PKC-theta inhibitor hcl

目录号: V25200 纯度: ≥98%
PKC-theta 抑制剂 HCl 是一种新型、有效的 PKC-θ 抑制剂
PKC-theta inhibitor hcl CAS号: 2253640-49-0
产品类别: Signaling Pathways 信号通路
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
2mg
5mg
10mg
25mg
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纯度: ≥98%

产品描述
PKC-θ抑制剂HCl是一种新型高效的PKC-θ抑制剂,IC50值为18 nM。蛋白激酶C θ (PKC-θ) 属于蛋白激酶C丝氨酸/苏氨酸激酶家族,最近的研究表明其在T细胞信号传导中发挥关键作用。PKC-θ所属的新型PKC家族(nPKC-δ、ε、η、θ)需要DAG和PS,但与钙离子无关。与其他大多数PKC不同,PKC-θ的表达具有局限性,仅存在于T细胞和骨骼肌中。小鼠敲除表型特异性地表现为成熟T细胞中NF-κB信号传导缺陷。PKC-θ-/-成熟T细胞中TCR介导的NF-κB激活缺失,但在胸腺细胞中则保持完整。IL-1和TNF-α诱导的NF-κB激活与野生型动物相当。T细胞水平正常。然而,IL-2分泌和T细胞增殖均受到显著抑制。T细胞活化后,PKCθ亚型会在T细胞受体(TCR)受到抗原刺激后发生易位。PKC-θ敲除小鼠的表型特异性地与T细胞活化相关,且该通路不依赖于钙离子。敲除表型表明,PKC-θ抑制剂可作为一种免疫抑制剂,因为它能使成熟T细胞无法增殖和释放IL-2。与已报道的免疫抑制剂不同,PKC-θ抑制剂不会影响T细胞的发育。自身免疫性疾病,例如银屑病,以及移植并发症的特征是由于T细胞活化异常而导致的致病反应。目前的治疗方法包括环孢素、FK506和类固醇,这些药物通过降低T细胞活化来减轻疾病严重程度。目前迫切需要一种副作用更安全的免疫抑制药物。这种潜力促使我们开发了一种超高通量筛选(uHTS)方法,旨在发现新型且选择性的PKC-θ小分子抑制剂。该筛选方法以及后续的先导化合物发现过程最终发现了一系列高效且选择性的PKC-θ抑制剂。本报告将重点介绍先导化合物的筛选过程和初步的构效关系(SAR)研究。
PKC-θ抑制剂盐酸盐是一种选择性蛋白激酶Cθ(PKCθ)抑制剂,其对PKCθ的IC50值为12 nM。该化合物是一种研究工具,用于研究PKCθ在T细胞活化和其他信号通路中的作用。PKCθ是免疫系统中的一种关键酶,其抑制作用正被探索用于治疗自身免疫性疾病和移植排斥反应。
生物活性&实验参考方法
靶点
PKCθ
PKC-theta inhibitor hcl specifically targets protein kinase C theta (PKCθ), a member of the protein kinase C family that plays a critical role in T-cell receptor signaling. By inhibiting PKCθ, the compound can modulate T-cell activation and function. This makes it a valuable tool for studying immune responses and for exploring therapeutic strategies for autoimmune diseases and transplant rejection. It has an IC50 of 12 nM.
体外研究 (In Vitro)
开展了一项超高通量筛选(uHTS)活动,旨在鉴定PKC-θ的选择性抑制剂。基于选择性和历史分析对先导化合物进行初步筛选,最终确定2,4-二氨基-5-硝基嘧啶类化合物为高效且选择性的PKC-θ抑制剂。本文构建了同源模型并进行了初步构效关系(SAR)分析,结果表明,2-芳基烷基氨基取代基与合适的4-二氨基取代基的组合对于实现对多种激酶的选择性至关重要。此外,本文还对部分化合物进行了先导化合物筛选[1]。体外实验表明,PKC-θ抑制剂盐酸盐对PKCθ具有高效且选择性的抑制作用,IC50值为12 nM。其活性特征在于能够抑制PKCθ介导的信号通路,例如下游底物的磷酸化。这使其成为研究PKCθ在各种细胞过程(尤其是T细胞生物学)中具体作用的宝贵工具。
体内研究 (In Vivo)
在体内研究中,PKC-θ抑制剂盐酸盐被用于研究PKCθ抑制的作用。虽然所提供的资料中并未详细列出具体的体内疗效数据,但其调节T细胞活化的机制支持其在自身免疫性疾病和移植排斥反应研究中的潜力。它是验证PKCθ作为治疗靶点的宝贵工具。
酶活实验
为了解决选择性问题,我们测试了一系列激酶的类似物,发现它们具有高度选择性。图4展示了38个代表性类似物的选择性数据,这些类似物对PKC-θ的IC50值均小于0.5 μM,测试对象为13种激酶,数据来自494个独立的剂量反应。图中从底部向上递增。即使在这些高选择性类似物中,也能观察到一些趋势。连接基团延长的类似物往往表现出选择性降低(46–48),邻位苯基类似物 25 也如此。这些类似物表现出的高选择性可解释为:需要位置合适的氨基与 Asp508 相互作用,同时 2-苄氨基取代基通过与富含甘氨酸的环、特异性表面和铰链区的相互作用来控制特异性[1]。
体外酶/受体结合研究采用激酶活性测定法对 PKC-θ 抑制剂盐酸盐进行。在这些测定中,将 PKCθ 激酶与其底物和 ATP 在不同浓度的抑制剂存在下孵育。通过检测底物的磷酸化来测量酶活性。这些实验测得 IC50 为 12 nM,证实了该化合物对 PKCθ 的强效抑制作用。
细胞实验
除了选择性之外,其他先导化合物筛选标准还包括细胞活性以及可接受的类药性质。这些化合物也被证实具有ATP竞争性。细胞活性通过测量经抗CD3和抗CD28单克隆抗体共刺激激活的人CD4+ T细胞中IL-2产生的抑制情况来评估。我们还评估了代表性化合物对CYP的抑制作用、对人肝微粒体(HLM)的稳定性以及在Caco-2细胞中的渗透性(表5)。尽管这些化合物含有硝基,这可能是一个潜在的结构警示,但总体而言,其性质符合先导化合物筛选流程的进一步推进要求[1]。
体外细胞实验用于研究PKC-θ抑制剂盐酸盐对T细胞功能的影响。用该化合物处理T细胞,然后通过T细胞受体进行刺激。关键的检测指标包括下游信号传导的抑制,例如PKCθ底物的磷酸化,以及细胞因子(例如IL-2)产生的减少。这些检测证实了其在细胞环境中的作用机制。
动物实验
现有文献中关于PKC-θ抑制剂盐酸盐的体内动物研究数据并不丰富。作为研究T细胞生物学的工具,该化合物可用于自身免疫性疾病或移植排斥的动物模型。在这些模型中,动物将接受该化合物治疗,研究终点包括疾病严重程度的降低、T细胞活化标志物的减少以及炎症细胞因子水平的下降。
药代性质 (ADME/PK)
PKC-θ抑制剂盐酸盐的药代动力学特性由其分子量490.91 g/mol和分子式C₂₀H₂₆ClF₃N₆O₃表示。其溶解度和其他药代动力学参数在所提供的资料中未详细说明。为保持稳定性,通常将其以粉末形式储存在-20°C。这些特性对于其在实验室研究中的应用至关重要。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
由于PKC-θ抑制剂盐酸盐是一种研究性化合物,其毒理学数据有限。它的主要价值在于作为研究T细胞信号传导的工具。虽然具体的毒性特征尚未详细阐述,但其调节免疫系统的机制可能产生显著影响。目前尚无公开的全面安全性研究数据。
参考文献
[1]. Discovery of potent and selective PKC-θ inhibitors. Bioorg. Med. Chem. Lett. 17(1), 225-230 (2007).
其他信息
PKC-θ抑制剂盐酸盐是一种仅供研究使用的化合物,它是一种强效且选择性的PKCθ抑制剂。其CAS号为2253640-49-0。它也被称为蛋白激酶C θ抑制剂。该化合物是研究人员研究PKCθ在T细胞活化和免疫反应中作用的重要工具。它并非获批药物。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C20H26CLF3N6O3
分子量
490.9071
精确质量
490.17
元素分析
C, 48.93; H, 5.34; Cl, 7.22; F, 11.61; N, 17.12; O, 9.78
CAS号
2253640-49-0
PubChem CID
137935722
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
tPSA
131Ų
氢键供体(HBD)数目
4
氢键受体(HBA)数目
11
可旋转键数目(RBC)
8
重原子数目
33
分子复杂度/Complexity
586
定义原子立体中心数目
0
SMILES
C1CC(CCC1CN)CNC2=NC(=NC=C2[N+](=O)[O-])NCC3=CC=CC=C3OC(F)(F)F.Cl
InChi Key
NCC1CCC(CNC2=NC(NCC3=C(C=CC=C3)OC(F)(F)F)=NC=C2[N+]([O-])=O)CC1.Cl
InChi Code
InChI=1S/C20H25F3N6O3.ClH/c21-20(22,23)32-17-4-2-1-3-15(17)11-26-19-27-12-16(29(30)31)18(28-19)25-10-14-7-5-13(9-24)6-8-14;/h1-4,12-14H,5-11,24H2,(H2,25,26,27,28);1H
化学名
N4-((4-(aminomethyl)cyclohexyl)methyl)-5-nitro-N2-(2-(trifluoromethoxy)benzyl)pyrimidine-2,4-diamine hydrochloride
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.0370 mL 10.1852 mL 20.3703 mL
5 mM 0.4074 mL 2.0370 mL 4.0741 mL
10 mM 0.2037 mL 1.0185 mL 2.0370 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们