| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Interleukin-2-inducible T-cell kinase (ITK). GNE-9822 is a potent and highly selective ITK inhibitor that binds to the ATP-binding pocket of ITK with a Ki of 0.7 nM. The compound demonstrates exceptional selectivity over other kinases, with only six of 286 off-target kinases showing >70% inhibition when tested at 0.1 μM, which is more than 100-fold above its ITK Ki. This remarkable selectivity profile distinguishes GNE-9822 from earlier ITK inhibitors and makes it a valuable tool for dissecting ITK-specific functions in T-cell signaling without confounding off-target effects.
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| 体外研究 (In Vitro) |
GNE-9822（化合物 28）的 IC50 值为 55 nM，可抑制 PLCγ 磷酸化[1]。
生化实验表明，GNE-9822 对 ITK 的抑制常数 Ki 为 0.7 nM，表明其对靶酶具有高亲和力。细胞实验表明，GNE-9822（化合物 28）可抑制 PLCγ 的磷酸化，PLCγ 是 ITK 介导的 TCR 信号通路的关键下游效应分子，其 IC50 值为 55 nM。在功能性细胞实验中，该化合物的 EC50 值为 354.5 nM。GNE-9822 表现出极佳的激酶组选择性：在 0.1 μM 的浓度下（>ITK Ki 值 0.7 nM 的 100 倍），针对 286 种非靶标激酶进行测试时，仅有 6 种激酶的抑制率 >70%。这种显著的选择性确保了观察到的细胞效应主要归因于 ITK 抑制，而不是脱靶激酶活性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
GNE-9822（化合物 28；口服和静脉注射；剂量分别为 1 和 5 mg/kg）在小鼠和支架中均显示出良好的生物利用度和半衰期[1]。体内实验表明，GNE-9822（化合物 28）以 1 和 5 mg/kg 的剂量经口服 (po) 和静脉注射 (iv) 给药后，在小鼠和大鼠中均显示出良好的生物利用度和理想的半衰期。该化合物已在卵清蛋白 (OVA) 和屋尘螨 (HDM) 诱导的小鼠哮喘模型中进行了评估，其在小鼠中的口服生物利用度为 36%，支持每日两次 (BID) 的给药方案。在清醒豚鼠中，GNE-9822（0.3 mg/kg；腹腔注射）可显著降低额叶皮层细胞外 5-羟色胺 (5-HT) 水平。这些体内研究表明，GNE-9822 能有效调节活体生物体内的 ITK 依赖性通路，并支持其作为研究 ITK 在炎症疾病模型中作用的工具化合物的用途。
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| 酶活实验 |
使用重组ITK酶和底物肽进行体外激酶活性测定，评估GNE-9822对ITK的抑制作用。采用放射性标记ATP或基于发光的测定方法（例如ADP-Glo）测量激酶活性，并使用合适的酶动力学模型，根据剂量-反应曲线计算Ki值。选择性分析通过在0.1 μM浓度下（比其ITK Ki值0.7 nM高100倍以上）测试化合物对286种非靶标激酶的竞争性结合或活性测定来进行；只有抑制率>70%的激酶才被认为是显著的靶点。表面等离子共振（SPR）或等温滴定量热法（ITC）可用于直接测量结合亲和力和动力学。
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| 细胞实验 |
在T细胞系或原代T细胞中评估细胞内ITK活性。在用抗CD3/抗CD28抗体刺激TCR前1-4小时，用不同浓度（通常为0.001-10 μM）的GNE-9822处理细胞。通过使用磷酸化特异性抗体（pY783）进行Western blot检测PLCγ1磷酸化水平来评估ITK介导的信号传导。使用荧光钙指示剂（例如Fluo-4 AM）在流式细胞术或基于酶标仪的检测中测量钙离子内流。通过ELISA或多重检测法检测细胞培养上清液中的细胞因子（IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-13）的产生。刺激72小时后，通过3H-胸苷掺入或CFSE稀释来评估T细胞增殖。 IC50 和 EC50 值是通过非线性回归分析从剂量反应曲线计算得出的。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型： BALB/c（Bagg ALBino）小鼠和SD（Sprague-Dawley）大鼠[1]
剂量： 1 和 5 mg/kg 给药途径： 口服 (5 mg/kg) 和静脉注射 (iv) (1 mg/kg) 实验结果： 1.19 给药途径 剂量 体积 (mL/kg) 剂量 (mg/kg) Cmax (μM) AUC (μM·h) Cl (mL/min/kg) T1/2 (h) Vss (L/kg) %F 小鼠 (BALB/c) 静脉注射 1.0 1.0 1.5 40 2.9 10 小鼠 (BALB/c) 口服 5.0 50 3.8 2.7 36 动物/疾病模型： balb/c（Bagg ALBino）小鼠和SD（SD（Sprague-Dawley））大鼠[1] 剂量： 1和5 mg/kg 给药途径： 口服（5 mg/kg）和静脉注射（1 mg/kg） 实验结果： 1.19 给药途径 剂量 体积（mL/kg） 剂量（mg/kg） Cmax（μM） AUC（μM·h） Cl（mL/min/kg） T1/2（h） Vss（L/kg） %F 大鼠（SD（SD（Sprague-Dawley）） 静脉注射 1.0） 1.0 0.6 70 3.0 14 大鼠（SD（SD（Sprague-Dawley）） 口服 2.0 5.0 0.2 1.1 40 在小鼠哮喘模型中研究了体内疗效，包括卵清蛋白 (OVA) 和屋尘螨 (HDM) 诱导的气道炎症模型。由于 GNE-9822 在小鼠体内的口服生物利用度为 36%，因此通常每日两次 (BID) 口服给药，剂量为 1-50 mg/kg。在大鼠和犬中，该化合物以 1-5 mg/kg 的剂量静脉注射或 5-50 mg/kg 的剂量口服给药。通过支气管肺泡灌洗液 (BALF) 细胞计数（嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞）、肺组织组织学分析（H&E 和 PAS 染色检测黏液生成）以及通过 ELISA 法测定 BALF 和肺匀浆中 Th2 细胞因子（IL-4、IL-5、IL-13）的水平来评估气道炎症。药效学标志物包括 ITK 磷酸化状态和下游信号通路中间体。在肺组织中。在清醒的豚鼠中，GR 125743（0.3 mg/kg；腹腔注射）可显著降低额叶皮层细胞外 5-HT 的含量。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
GNE-9822 具有良好的 ADME 特性，在多种动物模型中均表现出良好的药代动力学特征。在小鼠中，其血浆半衰期 (t1/2) 为 2.9 小时，口服生物利用度 (F%) 为 36%。在大鼠中，半衰期为 3.0 小时。在犬中，半衰期为 5.4 小时，口服生物利用度为 70%。该化合物在小鼠和大鼠中经口服和静脉注射 1 和 5 mg/kg 剂量后均显示出良好的生物利用度和半衰期。小鼠中 36% 的口服生物利用度支持在小鼠 OVA/HDM 研究中采用每日两次给药方案。这些药代动力学特性使其能够进行异速缩放，并支持 GNE-9822 用于临床前疗效研究。该化合物可溶于 DMSO，应按照小分子抑制剂的标准储存方案进行储存。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
GNE-9822 的具体毒理学数据在公开文献中尚未广泛发表。作为一种研究用化合物，应按照标准的实验室安全预防措施进行操作，包括使用适当的个人防护装备（手套、实验服、护目镜）和保持良好的通风。该化合物仅供研究使用，不得用于人类或兽医治疗。用户应查阅材料安全数据表 (MSDS) 以获取详细的安全信息，包括潜在危害、急救措施和处置注意事项。与所有激酶抑制剂一样，应采取适当措施避免吸入、摄入或皮肤接触。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
GNE-9822 是一种高质量的化学探针，专为研究 ITK 生物学和 T 细胞信号传导而开发。它尚未获准用于临床，仅供研究用途。该化合物被化学探针门户网站 (Chemical Probes Portal) 归类为探针，推荐浓度为 IC50：55 nM，抑制剂浓度最高可达 100 nM。GNE-9822 是通过一种以性质和结构为导向的方法发现的，该方法以四氢吲唑系列 ITK 抑制剂为靶点。相关研究包括发现具有体内活性的高效高选择性 ITK 降解剂，以及通过性质和结构导向发现四氢吲唑系列 ITK 抑制剂。该化合物具有卓越的激酶组选择性（对 286 种激酶的抑制率比 ITK Ki 高 100 倍以上，仅有 6 个化合物在 0.1 μM 浓度下抑制率超过 70%），使其成为验证 ITK 作为炎症性疾病治疗靶点以及解析 T 细胞生物学中 ITK 特异性信号通路的重要工具。
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| 分子式 |
C24H32N6O
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|---|---|
| 分子量 |
420.55
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| 精确质量 |
420.263
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| CAS号 |
1557232-32-2
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| PubChem CID |
74983355
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| LogP |
3.8
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| tPSA |
78.8
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
605
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
C1C=CC=CC=1[C@H](CCN(C)C)N1C=C(NC(=O)C2=NNC3CC(C)(CCC2=3)C)C=N1
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| InChi Key |
XFYUTGIEFKGWND-NRFANRHFSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H32N6O/c1-24(2)12-10-19-20(14-24)27-28-22(19)23(31)26-18-15-25-30(16-18)21(11-13-29(3)4)17-8-6-5-7-9-17/h5-9,15-16,21H,10-14H2,1-4H3,(H,26,31)(H,27,28)/t21-/m0/s1
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| 化学名 |
N-[1-[(1S)-3-(dimethylamino)-1-phenylpropyl]pyrazol-4-yl]-6,6-dimethyl-1,4,5,7-tetrahydroindazole-3-carboxamide
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| 别名 |
GNE9822; GNE 9822; GNE-9822
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~62.5 mg/mL (~148.61 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3778 mL | 11.8892 mL | 23.7784 mL | |
| 5 mM | 0.4756 mL | 2.3778 mL | 4.7557 mL | |
| 10 mM | 0.2378 mL | 1.1889 mL | 2.3778 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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