58.49; H, 4.52; Cl, 13.81; F, 3.70; N, 16.37; O, 3.12
CAS号
1232030-35-1
相关CAS号
1232030-35-1
PubChem CID
68060125
外观&性状
Light yellow to yellow solid powder
LogP
4.893
tPSA
78.31
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
7
可旋转键数目(RBC)
5
重原子数目
35
分子复杂度/Complexity
783
定义原子立体中心数目
0
SMILES
FC1=CC(NC2=NC=C3C(N(CC)C(C(C4=CC=C(Cl)C=C4Cl)=C3)=O)=N2)=CC=C1N5CCNCC5
InChi Key
DHKFOIHIUYFSOF-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C25H23Cl2FN6O/c1-2-34-23-15(11-19(24(34)35)18-5-3-16(26)12-20(18)27)14-30-25(32-23)31-17-4-6-22(21(28)13-17)33-9-7-29-8-10-33/h3-6,11-14,29H,2,7-10H2,1H3,(H,30,31,32)
化学名
6-(2,4-dichlorophenyl)-8-ethyl-2-(3-fluoro-4-piperazin-1-ylanilino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-one
别名
FRAX486; FRAX 486; FRAX-486
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: 21.2~30 mg/mL (41.3~58.4 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.9478 mL 9.7390 mL 19.4780 mL
5 mM 0.3896 mL 1.9478 mL 3.8956 mL
10 mM 0.1948 mL 0.9739 mL 1.9478 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片
  • Proc Natl Acad Sci U S A . 2014 Apr 29;111(17):6461-6.
  • The PAK inhibitor (FRAX486) ameliorates adolescent synapse loss in the prefrontal cortex and adult behavior change in a DISC1 knockdown mouse model. Proc Natl Acad Sci U S A . 2014 Apr 29;111(17):6461-6.
  • Effects of FRAX486 and IPA3 in low concentrations on contraction of human prostate strips. PLoS One . 2016 Apr 12;11(4):e0153312.
  • Effects of FRAX486 and IPA3 in high concentrations on contraction of human prostate strips. PLoS One . 2016 Apr 12;11(4):e0153312.
  • Audiogenic seizure susceptibility was reduced in Fmr1 KO mice by FRAX486. Proc Natl Acad Sci U S A . 2013 Apr 2;110(14):5671-6.
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