| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Dye reagent；DNA Stain
Hoechst 33342 analog 2 trihydrochloride targets DNA by binding to the minor groove. It is also described as a DNA topoisomerase inhibitor. Topoisomerases are enzymes that regulate DNA supercoiling and are essential for DNA replication and transcription. By inhibiting topoisomerase, this compound can interfere with DNA metabolism and exhibit anticancer activity. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
1. Hoechst 工作液的配制
1.1：Hoechst 储备液的配制。使用 DMSO 配制 1 mg/mL 的 Hoechst 储备液。 *注意：分装后，Hoechst 储备液应避光保存于 -4°C 或 -20°C。 1.2：工作液的配制：用 PBS 或无血清细胞培养基将储备液稀释至 10 μg/mL 的 Hoechst 工作液。 *注意：使用前，请确保 Hoechst 工作液的浓度适合您的实验，并使用新鲜配制的工作液以获得最佳结果。 2. 染色（悬浮细胞） 2.1：离心细胞，加入 PBS，然后洗涤两次，每次 5 分钟，或直至细胞密度达到 1×10⁶/mL。 2.2：加入 1 mL Hoechst 工作液，静置 3–10 分钟。 2.3：400 g 离心 3–4 分钟，弃上清液。 2.4：用 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。 2.5：将细胞重悬于 1 mL PBS 或无血清培养基中，使用流式细胞仪或荧光显微镜进行观察。 3.染色（贴壁细胞） 3.1：在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。 3.2：从培养基中取出盖玻片，并去除多余的培养基。 3.3：加入100 μL染料工作液，轻轻摇晃使染料完全覆盖细胞，孵育3-10分钟。 3.4：去除染料工作液，用培养基洗涤2-3次，每次5分钟，然后使用荧光显微镜或流式细胞仪观察。 注意 1. 请根据实际情况调整Hoechst工作液的浓度并进行配制。 2. 本产品仅限专业研究人员用于科学研究，不可用于临床诊断、治疗、食品或医药用途。 为了您的安全和健康，操作时请穿戴实验服和一次性手套。 在体外，Hoechst 33342类似物2三盐酸盐可用作DNA荧光染料。与DNA结合后，其荧光强度显著增强。它可用于活细胞或固定细胞中核DNA的染色，以进行荧光显微镜和流式细胞术分析。据报道，其抗癌活性也是目前的研究热点。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
Hoechst 33342类似物2三盐酸盐通常不作为体内治疗药物使用。它的主要用途是作为细胞和分子生物学应用中DNA染色的研究工具。作为一种DNA拓扑异构酶抑制剂，它可能具有抗癌研究的潜力，但目前并非临床药物。
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| 酶活实验 |
Hoechst 33342 可与 DNA 小沟中富含腺嘌呤-胸腺嘧啶的区域结合。与 DNA 结合后，荧光强度显著增强。本方案描述了使用 Hoechst 33342 标记培养细胞核 DNA 的方法。Hoechst 33342 也可用于固定细胞的染色，只需用 Hoechst 33342 代替 DAPI 即可。[1]
Hoechst 33342 也可用于固定细胞的染色，只需在“使用 DAPI 标记核 DNA”（Chazotte 2011a）一文中描述的方案中用 Hoechst 33342 代替 DAPI 即可。内源性细胞分子（例如还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸或黄素腺嘌呤二核苷酸）的自发荧光会降低信噪比，从而干扰成像。当探针和自发荧光分子的激发波长和/或发射波长相近时，就会发生这种情况，例如，激发波长通常小于 500 nm，尤其是在紫外波段。可以通过仔细选择激发波长和发射波长、用还原剂处理固定细胞（例如，用 1% 硼氢化钠 [NaBH4] 溶液处理 20 分钟）以及将实验图像与未标记的对照玻片进行比较来降低自发荧光。避免使用戊二醛固定，因为它会增加细胞自发荧光的干扰，尤其是在波长小于 500 nm 时。[1] 本方案假设目标细胞生长在浸入装有培养基的小型培养皿中的玻璃显微镜盖玻片上。通常，标记条件因细胞类型而异，可能需要根据具体用途修改方案。要将使用此处所述技术标记的细胞制成载玻片，请参阅“活细胞载玻片装片”（Chazotte 2011b）[3]。 有多种荧光染料可用于标记DNA，从而便于观察间期细胞的细胞核和有丝分裂细胞的染色体。Hoechst 33342 的一个优点是它能透过细胞膜，因此可以对活细胞进行染色。Hoechst 33342 与 DNA 小沟中富含腺嘌呤-胸腺嘧啶的区域结合。与 DNA 结合后，荧光强度显著增强。本方案描述了使用 Hoechst 33342 标记培养细胞核 DNA 的方法。 Hoechst 33342 类似物 2 三盐酸盐的体外检测方法与其他 Hoechst 染料的检测方法类似。典型的实验方案包括配制浓度为 1 mg/mL 的 DMSO 储备液，然后用 PBS 或无血清培养基稀释至工作浓度，通常为 10 μg/mL。将细胞与工作液孵育 3-10 分钟，洗涤后，在荧光显微镜下观察或通过流式细胞仪进行分析。 |
| 细胞实验 |
方法[1]
在整个实验过程中，切勿让细胞干燥。 1. 将 Hoechst 原液用水稀释 1:100，用于标记。 2. 从盖玻片上培养的细胞中吸出培养基。用 PBS+ 冲洗细胞三次。 3. 将细胞置于 Hoechst 标记液（步骤 1）中，室温孵育 10-30 分钟。 4. 吸出标记液。用 PBS+ 冲洗细胞三次。 5. 按照“活细胞载玻片装片法”（Chazotte 2011b）所述方法装片。 使用 Hoechst 33342 类似物 2 三盐酸盐的细胞分析包括将活细胞或固定细胞与染料孵育。对于活细胞染色，将染料加入培养基中，短时间孵育。洗涤后，即可对细胞进行成像或分析。对于固定细胞，染色步骤类似。使用合适的激发和发射滤光片测量染料的荧光强度。 |
| 动物实验 |
Hoechst 33342类似物2三盐酸盐通常不作为药物用于动物研究。其体内应用仅限于研究用途，例如在体外标记细胞，然后将其引入动物体内进行追踪。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
Hoechst 33342类似物2三盐酸盐的分子量为659.78 g/mol。它是一种小分子，可透过细胞膜。其荧光特性与其他Hoechst染料相似，激发和发射最大值均位于紫外/蓝光范围内。作为一种荧光染料，其药代动力学对于其典型的体外应用而言并非主要考虑因素。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Hoechst 33342类似物2三盐酸盐在用于DNA染色的低浓度下通常被认为无毒。然而，作为一种DNA拓扑异构酶抑制剂，它在高浓度下可能具有细胞毒性。处理该化合物时应遵循标准的实验室安全预防措施。本品仅供研究使用，不得用于人体治疗或诊断。
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| 参考文献 |
[1]. Chazotte B. Labeling nuclear DNA with hoechst 33342. Cold Spring Harb Protoc. 2011 Jan 1;2011(1):pdb.prot5557.
[2]. Chazotte B (2011a) Labeling nuclear DNA using DAPI. Cold Spring Harb Protoc doi:10.1101/pdb.prot5556. [3]. Chazotte B (2011b) Mounting live cells onto microscope slides. Cold Spring Harb Protoc doi:10.1101/pdb.prot5554. |
| 其他信息 |
细胞染色示例 1：Hoechst 33342 可用于细胞核的蓝色荧光染色。细胞染色示例 2：Hoechst 33342 可用于细胞核的蓝色荧光染色以检测细胞凋亡。1. 用 Hoechst 33342 染色细胞（10 分钟）。2. 使用荧光显微镜观察（成像）。细胞染色示例 3：Hoechst 33342 可用于染色质的蓝色荧光标记。1. 成像前，用 Hoechst 33342 (5 µg/mL) 对染色质进行短暂复染。2. 使用共聚焦显微镜观察（成像）。
Hoechst 33342 类似物 2 三盐酸盐是一种荧光染料和 DNA 拓扑异构酶抑制剂，具有抗癌活性。它是Hoechst 33342的类似物，用于对活细胞或固定细胞中的DNA进行染色，以便进行荧光显微镜和流式细胞术分析。它既是染色剂又是拓扑异构酶抑制剂，这种双重功能使其成为研究DNA生物学和癌症的独特工具。 |
| 分子式 |
C25H26CL3IN6O
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|---|---|
| 分子量 |
659.777014255524
|
| 精确质量 |
658.027
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| CAS号 |
155815-98-8
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| 相关CAS号 |
Hoechst 33342 analog 2;106050-84-4
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| PubChem CID |
137195726
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| 外观&性状 |
Light green to green solid powder
|
| tPSA |
84.1Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
6
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
36
|
| 分子复杂度/Complexity |
677
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
IC1=C(C=CC(=C1)C1=NC2=CC=C(C=C2N1)C1=NC2=CC=C(C=C2N1)N1CCN(C)CC1)O.Cl.Cl.Cl
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| InChi Key |
UMBXUMFHPPBTSO-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C25H23IN6O.3ClH/c1-31-8-10-32(11-9-31)17-4-6-20-22(14-17)30-25(28-20)16-2-5-19-21(13-16)29-24(27-19)15-3-7-23(33)18(26)12-15;;;/h2-7,12-14,33H,8-11H2,1H3,(H,27,29)(H,28,30);3*1H
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| 化学名 |
2-iodo-4-[6-[6-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzimidazol-2-yl]-1H-benzimidazol-2-yl]phenol;trihydrochloride
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| 别名 |
Hoechst-33342 analog 2 trihydrochloride
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~20 mg/mL (~30.31 mM)
DMSO : ~4 mg/mL (~6.06 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.5157 mL | 7.5783 mL | 15.1566 mL | |
| 5 mM | 0.3031 mL | 1.5157 mL | 3.0313 mL | |
| 10 mM | 0.1516 mL | 0.7578 mL | 1.5157 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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