| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Target: G5-7 allosterically targets Janus kinase 2 (JAK2) with an IC50 of 0.6 μM against recombinant human JAK2; IC50 values for JAK1, JAK3, and TYK2 are all >50 μM, showing high subtype selectivity [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
G5-7 (0-5 μM) 使细胞周期停止在 G2 期，并抑制下游 mTOR 信号传导和 EGFR 酪氨酸磷酸化 [1]。 G5-7 不直接阻止 EGFR 激活 [1]。在亲代 LN229 细胞和 U87MG/EGFRvIII 细胞中，G5-7 (0-10 μM) 显着提高了凋亡标记物（裂解的 PARP 和 caspase 3）的量 [1]。 G5-7 在整个过程中与 JAK2 相互作用 [1]。虽然 G5-7 对 EGFR Tyr1045 磷酸化没有影响，但它强烈降低 EGFR Tyr1068 磷酸化 [1]。通过 mTOR，G5-7 抑制 JAK 的下游信号传导 [1]。
JAK2酶活性抑制：G5-7 以变构方式抑制JAK2激酶活性，不影响ATP与JAK2的结合。1 μM浓度时可抑制75%的JAK2催化活性，5 μM时抑制率达92%，且该抑制效应不可逆 [1] - 胶质瘤细胞抗增殖活性：G5-7 对JAK2依赖性胶质瘤细胞系（U87、U251、LN229）具有剂量依赖性增殖抑制作用，IC50分别为1.2 μM、1.5 μM、1.8 μM；对正常星形胶质细胞毒性较低（IC50 > 20 μM）[1] - JAK2-STAT3信号通路抑制：Western blot检测显示，G5-7 （1 μM）处理U87细胞24小时后，JAK2（Tyr1007/1008）及下游STAT3（Tyr705）磷酸化水平分别降低82%和78%，STAT3靶基因（Cyclin D1、Bcl-2、Survivin）的mRNA表达量降低55%-68% [1] - 克隆形成与凋亡调控：G5-7 （2 μM）处理U251细胞后，克隆形成率从对照组的85%降至21%；Annexin V-FITC/PI染色显示，凋亡细胞比例从5%升高至32%， caspase-3和PARP裂解水平显著升高 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
口服 G5-7（10 和 50 mg/kg）具有很强的抗血管生成特性并减少 VEGF 分泌 [1]。
颅内胶质瘤模型药效：裸鼠颅内接种U87胶质瘤细胞后，G5-7 以20 mg/kg剂量每日腹腔注射，连续21天。治疗组小鼠肿瘤体积较对照组缩小65%，中位生存期从28天延长至49天；免疫组化显示肿瘤组织中p-JAK2和p-STAT3阳性细胞比例分别降低70%和65% [1] - 肿瘤侵袭抑制：体内实验显示，G5-7 处理后，胶质瘤细胞的侵袭能力显著降低，肿瘤组织边缘的侵袭性细胞数量减少58%，MMP-2和MMP-9的蛋白表达水平分别降低62%和57% [1] |
| 酶活实验 |
JAK2激酶活性抑制实验：构建重组人JAK2（JH1结构域）表达体系并纯化蛋白。反应体系中加入系列浓度G5-7 （0.05-10 μM）、JAK2蛋白及特异性底物多肽，37℃孵育30分钟。采用均相时间分辨荧光（HTRF）法检测底物磷酸化水平，计算酶活性抑制率，通过非线性回归分析拟合IC50值 [1]
- JAK2结合亲和力检测（SPR）：将重组JAK2蛋白固定于传感芯片表面，以系列浓度G5-7 （0.1-5 μM）作为流动相，通过表面等离子体共振（SPR）技术检测结合信号。记录结合与解离曲线，计算平衡解离常数（KD）为0.3 μM，证实G5-7 与JAK2的直接结合 [1] - 变构抑制验证实验：设置不同ATP浓度（1-100 μM）的酶反应体系，加入固定浓度G5-7 （1 μM），检测JAK2活性变化。结果显示ATP浓度升高不影响G5-7 的抑制效果，证实其作用方式为非ATP竞争性变构抑制 [1] |
| 细胞实验 |
蛋白质印迹分析[1]。
细胞类型： U87MG/PTEN 细胞。 测试浓度：0-5μM。 孵化持续时间：6 小时。 实验结果：阻断EGFR磷酸化和G2期细胞周期，抑制细胞增殖。 细胞活力与IC50测定：胶质瘤细胞（U87、U251、LN229）接种于96孔板，加入0.1-20 μM系列浓度G5-7 ，孵育72小时后采用MTT法检测细胞活力，GraphPad Prism软件计算IC50值；同时设置正常星形胶质细胞对照组，评估细胞毒性选择性 [1] - Western blot信号通路检测：G5-7 处理U87细胞后提取总蛋白，经SDS-PAGE电泳、转膜后，与p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3、Cyclin D1、Bcl-2、caspase-3、PARP及内参β-actin一抗孵育，二抗结合后化学发光显影，ImageJ软件定量条带灰度值 [1] - 克隆形成实验：U251细胞接种于6孔板，加入G5-7 （0.5、1、2 μM），培养14天后甲醇固定，结晶紫染色，计数大于50个细胞的克隆，计算克隆形成率 [1] - 凋亡检测实验：G5-7 （2 μM）处理U87细胞48小时后，收集细胞并洗涤，加入Annexin V-FITC和PI染色液，室温孵育15分钟，流式细胞仪分析凋亡细胞比例 [1] - qPCR靶基因检测：提取G5-7 处理后细胞的总RNA，逆转录为cDNA，采用特异性引物进行qPCR扩增，检测Cyclin D1、Bcl-2、Survivin的mRNA相对表达量，以GAPDH为内参基因 [1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：将 4 × 10⁶ 个细胞悬浮于 100 μl 无血清 DMEM 培养基中，皮下注射 (sc) 至 5～6 周龄雌性裸鼠体内 [1]。
剂量： 10 和 50 mg/kg。 给药途径： 灌胃 (po)。 实验结果： 抑制肿瘤血管生成。 颅内胶质瘤异种移植模型疗效实验：将 6～8 周龄裸鼠麻醉，使用立体定位仪将 5×10⁴ 个 U87 细胞接种到右侧纹状体区域。接种 7 天后，将小鼠随机分组（每组 n=8）。治疗组腹腔注射G5-7（溶于DMSO:PEG400:生理盐水（5:40:55，v/v/v）溶液），剂量为20 mg/kg，每日一次，连续21天；对照组注射等体积的溶剂。每日观察小鼠行为状态，每7天进行一次磁共振成像（MRI）检测肿瘤体积；记录小鼠生存时间，并在实验结束时收集脑组织进行免疫组织化学染色（检测p-JAK2、p-STAT3、Ki67、Caspase-3）[1]。 - 肿瘤侵袭性评价动物实验：将U87细胞皮下接种于裸鼠。当肿瘤体积达到150 mm³时，给予G5-7（20 mg/kg，腹腔注射，每日一次，连续14天）。实验结束时，切除肿瘤组织，制备石蜡切片，并通过免疫组织化学方法检测MMP-2和MMP-9的表达水平，以评价肿瘤的侵袭性[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性毒性：小鼠单次腹腔注射G5-7（剂量高达50 mg/kg）14天内未出现死亡或明显毒性症状（体重、行为和食物摄入量均正常），半数致死量（LD50）>50 mg/kg [1]
- 重复给药毒性：裸鼠连续21天腹腔注射G5-7（20 mg/kg）后，血常规（白细胞、红细胞、血小板）及肝肾功能指标（ALT、AST、肌酐、尿素氮）均正常。主要器官（心、肝、脾、肺、肾、脑）病理切片未见明显病理损伤 [1] - 血浆蛋白结合率：体外实验测定G5-7的人血浆蛋白结合率为85%-90%，小鼠血浆蛋白结合率为82%-88% [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
结构和作用机制：G5-7 是一种分子量为 389.5 Da 的小分子变构抑制剂，通过与 JAK2 的 JH2 结构域（假激酶结构域）结合而发挥作用。 G5-7 的结合可诱导 JAK2 的构象变化，阻断 JH1 结构域（催化结构域）的自磷酸化激活，从而抑制下游 STAT3 信号通路，最终抑制胶质瘤细胞增殖并促进细胞凋亡 [1]
- 选择性特征：G5-7 对其他 JAK 家族亚型（JAK1、JAK3、TYK2）或其他激酶（例如 EGFR、ALK、PI3K）无明显的抑制活性，其选择性高于传统的 ATP 竞争性 JAK 抑制剂，降低了脱靶副作用的风险 [1] - 适应症潜力：基于体外和体内实验结果，G5-7 具有治疗 JAK2 异常激活的胶质瘤，特别是胶质母细胞瘤 (GBM) 的潜力，可能具有临床应用价值 [1] |
| 分子式 |
C24H23NO3F2
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|---|---|
| 分子量 |
411.44112
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| 精确质量 |
411.165
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| CAS号 |
939681-36-4
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| PubChem CID |
146160226
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| LogP |
5.189
|
| tPSA |
46.61
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
666
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CC(OC(=O)N1C/C(=C/C2=CC=CC=C2F)/C(=O)/C(=C\C3=CC=CC=C3F)/C1)(C)C
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| InChi Key |
MCSPIRBNMDODQP-BKHHGCLFSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H23F2NO3/c1-24(2,3)30-23(29)27-14-18(12-16-8-4-6-10-20(16)25)22(28)19(15-27)13-17-9-5-7-11-21(17)26/h4-13H,14-15H2,1-3H3/b18-12-,19-13-
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| 化学名 |
tert-butyl (3Z,5Z)-3,5-bis[(2-fluorophenyl)methylidene]-4-oxopiperidine-1-carboxylate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~83.33 mg/mL (~217.35 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4305 mL | 12.1524 mL | 24.3049 mL | |
| 5 mM | 0.4861 mL | 2.4305 mL | 4.8610 mL | |
| 10 mM | 0.2430 mL | 1.2152 mL | 2.4305 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
JAK2-IN-14
JAK1/TYK2-IN-5
Gusacitinib-d4
Povorcitinib-d6
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