Friedelin

别名: Friedelin UNII-AK21264UAD EINECS 209-205-1 木栓酮;无羁萜、软木三萜酮;软木三萜酮; 品牌 软木三萜酮对照品;木拴酮;软木三萜酮(P);软木三酮萜;无羁萜;无羁萜,木栓酮
目录号: V6688 纯度: ≥98%
Friedelin 是从 Maytenus ilicifolia (Mart) 的叶子中提取的。
Friedelin CAS号: 559-74-0
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
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产品描述
弗里德林提取自美洲卫矛(Maytenus ilicifolia (Mart))的叶片。弗里德林是CYP3A4的非竞争性抑制剂,其IC50和Kis分别为10.79 μM和6.16 μM。弗里德林也是CYP2E1的竞争性抑制剂,其IC50和Kis分别为22.54 μM和18.02 μM。
生物活性&实验参考方法
靶点
Cytochrome P450 3A4 (CYP3A4) - Noncompetitive inhibitor (IC50 = 10.79 μM, Ki = 6.16 μM) [1]
Cytochrome P450 2E1 (CYP2E1) - Competitive inhibitor (IC50 = 22.54 μM, Ki = 18.02 μM) [1]
体外研究 (In Vitro)
CYP3A4抑制:在混合人肝微粒体(HLM)中,以睾酮6β-羟基化为探针反应,100 μM的弗里德林可将CYP3A4活性抑制至对照组的7.5%。该抑制作用呈浓度依赖性,IC50值为10.79 μM。采用Lineweaver-Burk作图法进行的酶动力学研究表明,弗里德林是CYP3A4的非竞争性抑制剂,Ki值为6.16 μM。[1] CYP2E1抑制:在混合人肝微粒体(HLM)中,以氯唑沙宗6-羟基化为探针反应,100 μM的弗里德林可将CYP2E1活性抑制至对照组的18.9%。抑制作用呈浓度依赖性,IC50 值为 22.54 μM。酶动力学研究表明,弗里德林是 CYP2E1 的竞争性抑制剂,Ki 值为 18.02 μM。[1]
对其他 CYP 同工酶无抑制作用:在 100 μM 的浓度下,弗里德林对混合人肝微粒体 (HLM) 中 CYP1A2、2A6、2D6、2C9、2C19 或 2C8 的活性没有显著抑制作用。[1]
对 CYP3A4 的时间依赖性抑制 (TDI):弗里德林被发现是 CYP3A4 的时间依赖性抑制剂。将弗里德林 (20 μM) 与人肝微粒体 (HLM) 和 NADPH 预孵育 30 分钟,导致 CYP3A4 活性随时间推移而降低。测定了失活参数,得到 Kinact/KI 值为 4.84 mM/min。Kinact 值表明,在弗里德林饱和浓度下,每分钟约有 5.9% 的 CYP3A4 失活。未观察到 CYP2E1 的时间依赖性抑制。[1]
酶活实验
CYP酶抑制试验在人肝微粒体(HLM)中进行了研究:使用特异性探针反应,研究了Friedelin对八种主要CYP同工酶的抑制作用:睾酮6β-羟基化抑制CYP3A4,非那西汀O-去乙基化抑制CYP1A2,香豆素7-羟基化抑制CYP2A6,氯唑沙宗6-羟基化抑制CYP2E1,右美沙芬O-去甲基化抑制CYP2D6,双氯芬酸4'-羟基化抑制CYP2C9,S-美芬妥英4-羟基化抑制CYP2C19,紫杉醇6α-羟基化抑制CYP2C8。孵育混合物(终体积 200 μL)包含 100 mM 磷酸钾缓冲液(pH 7.4)、NADPH 生成系统(1 mM NADP+、10 mM 葡萄糖-6-磷酸、1 U/mL 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、4 mM MgCl2)、人肝微粒体 (HLM)、浓度接近其 Km 值的特异性探针底物,以及弗里德林(筛选时浓度为 100 μM)、阳性对照抑制剂或溶剂对照(1% 甲醇)。在 37°C 预孵育 3 分钟后,加入 NADPH 生成系统启动反应,并根据表 1 中的具体时间进行孵育。反应通过加入乙腈(或 CYP2A6 的乙腈/10% 三氯乙酸)和内标终止,然后置于冰上。样品以 12,000 rpm 离心 10 分钟,取上清液进行 HPLC 分析,以定量代谢物的生成。所有孵育实验均重复三次。[1]
IC50 值和抑制动力学的测定:对于在初步筛选中显示出显著抑制作用的 CYP3A4 和 CYP2E1,进行了二次研究以确定其 IC50 值。将不同浓度的 Friedelin (0-50 μM) 与固定浓度的底物一起孵育。为了确定抑制常数 (Ki) 和抑制模式,我们进行了实验,使用多种浓度的探针底物(CYP3A4 的睾酮浓度为 20-100 μM;CYP2E1 的氯唑沙宗浓度为 25-200 μM)和不同浓度的弗里德林(CYP3A4 为 0-30 μM;CYP2E1 为 0-50 μM)。使用 Lineweaver-Burk 图和非线性回归分析数据,以确定 Ki 值和抑制机制。[1] 时间依赖性抑制 (TDI) 测定:为了评估时间依赖性抑制,将弗里德林 (20 μM) 与人肝微粒体 (HLM) (1 mg/mL) 和 NADPH 生成系统在 37°C 下预孵育 30 分钟。在不同时间点(0-30 分钟),取 20 μL 样品转移至含有 NADPH 生成系统和探针底物(浓度约为其 Km 值)的二级孵育管中。继续孵育该混合物以测定残余酶活性。反应终止后,采用高效液相色谱法 (HPLC) 进行分析。为了测定 CYP3A4 的失活参数(KI 和 Kinact),使用不同浓度的 Friedelin(0-50 μM)和不同的预孵育时间(0-30 分钟),以及浓度约为其 Km 值 4 倍的探针底物,进行类似的实验。计算 Kinact/KI 值。[1]
参考文献

[1]. In vitro inhibitory effects of Friedelin on human liver cytochrome P450 enzymes. Pharm Biol. 2018 Dec;56(1):363-367.

其他信息
弗里德林是一种五环三萜类化合物,属于全氢腺苷烯家族。其3位被羰基取代,4、4a、6b、8a、11、12b和14a位被甲基取代(4R、4aS、6aS、6bR、8aR、12aR、12bS、14aS、14bS对映异构体)。它是软木的主要三萜类成分。弗里德林具有抗炎、非麻醉性镇痛、解热和植物代谢调节作用。它是一种五环三萜类化合物,也是一种环状萜酮。据报道,弗里德林存在于福氏红孢菌(Erythrophleum fordii)、粪层孔菌(Phellinus pomaceus)和其他具有相关数据的生物体中。
弗里德林是一种从冬青叶卫矛(Maytenus ilicifolia)等植物中分离得到的三萜类化合物,具有多种生物活性,包括抗氧化、抗炎、抗溃疡、抗肥胖以及体外细胞毒性作用。[1]
本研究首次探讨了弗里德林对人肝主要细胞色素P450酶的影响。结果表明,弗里德林可在体外抑制CYP3A4和CYP2E1,提示其与经这些酶代谢的药物合用时可能引起药代动力学药物相互作用。[1]
该研究指出,虽然体外数据至关重要,但并不能自动预测临床相关的相互作用。体内弗里德林浓度以及被抑制通路对药物总清除率的贡献等因素会影响其临床意义。需要进一步的体内研究。[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C30H50O
分子量
426.73
精确质量
426.386
CAS号
559-74-0
PubChem CID
91472
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.0±0.1 g/cm3
沸点
477.2±13.0 °C at 760 mmHg
熔点
262-265ºC(lit.)
闪点
233.9±12.1 °C
蒸汽压
0.0±1.2 mmHg at 25°C
折射率
1.503
LogP
10.87
tPSA
17.07
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
1
可旋转键数目(RBC)
0
重原子数目
31
分子复杂度/Complexity
781
定义原子立体中心数目
9
SMILES
C[C@H]1C(=O)CC[C@@H]2[C@@]1(CC[C@H]3[C@]2(CC[C@@]4([C@@]3(CC[C@@]5([C@H]4CC(CC5)(C)C)C)C)C)C)C
InChi Key
OFMXGFHWLZPCFL-SVRPQWSVSA-N
InChi Code
InChI=1S/C30H50O/c1-20-21(31)9-10-22-27(20,5)12-11-23-28(22,6)16-18-30(8)24-19-25(2,3)13-14-26(24,4)15-17-29(23,30)7/h20,22-24H,9-19H2,1-8H3/t20-,22+,23-,24+,26+,27+,28-,29+,30-/m0/s1
化学名
(4R,4aS,6aS,6aS,6bR,8aR,12aR,14aS,14bS)-4,4a,6a,6b,8a,11,11,14a-octamethyl-2,4,5,6,6a,7,8,9,10,12,12a,13,14,14b-tetradecahydro-1H-picen-3-one
别名
Friedelin UNII-AK21264UAD EINECS 209-205-1
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
THF : 7.14 mg/mL (~16.73 mM)
DMSO :< 1 mg/mL
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.3434 mL 11.7170 mL 23.4340 mL
5 mM 0.4687 mL 2.3434 mL 4.6868 mL
10 mM 0.2343 mL 1.1717 mL 2.3434 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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