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GW-590735

别名: GW 590735; GW-590735;343321-96-0; 622402-22-6; GW590735; GW-590735; 2-methyl-2-(4-((4-methyl-2-(4-(trifluoromethyl)phenyl)thiazole-5-carboxamido)methyl)phenoxy)propanoic acid; QKY617BBX5; CHEMBL219586; GW590735
目录号: V60007
COA 产品数据 产品说明书 SDS
GW 590735 是一种有效且特异性的 PPARα 激动剂。
GW-590735 CAS号: 343321-96-0
产品类别: PPAR
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
10 mM * 1 mL in DMSO
1mg
2mg
5mg
10mg
25mg
50mg
100mg
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纯度: ≥98%

COA
MSDS
NMR
产品说明书
产品描述
GW 590735 是一种有效且特异性的 PPARα 激动剂。 GW 590735 对 PPARα 的 EC50=4 nM，与 PPARδ 和 PPARγ 相比，选择性至少高 500 倍。 GW 590735 可用于血脂异常的研究/学习。
生物活性&实验参考方法
靶点
PPARα
体外研究 (In Vitro)
过氧化物酶体增殖物激活受体PPARα、PPARγ和PPARδ是配体激活的转录因子，在脂质稳态中起着关键作用。贝特类药物提高了高密度脂蛋白胆固醇的循环水平，降低了甘油三酯的水平，部分原因是它们作为PPARalpha激动剂的活性；然而，贝特类药物的低效力和有限的选择性可能会限制其疗效，因此需要开发更有效和更具选择性的PPARalpha激动剂。选择性PPARdelta激动剂1（GW501516）的修饰，以掺入贝特类的2-芳基-2-甲基丙酸基团，导致效力和选择性明显向PPARα激动作用转变。该系列的优化得到25a，其显示PPARalpha的EC50=4nM，与PPARdelta和PPARgamma相比，选择性至少为500倍。化合物25a（GW590735）已进入治疗脂质失衡疾病的临床试验[1]。
体内研究 (In Vivo)
GW 590735（0.5–5 mg/kg；口服，每日两次，持续 5 天）可在 Apo-AI 转基因小鼠模型（人类转基因雄性 C57BL/6 小鼠）中升高 HDL 胆固醇并降低 LDLc 和 TG。 APOA-II)(1)。 2.4 小时后，分别显示 GW 590735（IV；2.7 mg/kg；大鼠）的 Cl、Vd、T1/2 和 F%、1 L/kg、5 mL/min/kg 和 47% [1] 。 GW 590735（IV；2 mg/kg；狗）治疗结果显示，Cl、Vd、T1/2 和 F% 分别为 13 mL/min/kg、2.8 L/kg、2.6 小时和85% [1]。
酶活实验
然后用缓冲液C将蛋白质稀释至1mg/mL，使最终缓冲液组合物为220mM乙酸铵、20mM HEPES pH 7.5、1mM EDTA和1mM DTT。肽SRC116以1.5的摩尔比作为2mg/100μL DMSO储备加入。然后以5:1的摩尔比加入2 mg/100μL DMSO原液中的配体，并在4 K下旋转20分钟以澄清溶液，然后在Centriprep 10过滤装置中浓缩。将含有PPARαLBD-SRC1复合物的溶液浓缩至约10mg/mL，产率为80%[1]。
细胞实验
使用质粒载体pRSETA的T7启动子表达具有N端6xHis标签的PPARα配体结合结构域（氨基酸192−468）。用该表达载体转化的BL21（DE3）大肠杆菌细胞在24°C的摇瓶中生长66小时。收获细胞，重新悬浮并裂解。将裂解的细胞离心，并将上清液装载在镍琼脂糖柱上。用150mL缓冲液A（10%甘油，20mM HEPES pH 7.5，25mM咪唑）洗涤柱，用450mL缓冲液B梯度（10%甘油、20mM HEPES pH 7.5，500mM咪唑）洗脱蛋白质。在20%缓冲液B中洗脱的蛋白质用一倍体积的缓冲液C（20mM HEPES，pH 7.5，1mM EDTA）稀释，并装载在100mL S-Sepharose柱上。用100mL缓冲液C洗涤柱，用200mL梯度缓冲液D（20mM HEPES，pH 7.5，10mM DTT，1M乙酸铵）洗脱PPARαLBD蛋白。PPARαLBD在43%缓冲液D下从柱中洗脱。SDS-PAGE分析确定，蛋白质产量为9mg/L生长的细胞，纯度>95%[1]。
动物实验
大鼠和犬的药代动力学研究。[1]
化合物25a以3 mg/kg的剂量，溶于pH 7、0.1% Tween80的缓冲液中，经口灌胃给予Wistar大鼠（n = 15）；并以2.7 mg/kg的剂量，溶于10% DMSO和PEG200的溶液中，经阴茎静脉注射给予Wistar大鼠（n = 30）。化合物25a以3 mg/kg的剂量，溶于pH 7、0.1% Tween80的缓冲液中，经胃管灌注给予雄性比格犬（n = 3）；并以2 mg/kg的剂量，溶于10% DMSO和PEG200的溶液中，经头静脉注射给予雄性比格犬。血液样本置于冰水上，离心后收集血浆。血浆样本冷冻保存于-20 °C，直至分析。血浆样品（0.5 mL）用 1:1 缓冲液（NaH₂PO₄，0.1 M，pH 4）稀释，然后用乙酸乙酯（5 mL）萃取。乙酸乙酯蒸发后，残余物用 200 μL 流动相（水/乙腈/三氟乙酸；30v/70v/0.1%）重悬。采用高效液相色谱-串联质谱法（LC/MS/MS）分析样品。药代动力学参数采用 SIPHAR 系统测定。
Apo-AI 转基因小鼠模型。[1]
将携带人 ApoA-I 转基因的雄性 C57BL/6 小鼠随机分为 n = 5 组。从小鼠 9 周龄开始，每天两次口服给予赋形剂（0.5% HPMC/1% Tween80，pH = 7.0）或指定剂量的化合物混悬液，持续 5 天。动物禁食过夜后，通过心脏穿刺采集血样。收集并称量整个肝脏。血样在37℃下静置30分钟使其凝固，然后以10000 rpm离心10分钟。收集总血清，并冷冻于-20℃直至使用。分别使用试剂盒61219和61236，按照制造商说明测定总胆固醇和总甘油三酯。在37℃孵育10分钟后，使用iEMS读数仪在492 nm处读取比色反应。采用高效液相色谱法（HPLC）分离胆固醇、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）和极低密度脂蛋白（VLDL）组分。样品用磷酸盐缓冲液（不含Ca++和Mg++）稀释1/5，并在进行HPLC分析前用0.45 μm滤膜过滤以去除过量蛋白质。所有标有星号的变化均具有统计学意义（p < 0.05），经单因素方差分析（ANOVA）确定。
药代性质 (ADME/PK)
大鼠和犬体内的药代动力学。[1]
向大鼠静脉注射化合物 25a (GW590735) (2.7 mg/kg) 后，其组织分布有限，分布容积 (1 L/kg) 与体液总量 (0.6 L/kg) 相近。总血浆清除率较低 (5 mL/min/kg)，约占大鼠肝血流量的 6%。低清除率和中等分布容积导致血浆半衰期为 2.4 小时。单次口服 3 mg/kg 化合物 25a 后，1.5 小时后血浆中化合物的最大浓度为 1461 ng/mL。生物利用度较高（47%）。
以2 mg/kg的剂量静脉注射化合物25a（GW590735）后，药物在组织中的分布有限，分布容积（2.8 L/kg）大于体液总量（0.6 L/kg）。总血浆清除率中等（13 mL/min/kg），约占犬肝血流量的35%。中等清除率和低分布容积导致血浆半衰期为2.6小时。单次口服3 mg/kg的化合物25a后，血浆中化合物的最大浓度为1449 ng/mL。生物利用度较高（85%）。
参考文献

[1]. Substituted 2-[(4-aminomethyl)phenoxy]-2-methylpropionic acid PPARalpha agonists. 1. Discovery of a novel series of potent HDLc raising agents. J Med Chem. 2007;50(4):685-695.
其他信息
大鼠和犬的药代动力学研究。
大鼠静脉注射化合物 25a（2.7 mg/kg）后，其组织分布有限，分布容积（1 L/kg）与体液总量（0.6 L/kg）相近。总血浆清除率较低（5 mL/min/kg），约占大鼠肝血流量的 6%。低清除率和中等分布容积导致血浆半衰期为 2.4 小时。单次口服化合物 25a（3 mg/kg）后，1.5 小时后血浆中化合物的最大浓度为 1461 ng/mL。生物利用度较高（47%）。
犬静脉注射化合物 25a（2 mg/kg）后，其组织分布有限，分布容积（2.8 L/kg）大于体液总量（0.6 L/kg）。总血浆清除率中等（13 mL/min/kg），约占犬肝血流量的35%。中等清除率和低分布容积导致血浆半衰期为2.6小时。单次口服化合物25a（3 mg/kg）后，血浆中化合物的最大浓度为1449 ng/mL。生物利用度高（85%）。[1]
体内药理学。
该系列中的几种化合物在血脂异常动物模型中表现出显著的体内活性，化合物25a即为例证。人Apo-AI转基因小鼠模型被认为可能与人类疾病相关，因为在该模型中，贝特类药物可上调Apo-AI的表达，而不是像其他啮齿动物模型中观察到的那样抑制Apo-AI的表达。化合物 25a 对小鼠和人 PPAR 表现出相似的 PPARα 激动剂效力和选择性（小鼠 PPAR EC50，α = 15 nM；δ = 1000 nM；γ > 10000 nM）。将 25a 配制成 pH = 7.0 的 0.5% HPMC 100/1% Tween80 混悬液，每日口服两次，连续 5 天，可使循环中的 TG、VLDLc 和 LDLc 呈剂量依赖性降低，同时 HDLc 升高（表 7）。HDL 效应的 ED50 约为 1 mg/kg。治疗还提高了循环中的 Apo-AI 水平（数据未显示），这与作用机制一致。作为对照，在人 Apo-AI 转基因小鼠中测试了 50 mg/kg 的非诺贝特。该化合物产生了预期的效果，血浆甘油三酯（TG）、极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）均降低（分别降低43%、64%和78%），而高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）升高（升高26%）。在Apo-AI转基因小鼠模型中，化合物25a能够降低LDL-C和TG，并升高HDL-C，这一发现表明其在治疗血脂异常和高甘油三酯血症方面具有显著的治疗价值。化合物25a（GW590735）已进入治疗脂质代谢紊乱疾病的临床试验阶段。[1]
我们以选择性PPARδ激动剂1为基础，该激动剂对PPARα的活性较弱，由此开发了一系列高效选择性的PPARα激动剂，其中化合物25a已进入临床评估阶段。 25a 具有优异的效力和 PPAR 亚型选择性，表明该化合物在治疗血脂异常和高甘油三酯血症方面，比贝特类药物具有显著改善的治疗效果。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C23H21F3N2O4S
分子量
478.49
精确质量
478.117
元素分析
C, 57.73; H, 4.42; F, 11.91; N, 5.85; O, 13.37; S, 6.70
CAS号
343321-96-0
相关CAS号
343321-96-0
PubChem CID
9956726
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.3±0.1 g/cm3
折射率
1.572
LogP
5.22
tPSA
117Ų
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
9
可旋转键数目(RBC)
7
重原子数目
33
分子复杂度/Complexity
690
定义原子立体中心数目
0
SMILES
CC1=C(SC(C2=CC=C(C(F)(F)F)C=C2)=N1)C(NCC3=CC=C(OC(C)(C(O)=O)C)C=C3)=O
InChi Key
ILUPZUOBHCUBKB-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C23H21F3N2O4S/c1-13-18(33-20(28-13)15-6-8-16(9-7-15)23(24,25)26)19(29)27-12-14-4-10-17(11-5-14)32-22(2,3)21(30)31/h4-11H,12H2,1-3H3,(H,27,29)(H,30,31)
化学名
2-methyl-2-[4-[[[4-methyl-2-[4-(trifluoromethyl)phenyl]-1,3-thiazole-5-carbonyl]amino]methyl]phenoxy]propanoic acid
别名
GW 590735; GW-590735;343321-96-0; 622402-22-6; GW590735; GW-590735; 2-methyl-2-(4-((4-methyl-2-(4-(trifluoromethyl)phenyl)thiazole-5-carboxamido)methyl)phenoxy)propanoic acid; QKY617BBX5; CHEMBL219586; GW590735
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: ~250 mg/mL (~522.5 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.0899 mL 10.4495 mL 20.8991 mL
5 mM 0.4180 mL 2.0899 mL 4.1798 mL
10 mM 0.2090 mL 1.0450 mL 2.0899 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
+
+
计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

临床试验信息
NCT Number Recruitment interventions Conditions Sponsor/Collaborators Start Date Phases
NCT00169559 Completed Drug: GW590735
Drug: fenofibrate		 Dyslipidaemias GlaxoSmithKline November 2003 Phase 2
NCT00388180 Completed Drug: GW501516
Drug: GW590735		 Obesity
Dyslipidaemias		 GlaxoSmithKline December 2004
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