| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
ALAS1 (5'-aminolevulinic acid synthase 1). Givosiran is an siRNA that targets the ALAS1 messenger RNA (mRNA). By binding to the ALAS1 mRNA, it triggers RNA interference (RNAi)-mediated degradation of the transcript, leading to a reduction in the ALAS1 protein. ALAS1 is the first and rate-limiting enzyme in the heme biosynthesis pathway. Reducing ALAS1 activity limits the accumulation of the neurotoxic precursors delta-aminolevulinic acid (ALA) and porphobilinogen (PBG), which are responsible for the clinical manifestations of acute hepatic porphyria.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Givosiran 已与三价 N-苯基半乳糖胺配体偶联，预计可与去唾液酸糖苷结合，以促进肝脏吸收 [2]。
无细胞检测不适用于siRNA疗法。givosiran的活性评估是在细胞系统中进行的，方法是将siRNA转染到肝细胞系（例如Huh-7、HepG2）中，并通过qRT-PCR检测ALAS1 mRNA的敲低水平，并通过Western blot检测ALAS1蛋白的表达水平。GalNAc偶联物能够使siRNA通过去唾液酸糖蛋白受体（ASGPR）被细胞摄取。在没有脂质载体的情况下，GalNAc-siRNA会被肝细胞摄取。ALAS1 mRNA敲低的EC50值通常在低皮摩尔到纳摩尔范围内。Givosiran不与蛋白质靶标结合；它与特定的互补mRNA序列（ALAS1）杂交。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在原代人肝细胞或表达ASGPR的肝细胞系（例如HepG2、Huh-7）中评估givosiran的细胞活性。将细胞接种于96孔板中，并在无血清或低血清培养基中用浓度为0.001-100 nM的givosiran处理，以促进GalNAc-ASGPR的结合。对于未偶联的siRNA，需要使用转染试剂（例如Lipofectamine 2000）。24-72小时后，使用TaqMan探针通过qRT-PCR检测ALAS1 mRNA的减少情况，并以管家基因（例如GAPDH或β-actin）进行标准化。通过Western blot验证ALAS1蛋白水平。其功能结果是ALA和PBG的积累减少，可通过特异性酶活性测定或LC-MS/MS在细胞培养基中进行检测。 ALA/PBG 还原的 EC50 也处于低纳摩尔范围内。
|
| 酶活实验 |
Givosiran 是一种 RNAi 疗法，而非小分子药物，因此不适用于无细胞酶活性测定。其作用机制需在原代人肝细胞培养中进行验证。细胞可从人肝组织中分离或购自商业渠道。将细胞接种于胶原蛋白包被的培养板中，使其贴壁。向培养基中加入 Givosiran（1-100 nM），孵育 24-72 小时。提取总 RNA，并使用基因特异性 TaqMan 探针通过 qRT-PCR 定量 ALAS1 mRNA。敲低百分比以阴性对照 siRNA 为基准进行计算。为验证通路抑制作用，可使用卟啉生成化合物（例如，谷氨酰胺或苯巴比妥）处理细胞以诱导 ALAS1 表达，并检测 givosiran 是否能够阻断这种诱导作用。通过比色法或液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定培养基中ALA和PBG的减少量。这证实了其对血红素生物合成途径的功能性影响。
|
| 动物实验 |
吉沃西兰的体内活性已在动物模型（小鼠、大鼠、猴子）和患者中得到证实。在典型的疗效研究中，吉沃西兰以0.3-10 mg/kg的剂量皮下注射给野生型或转基因小鼠，每月一次或更少。主要终点是肝组织中ALAS1 mRNA的减少，通过qRT-PCR进行检测。ALAS1蛋白通过Western blot进行检测。血浆和尿液中ALA和PBG水平的降低采用LC-MS/MS进行检测。药效学模型通常包括使用苯巴比妥或卟啉生成药物对ALAS1进行化学诱导。吉沃西兰治疗可使ALAS1 mRNA减少90%以上，从而导致ALA和PBG水平持续降低。其作用持续时间为数周，与RNAi药理学一致。在急性卟啉病（AHP）患者中，吉沃西兰可降低卟啉症发作的频率。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
Givosiran 是一种具有独特药代动力学/药效学特征的 siRNA 疗法。皮下注射后，它被吸收进入体循环。其 GalNAc 部分与肝细胞上的 ASGPR 具有高亲和力结合，导致快速内化。血浆半衰期相对较短（数小时），但对 ALAS1 mRNA 的药效学作用可持续数周。在人体中，FDA 批准的给药方案为每月一次，每次 2.5 mg/kg。该药物主要分布于肝脏。它通过内体/溶酶体降解清除，而非通过 CYP450 酶清除。预计不会发生显著的药物相互作用。主要清除途径是以核苷酸的形式经尿液排泄。肝脏/血浆比值高是其关键特征。研究表明，在人体中单次皮下注射 2.5 mg/kg 可使 ALAS1 mRNA 水平降低约 90%，且至少持续 4 周。肝脏消除半衰期估计为 7-10 天。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在临床前毒理学研究中，吉沃西兰总体耐受性良好。主要研究结果显示其具有靶向作用（降低ALAS1和血红素合成）和注射部位反应。在高剂量下，动物实验观察到对造血系统的影响（轻度贫血、网织红细胞增多），这与血红素合成减少相符。未报告显著的非靶向作用。在人体临床试验（III期ENVISION试验）中，最常见的不良事件是注射部位反应（红斑、疼痛）和恶心。部分患者出现肝功能指标（ALT、AST）升高，但通常程度较轻且可逆。该药物的说明书中包含黑框警告，提示存在过敏反应和肝毒性风险。吉沃西兰不具有遗传毒性。上市后安全性数据仍在收集中。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
吉沃西兰（Givosiran，商品名Givlaari）是首个获得FDA批准用于治疗急性肝卟啉症（AHP）的RNAi疗法，于2019年11月获批。该药由Alnylam Pharmaceuticals公司研发，每月皮下注射一次（2.5 mg/kg）。它是一种双链siRNA，通过共价键与GalNAc配体连接。其获批基于ENVISION III期临床试验，该试验显示卟啉症发作率降低了89%。其CAS号为1639325-43-1，分子量约为16,300 g/mol（AS：7563.9 + SS：8736.7）。该药以溶液或粉末形式提供，仅供研究使用，不可用于人体实验室研究。该药用于治疗急性间歇性卟啉症（AIP）和其他类型的AHP。
|
| 分子式 |
C78H139N11O30
|
|---|---|
| 分子量 |
1710.9940
|
| 精确质量 |
1709.968
|
| CAS号 |
1639325-43-1
|
| 相关CAS号 |
1469730-77-5 (hydroxy);
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
1780.6±65.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
1030.6±34.3 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±0.6 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.579
|
| LogP |
-4.24
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.5845 mL | 2.9223 mL | 5.8446 mL | |
| 5 mM | 0.1169 mL | 0.5845 mL | 1.1689 mL | |
| 10 mM | 0.0584 mL | 0.2922 mL | 0.5845 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
