| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Cathepsin B (cleavable site); TCO group is a reactant for IEDDA click chemistry.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
ADC 细胞毒素通过 ADC 连接器与抗体连接，形成 ADC [1]。
Gly-Gly-Gly-PEG3-TCO 是一种可裂解（可降解）的抗体药物偶联物 (ADC) 连接子，包含一个三甘氨酸肽 (Gly-Gly-Gly) 和一个由 3 个单元组成的聚乙二醇 (PEG3) 间隔基。末端反式环辛烯 (TCO) 基团能够通过逆电子需求 Diels-Alder (IEDDA) 反应，与四嗪功能化的抗体或有效载荷进行快速、选择性的生物正交偶联。该反应具有高度特异性、快速性，且在温和、生理相容的条件下进行。三甘氨酸肽片段的设计使其能够被特定的溶酶体蛋白酶（例如组织蛋白酶 B）选择性裂解，而这些蛋白酶在许多癌细胞中过度表达。当抗体药物偶联物（ADC）被靶癌细胞内化并转运至溶酶体后，蛋白酶会切割肽键处的连接臂，释放细胞毒性有效载荷（例如MMAE、DM1），从而发挥其抗肿瘤作用。PEG3间隔臂增强了连接臂的亲水性，有助于维持ADC的溶解度和稳定性，并减少聚集。连接臂本身不具有生物活性，它是一种用于控制细胞毒素释放的化学工具。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
作为抗体药物偶联物（ADC）连接子，Gly-Gly-Gly-PEG3-TCO 本身并非治疗剂，而是用于构建具有体内活性的ADC的组成部分。含有该连接子的ADC的体内疗效通常在人源肿瘤的小鼠异种移植模型中进行评估。ADC经静脉注射给药，并测量肿瘤生长抑制情况。连接子在循环系统中的体内稳定性至关重要：它必须在血液中保持稳定，以防止毒性有效载荷过早释放（从而导致脱靶毒性），但一旦进入肿瘤细胞，又必须能够被有效裂解。PEG3间隔基可减少聚集并改善药代动力学（PK）。TCO基团并不存在于最终的ADC中；它用于在最终偶联步骤中将连接子连接到四嗪修饰的组分上。因此，活性数据是针对完整的ADC而非连接子本身生成的。已知三甘氨酸连接子可被组织蛋白酶 B 裂解，组织蛋白酶 B 是一种细胞内蛋白酶，在许多肿瘤类型中活性升高，这为肿瘤选择性药物释放提供了基础。
|
| 酶活实验 |
Gly-Gly-Gly-PEG3-TCO 是一种化学连接子，因此，其主要表征是化学性质的。纯度（>95%）通过高效液相色谱 (HPLC) 测定。结构通过核磁共振氢谱 (¹H NMR) 和质谱 (MS) 确认。TCO 基团的存在通过其与四嗪的特征反应性来确认，该反应可通过 HPLC 或紫外-可见光谱 (UV-Vis) 进行监测（反应会导致颜色变化）。连接子被溶酶体蛋白酶切割的能力可通过体外生化分析进行评估。在该分析中，将连接子与模型有效载荷（例如，荧光团）和模型抗体偶联，或者仅与有效载荷和可切割的二肽偶联。然后将该模型抗体药物偶联物 (ADC) 或连接子-有效载荷偶联物与纯化的组织蛋白酶 B 在合适的缓冲液（例如，50 mM 乙酸钠，pH 5.0，1 mM DTT，1 mM EDTA）中于 37°C 下孵育。游离有效载荷的释放可通过高效液相色谱（HPLC）或液相色谱-质谱联用（LC-MS）进行监测。释放动力学可与不可裂解的对照连接子进行比较。可通过向反应体系中加入组织蛋白酶B抑制剂（例如CA-074）来验证裂解的特异性，该抑制剂应能阻断释放。TCO基团与四嗪之间的IEDDA反应速率也可在试管中测定。将四嗪化合物与TCO连接子在缓冲液（例如，室温下，pH 7.4的PBS缓冲液）中混合。反应进程通常通过紫外-可见光谱的变化（四嗪在~520-550 nm处具有特征吸收峰，与TCO反应后该吸收峰消失）或通过LC-MS追踪产物的生成来监测。可测定二级反应速率常数（k2），TCO-四嗪反应的k2通常大于1000 M-¹s-¹。
|
| 细胞实验 |
作为一种化学连接子，Gly-Gly-Gly-PEG3-TCO 不直接用于细胞实验。其功能是在完整的抗体药物偶联物 (ADC) 中评估的。典型的 ADC 细胞实验包括用 ADC 处理抗原阳性癌细胞（例如，针对 HER2 的 ADC 则使用 HER2 阳性的 SK-BR-3 细胞）。ADC 由抗体（例如，曲妥珠单抗）、连接子和细胞毒性有效载荷（例如，MMAE）组成。将细胞与不同浓度的 ADC 孵育 72-120 小时。孵育后，使用 MTT 或 CellTiter-Glo 等标准方法检测细胞活力。然后计算 IC50（杀死 50% 细胞的 ADC 浓度）。为了验证作用机制，可以在组织蛋白酶 B 抑制剂（例如，CA-074）存在的情况下进行该实验。如果连接子可被组织蛋白酶B切割，则该抑制剂应能阻断抗体药物偶联物（ADC）的细胞毒性。作为对照，在抗原阴性细胞（例如HEK-293细胞）上进行相同的检测，以确认靶点特异性。对于TCO化学，连接子上的TCO基团并不存在于最终的ADC中；它用于将四嗪修饰的有效载荷连接到抗体上。因此，TCO并非最终产物的一部分，其性质与最终的生物活性无关，除了偶联步骤的效率外。
|
| 动物实验 |
Gly-Gly-Gly-PEG3-TCO 用于抗体药物偶联物 (ADC) 的制备，随后在动物模型中进行测试。该连接子本身没有动物实验方案。典型的 ADC 体内实验方案是将 ADC 注射到携带人癌细胞皮下异种移植瘤（例如，针对 HER2 的 ADC 使用 SK-BR-3 细胞）的免疫缺陷小鼠体内。当肿瘤体积达到约 150-200 mm³ 时，通过尾静脉注射 ADC，剂量为 1-10 mg/kg（基于抗体含量）。对照组接受载体（PBS）或非靶向 ADC。每 2-3 天用游标卡尺测量肿瘤体积。研究结束时（通常在 2-4 周后），处死小鼠，切除肿瘤并称重。研究期间可采集血样进行药代动力学分析。连接子有助于提高抗体药物偶联物（ADC）的整体稳定性和药代动力学性质。如果连接子可被组织蛋白酶B切割，则应在耐受剂量下提供强效的肿瘤生长抑制（TGI）。不可切割的对照连接子预计会具有不同的疗效和安全性。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
含有Gly-Gly-Gly-PEG3-TCO的抗体偶联药物（ADC）的药代动力学（PK）特性主要取决于偶联物的抗体部分。连接子本身会影响整体亲水性，并可能影响清除速率。ADC的药代动力学通常呈现两个阶段：快速的初始分布阶段（α相）和较慢的末端消除阶段（β相），半衰期为数天（例如，基于IgG的ADC的半衰期为5-10天）。连接子在循环中的稳定性至关重要：它不能过早释放有效载荷。过早释放会导致有效载荷清除率升高，并可能产生脱靶毒性。PEG3间隔基有助于减少聚集，从而避免网状内皮系统（RES）的快速清除。TCO基团并非最终ADC的组成部分；它是合成过程中使用的反应性基团。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Gly-Gly-Gly-PEG3-TCO 是一种化学连接子，不适用于体内单独使用。其毒性评估是最终抗体药物偶联物 (ADC) 设计的一部分。该连接子的组成成分（氨基酸、PEG、TCO）通常被认为具有较低的固有毒性。然而，由于连接子不稳定导致有效载荷过早释放，可能会引起剂量限制性毒性，例如中性粒细胞减少症或周围神经病变，这些通常是 ADC 的剂量限制性毒性。三甘氨酸序列可被组织蛋白酶 B 切割，组织蛋白酶 B 存在于所有溶酶体中，但在某些癌细胞中活性更高；因此，该连接子的设计目的是使有效载荷在肿瘤组织中的释放效率高于正常组织，从而提高治疗指数。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Gly-Gly-Gly-PEG3-TCO 是一种用于通过生物正交偶联合成抗体药物偶联物 (ADC) 的专用连接子。ADC 是一种靶向癌症治疗药物，它结合了单克隆抗体的特异性和细胞毒性药物的强效杀伤能力。使用 TCO 和四嗪的 IEDDA 点击化学反应是目前最快的生物正交反应之一，反应速率常数高达 10⁶ M⁻¹s⁻¹。这使得在稀溶液中也能实现高效的偶联。使用可裂解连接子是 ADC 设计中的关键策略，旨在实现“旁观者效应”，即释放的有效载荷可以扩散出靶细胞，并杀死可能不表达靶抗原的邻近肿瘤细胞。这对于异质性肿瘤尤为重要。PEG3 连接子具有特定的长度；其他长度（PEG4、PEG8 等）也可用于微调其性质。本产品仅供研究使用。
|
| 分子式 |
C23H41N5O8
|
|---|---|
| 分子量 |
515.600346326828
|
| 精确质量 |
515.295
|
| CAS号 |
2353409-81-9
|
| PubChem CID |
146026033
|
| 外观&性状 |
Off-white to light yellow oil
|
| LogP |
-1.1
|
| tPSA |
179
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
5
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
9
|
| 可旋转键数目(RBC) |
19
|
| 重原子数目 |
36
|
| 分子复杂度/Complexity |
677
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
C1C/C=C\CCC(C1)OC(=O)NCCOCCOCCOCCNC(=O)CNC(=O)CNC(=O)CN
|
| InChi Key |
GUKWYRQLMOYPGS-UPHRSURJSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C23H41N5O8/c24-16-20(29)27-18-22(31)28-17-21(30)25-8-10-33-12-14-35-15-13-34-11-9-26-23(32)36-19-6-4-2-1-3-5-7-19/h1-2,19H,3-18,24H2,(H,25,30)(H,26,32)(H,27,29)(H,28,31)/b2-1-
|
| 化学名 |
[(4Z)-cyclooct-4-en-1-yl] N-[2-[2-[2-[2-[[2-[[2-[(2-aminoacetyl)amino]acetyl]amino]acetyl]amino]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethyl]carbamate
|
| 别名 |
GlyGlyGlyPEG3TCO; Gly Gly Gly PEG3 TCO
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9395 mL | 9.6974 mL | 19.3949 mL | |
| 5 mM | 0.3879 mL | 1.9395 mL | 3.8790 mL | |
| 10 mM | 0.1939 mL | 0.9697 mL | 1.9395 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
