| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Musashi-1 (MSI1) (Ki = 12±2 nM against full-length MSI1; Ki = 62 nM against MSI1 RBD1)
Musashi-2 (MSI2) (Ki = 7.0±0.3 nM against full-length MSI2; Ki = 37 nM against MSI2 RRM1) Bcl-2 family (Bcl-xL Ki = 0.28 μM) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在结肠癌细胞系（HCT-116、HCT-116 β/W、DLD-1）中，10 μM Gn 处理导致细胞生长显著减少，与对照组相比。
集落形成实验证实，较高浓度的 Gn 处理导致形成的集落数量减少。 10 μM Gn 处理导致 PARP 裂解增加和 Caspase-3 激活增强，表明诱导了细胞凋亡。 20 μM Gn 诱导 DLD-1 细胞自噬，并通过活细胞成像证实了细胞凋亡。 Gn 诱导自噬通量，表现为 LC3 转化和 p62 降解；氯喹 (CQ) 预处理可阻断 p62 降解。 Gn 处理可增加 P21 蛋白和 mRNA 水平。 Gn 处理可降低 MSI1、c-MYC、CCND1（细胞周期蛋白 D1）和 BIRC5（存活素）的蛋白和 mRNA 水平。 在 TOP/FOP 报告基因检测中，Gn 呈剂量依赖性地抑制 Wnt 信号通路报告基因活性。 与 (-)-棉酚相比，Gn 在下调细胞 Notch/Wnt 信号通路方面效果较差。例如，在HCT-116细胞中，AXIN2 mRNA水平分别为DMSO对照组（10 μM Gn）的50%和DMSO对照组（10 μM (-)-棉酚）的20%；在DLD-1细胞中，AXIN2 mRNA水平分别为DMSO对照组的80%和40%。 MTT实验表明，使用脂质体包裹Gn并未降低Gn的体外细胞毒性。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
以10 mg/kg的剂量，通过尾静脉注射给予裸鼠人结肠癌DLD-1异种移植瘤Gn-lip（载有Gn的聚乙二醇化脂质体），每周两次，持续3.5周，与未治疗的对照组相比，显著抑制了移植瘤的生长（P < 0.01，n = 10）。
Gn-lip组小鼠在治疗期间体重保持稳定，表明其全身毒性较低。 对Gn-lip治疗组小鼠肿瘤样本进行Western blot分析显示，PARP裂解（细胞凋亡）增加，而MSI1、活化的Notch、CYCLIN D1和SURVIVIN蛋白水平降低，表明Notch/Wnt信号通路活性降低。[1] |
| 酶活实验 |
采用荧光偏振 (FP) 竞争实验筛选 MSI1 抑制剂。该实验测定化合物破坏荧光素标记的 Numb RNA (5'-UAGGUAUGAGUUUUA-3') 与 MSI1 或 MSI2 蛋白结合的能力。Gn 的 Ki 值基于 Kd 值和剂量反应曲线计算得出。
采用表面等离子共振 (SPR) 证实 Gn 与 MSI1-RBD1 的直接结合。将 GB1 标记的 MSI1-RBD1 固定在传感器芯片上。在 5 μM Gn 浓度下，响应值为 50 RU；在 10 μM Gn 浓度下，响应值为 200 RU，表明结合呈剂量依赖性。 进行核磁共振 (NMR) 以确定结合界面。用 Gn 滴定 15N 标记的 MSI1-RBD1，并测定其二维 1H-15N HSQC 谱。结果显示，RNA结合残基（K93、F23和W29）受到的影响最为显著，表现为峰位改变和峰强度降低。 为了检测药物与靶点在细胞中的结合情况，我们进行了细胞热位移分析（CETSA）。将HCT-116 β/W细胞裂解液与不同浓度的Gn孵育30分钟，然后在52℃加热3分钟，之后冷却。通过Western blot分析可溶性组分中的MSI1蛋白，结果显示靶点结合呈浓度依赖性（Gn浓度越高，MSI1蛋白越稳定）。[1] |
| 细胞实验 |
细胞生长评估方法为：将细胞接种于96孔板中，用化合物处理，并根据既往文献采用MTT法进行检测。
克隆形成实验采用不同剂量的Gn或MP-Gr处理细胞，并计数形成的克隆数。 细胞凋亡评估方法为：通过Western blot检测PARP裂解，并通过Caspase-3激活实验检测Caspase-3激活。 自噬评估方法为：使用EVOS FL Auto细胞成像系统进行活细胞成像，观察自噬体的积累。此外，LC3转化和p62降解也通过Western blot进行分析。用氯喹（CQ，50 nM）预处理细胞16小时以阻断自噬通量。 采用Western blot分析检测MSI1、P21、c-MYC、CCND1、BIRC5、PARP、LC3、p62和α-微管蛋白的蛋白水平。药物处理48小时后收集细胞。 采用实时PCR（RT-PCR和定量实时PCR）检测P21、AXIN2和MSI1的mRNA水平。处理24小时后收集细胞。 在用DMSO或不同剂量Gn处理的HCT-116细胞中进行TOP/FOP Wnt信号报告基因检测，以评估Wnt抑制情况。 对于活细胞成像，用20 μM Gn或DMSO处理DLD-1细胞，并使用EVOS FL Auto细胞成像系统采集72小时内的图像。[1] |
| 动物实验 |
在生物分布研究中，将携带DLD-1肿瘤的SCID小鼠经静脉注射（iv）200 μL载有DiR的脂质体（10 nmol DiR）或游离DiR（10 nmol溶于200 μL乙醇/水（1:4 v/v）溶液中）。使用分子成像系统（激发波长750 nm，发射波长830 nm，曝光时间60 s）在不同时间点进行荧光成像。注射后72小时处死小鼠，收集器官和肿瘤进行离体成像。
在体内疗效研究中，将5-6周龄的雌性无胸腺NCR-nu/nu裸鼠两侧皮下注射200 μL DLD-1细胞悬液（1×10^6个细胞，溶于DMEM培养基）。当肿瘤平均体积达到40 mm^3时，将小鼠随机分为两组。第 1 组（10 只小鼠，20 个肿瘤）作为对照组，给予载体。第 2 组（5 只小鼠，10 个肿瘤）给予 10 mg/kg Gn-lip（载有 Gn 的聚乙二醇化脂质体）。Gn-lip 通过尾静脉注射给药，每周两次，持续 3.5 周。每周测量两次肿瘤大小（计算公式为 a×b²/2，其中 a 和 b 分别为肿瘤的最长直径和最短直径）和体重。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
棉酚 (Gn) 是棉酚的主要代谢产物，在肝脏中经 P450 酶氧化。
聚乙二醇化脂质体用于提高棉酚的生物利用度，实现肿瘤靶向递送和控释，从而增强其整体生物相容性和体内药物疗效。 载有二异丁烯醇 (DiR) 的脂质体的生物分布研究表明，脂质体中的 DiR 信号随时间推移在肿瘤区域增强，注射后 24 小时达到最强，且 DiR 主要在肿瘤中积累而非肝脏中积累。相比之下，游离的 DiR 则表现出非特异性分布、快速清除以及在肝脏中积累更多。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
接受 Gn-lip 治疗组（10 mg/kg，静脉注射，每周两次，持续 3.5 周）的小鼠体重在整个实验期间保持稳定，表明 Gn-lip 治疗的全身毒性较低。
Gn 与棉酚具有相似的生物活性，包括作为 Bcl-2 家族的抑制剂。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
棉酚 (Gn) 是棉酚的主要代谢产物。
在结合实验中，棉酚被证实是比 (-)-棉酚更有效的 MSI1 抑制剂（Ki 值分别为 12±2 nM 和 476±273 nM）。 由于 MSI1 和 MSI2 具有序列和结构相似性，尤其是它们的 N 端 RNA 识别基序 (RRM)，因此棉酚有望用作 MSI1/2 双重抑制剂。 工作模型提出，棉酚与 MSI1 的 RBD1 结合，破坏 MSI1 与靶 mRNA 的结合，从而解除对靶 mRNA 翻译（例如 NUMB、APC、P21）的抑制，最终导致 Notch/Wnt 信号通路减弱、细胞增殖减少和细胞凋亡增加。 棉酚的局限性在于它并非 MSI1/MSI2 特异性抑制剂，因为它也是 Bcl-2 家族抑制剂。 本研究提供了开发 Gn-lip（载有 Gn 的聚乙二醇化脂质体）作为治疗 MSI1/MSI2 过表达结肠癌的分子疗法的概念验证。[1] |
| 分子式 |
C30H26O10
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|---|---|
| 分子量 |
546.5214
|
| 精确质量 |
546.153
|
| CAS号 |
4547-72-2
|
| PubChem CID |
197045
|
| 外观&性状 |
Light yellow to brown solid powder
|
| 密度 |
1.485g/cm3
|
| 沸点 |
842.1ºC at 760 mmHg
|
| 闪点 |
477ºC
|
| 折射率 |
1.702
|
| LogP |
4.472
|
| tPSA |
183.34
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
10
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
40
|
| 分子复杂度/Complexity |
1300
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
CC1=C(C(=C2C(=C(C(=C(C2=C1O)C(C)C)O)O)C=O)O)C3=C(C(=O)C4=C(C(=O)C(=O)C(=C4C3=O)C=O)C(C)C)C
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| InChi Key |
FKZWANMBYLDTNI-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C30H26O10/c1-9(2)15-21-19(13(7-31)25(35)29(15)39)27(37)17(11(5)23(21)33)18-12(6)24(34)22-16(10(3)4)30(40)26(36)14(8-32)20(22)28(18)38/h7-10,33,35,37,39H,1-6H3
|
| 化学名 |
7-(8-formyl-3-methyl-1,4,6,7-tetraoxo-5-propan-2-ylnaphthalen-2-yl)-2,3,5,8-tetrahydroxy-6-methyl-4-propan-2-ylnaphthalene-1-carbaldehyde
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8298 mL | 9.1488 mL | 18.2976 mL | |
| 5 mM | 0.3660 mL | 1.8298 mL | 3.6595 mL | |
| 10 mM | 0.1830 mL | 0.9149 mL | 1.8298 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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