| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 体外研究 (In Vitro) |
格拉维林以剂量依赖的方式降低A375细胞的活力，48小时处理后IC50值为22.23 ± 0.79 μg/mL。相反，它对正常外周血单核细胞（PBMC）的细胞毒性作用极小且可忽略不计。[1] - 格拉维林诱导自噬的证据包括：使用吖啶橙染色（橙红色荧光）检测到酸性囊泡细胞器（AVO）；免疫印迹法检测到LC3-I（18 kDa）转化为LC3-II（16 kDa）；共聚焦显微镜观察到LC3点状分布增加；Atg5和Atg7表达上调；Bcl-2和mTOR表达下调；免疫印迹和共聚焦显微镜观察到Beclin-1表达增加。 [1]
- 在3-甲基腺嘌呤（3-MA，自噬抑制剂）存在的情况下，Beclin-1表达下调，AVO形成减少，细胞活力在IC50剂量下增加至61.86%（相比之下，单独使用graveoline时为50%），表明自噬导致细胞死亡。单独使用3-MA可将细胞活力提高至91.17%。[1] - Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术显示，graveoline诱导细胞凋亡，Annexin V阳性细胞数量逐渐增加。[1] - 3-MA阻断自噬未能阻止细胞凋亡的诱导；与单独使用graveoline相比，3-MA与graveoline联合使用时，早期细胞凋亡增加。相反，半胱天冬酶抑制剂z-DEVD-fmk成功抑制了细胞凋亡，但与单独使用graveoline相比，自噬体形成略有增加，细胞活力也略有提高，这表明自噬性细胞死亡的发生与细胞凋亡无关。[1] - graveoline在早期（4至6小时之间）通过H2DCFDA染色和流式细胞术检测发现活性氧（ROS）水平升高。[1] - 在抗坏血酸（ROS清除剂）存在的情况下，graveoline未能升高ROS水平，也未能诱导显著的细胞死亡（在IC50剂量下细胞活力增加至88.62%），表明细胞死亡是由ROS介导的。 [1] - 3-MA 对自噬的抑制并不影响格拉维林诱导的 ROS 生成，这表明 ROS 生成位于自噬诱导的上游。[1] |
|---|---|
| 细胞实验 |
细胞活力检测（MTT）：将A375细胞和PBMC暴露于不同浓度（0–35 μg/mL）的graveoline中48小时。采用MTT法测定细胞活力。A375细胞的IC50值为22.23 ± 0.79 μg/mL。[1]
- 吖啶橙法检测和定量AVO：将细胞暴露于graveoline（22.23 ± 0.79 μg/mL）48小时后，收集细胞，用70%冰乙醇固定，用5 mM吖啶橙染色，并在荧光显微镜下观察。采用流式细胞术定量分析荧光变化。 [1] - 免疫印迹分析：细胞用格拉维奥林（graveoline，22.23 ± 0.79 μg/mL）处理不同时间点（0–48 小时）。使用的抗体包括：抗 LC3、抗 Beclin-1、抗 Atg5、抗 Atg7、抗 mTOR、抗 Bcl-2 和抗 GAPDH（内参）。通过免疫印迹检测蛋白表达。[1] - Beclin-1 和 LC3 的共聚焦显微镜观察：将处理后的细胞接种于盖玻片上，固定、透化，用 2% BSA + 0.5% Triton X-100 的 PBS 溶液封闭，与一抗（Beclin-1 和 LC3）在 37°C 孵育 2 小时，然后与 FITC 标记的二抗孵育，用 DAPI（10 μg/mL）染色，最后封片。使用共聚焦显微镜采集图像。 [1] - Annexin V-FITC/PI 双染法：将约 10^5 个细胞用 graveoline（22.23 ± 0.79 μg/mL，处理 48 小时）处理，处理过程中分别加入或不加入 z-DEVD-fmk 或 3-MA。细胞用 FITC 标记的 Annexin V (10 μM) 和 PI (5 μM) 染色。分别使用 FL-1 滤光片 (530 nm) 和 FL-2 滤光片 (585 nm) 测量荧光强度；采集 10^4 个事件。数据通过流式细胞仪进行分析。 [1] - 细胞内活性氧（ROS）生成分析：将细胞在有或无抗坏血酸（300 μM）或3-MA存在的情况下，用graveoline（22.23 ± 0.79 μg/mL）处理不同时间点（0-48 h），然后与10 μM H2DCFDA孵育。在荧光显微镜下进行定性分析；使用FL-1H滤光片，在激发波长480 nm和发射波长530 nm下，通过流式细胞仪进行定量分析。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
MTT 检测结果显示，浓度高达 35 μg/mL 的 Graveoline 在 48 小时内对正常人外周血单核细胞 (PBMC) 的细胞毒性作用极小且可忽略不计。[1]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
芸香碱（Graveoline）是喹啉类化合物的一种。据报道，它存在于月见草（Oenothera biloba）、格里菲斯三叶草（Griffith's clover）以及其他一些有相关数据的生物体中。
- 芸香碱是从芸香（Ruta graveolens）的乙醇提取物中分离得到的一种生物碱。本文给出了其结构式和质谱图（m/z: 280.14 [M+1]+）。[1] - 芸香碱可诱导皮肤黑色素瘤A375细胞发生凋亡和自噬性细胞死亡，且自噬性细胞死亡与凋亡无关。这一特性对于抗癌药物设计具有重要意义，尤其因为癌细胞可能对凋亡产生耐药性，但仍可通过自噬途径被杀死。[1] - 其分子机制涉及活性氧（ROS）的产生，而ROS的产生位于自噬诱导的上游； ROS水平升高是格拉维林诱导细胞死亡的必要条件。[1] |
| 分子式 |
C17H13NO3
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|---|---|
| 分子量 |
279.2900
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| 精确质量 |
279.09
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| CAS号 |
485-61-0
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| PubChem CID |
353825
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| 外观&性状 |
White to off-white solid
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| 密度 |
1.327g/cm3
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| 沸点 |
436.7ºC at 760mmHg
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| 熔点 |
204-205 °C
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| 闪点 |
217.9ºC
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| 蒸汽压 |
7.91E-08mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.652
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| LogP |
2.934
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| tPSA |
40.46
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
21
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| 分子复杂度/Complexity |
461
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O1C([H])([H])OC2C([H])=C([H])C(=C([H])C1=2)C1=C([H])C(C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C2N1C([H])([H])[H])=O
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| InChi Key |
COBBNRKBTCBWQP-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H13NO3/c1-18-13-5-3-2-4-12(13)15(19)9-14(18)11-6-7-16-17(8-11)21-10-20-16/h2-9H,10H2,1H3
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| 化学名 |
2-(1,3-benzodioxol-5-yl)-1-methylquinolin-4-one
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.5805 mL | 17.9025 mL | 35.8051 mL | |
| 5 mM | 0.7161 mL | 3.5805 mL | 7.1610 mL | |
| 10 mM | 0.3581 mL | 1.7903 mL | 3.5805 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
鲑鱼精DNA
绞股蓝皂苷LI
伪金丝桃素
Trans-4-Cotininecarboxylic acid
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