Iodopravadoline (AM630)

别名: iodopravadoline; AM630; AM-630; (6-iodo-2-methyl-1-(2-morpholinoethyl)-1H-indol-3-yl)(4-methoxyphenyl)methanone; AM-630; 6-iodopravadoline; iodopravadoline; AM 630; Iodopravadoline (AM630); AM 630 [6-碘-2-甲基-1-[2-(4-吗啉基)乙基]-1H-吲哚-3-基](4-甲氧基苯基)甲酮; [6-碘-2-甲基-1-[2-(4-吗啉基)乙基]-1H-吲哚-3-基](4-甲氧基苯基)甲酮; (4-甲基苄基)丁基-1-胺;AM630
目录号: V22612 纯度: ≥98%
Iodopravadoline,以前称为 AM630,是人类大麻素 CB1 受体的反向激动剂。
Iodopravadoline (AM630) CAS号: 164178-33-0
产品类别: Cannabinoid Receptor
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
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50mg
100mg
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纯度/质量控制文件

纯度: ≥98%

产品描述
Iodopravadoline,以前称为 AM630,是人大麻素 CB1 受体的反向激动剂。已发现碘普瓦多林可减弱多种大麻素抑制小鼠离体输精管电诱发抽搐的能力。 AM630 作为 delta 9-THC 和 CP 55,940 的拮抗剂(Kd 分别 = 14.0 和 17.3 nM)明显比作为 WIN 55,212-2、AM356 或 anandamide 的拮抗剂(Kd 分别 = 36.5、85.9 和 278.8 nM)更有效。
生物活性&实验参考方法
靶点
CB2 receptor ( Ki = 31.2 nM )
体外研究 (In Vitro)
AM630 在 AM630 预孵育的细胞中表现出不同的行为,例如在载体预孵育的细胞中为低效中性竞争性拮抗剂、低效激动剂和高得多效价的反向激动剂/拮抗剂。 hCB2受体有两种形式:组成型活性,其产生激动或中性拮抗作用的亲和力较低;组成型失活,其产生反向激动的亲和力高得多。 AM630 是一种多变的配体,可以靶向这两种形式的受体。 [2]
体内研究 (In Vivo)
持续的 AM630 治疗可减少高架十字迷宫 (EPM) 和明暗盒 (LDB) 测试中的焦虑。长期 AM630 治疗会提高皮质和杏仁核中 GABAAγ2 和 GABAAγ2(CB2 受体)基因的表达并降低其蛋白表达。此外,长期施用 AM630 可以减少 DBA/2 小鼠在 LDB 测试中的焦虑。 AM630 能够有效减轻自发性焦虑 DBA/2 品系小鼠的焦虑,这强调了 CB2 受体作为治疗焦虑相关疾病的新靶点的潜力。 [1]
酶活实验
RT-PCR分析CB2受体、GABAAα2和GABAAγ2受体亚基的基因表达[1]
用RT-PCR方法检测了AM630和JWH133慢性治疗的瑞士ICR小鼠皮层和杏仁核中CB2受体和GABAA受体的主要抗焦虑亚基GABAAα2和GABAAγ2的基因表达。简言之,在最后一次施用AM630、JWH133或其相应的载体18小时后,杀死小鼠,并从头骨中取出大脑并在干冰上冷冻。根据Paxinos和Franklin(2001)的研究,在不同水平切割大脑切片(500µm),包括扣带皮层(图20和距额部1.34 mm)和杏仁核(基底外侧和中央杏仁核;图40,距额部−1.6 mm),并将其安装在载玻片上,在−80°C下储存。切片按照Palkovits(1983)描述的方法进行解剖。使用Biozol®总RNA提取试剂从脑打孔中获得总RNA。DNA酶消化后,按照制造商的指示进行逆转录。CB2受体、GABAAα2和GABAAγ2基因表达是通过使用Taqman®基因表达测定法(分别为Mm 00438286_m1、Mm 00433435_m1和Mm00433489_m1)作为双链DNA特异性荧光染料测量的,并在AbbiPrism 7700实时Cycler上进行。使用的参考基因是18S rRNA,使用Taqman核糖体RNA对照试剂检测。对所有引物-探针组合进行优化并验证基因表达的相对定量。简言之,将每个靶基因的数据标准化为内源性参考基因,并使用2-ΔΔCt方法确定靶基因丰度的倍数变化。[1]

蛋白质印迹法分析CB2受体、GABAAα2和GABAAγ2受体亚基蛋白的表达[1]
在测定和调整蛋白质水平后,将皮层和杏仁核组织的匀浆离心(12000×g,在4°C下20分钟),并与含有β-巯基乙醇(50µL/mL莱姆利)的莱姆利样品缓冲液(SDS 10%,蒸馏水,甘油50%,Tris-HCl 1M pH 6,8,二硫treitol和蓝色溴苯酚)混合。一旦按分子量分离,通过半干转移系统将电泳凝胶中的蛋白质印迹到硝化纤维膜上,并与针对CB2受体(1:1000稀释)、GABAAα2(1:1000稀释剂)和GABAAγ2抗体(Abcam;1:1000稀释度)的特异性一级抗体孵育。ECL™试剂盒按照制造商的说明(Amersham)揭示了由相应辣根过氧化物酶连接的二级抗体识别的蛋白质,并在X射线胶片(Amersam)上进行了可视化。通过密度计对放射自显影照片进行量化,并对几次曝光进行分析,以确保带强度的线性。所有密度计均以任意单位(AU)表示。在所有的蛋白质印迹分析中,管家基因β-肌动蛋白被用作负载对照。
细胞实验
hCB2 CHO 细胞膜用于与 [3H]-CP55940 或 [35S]-GTPγS 的结合测定。在含有 10 μM AM630 或二甲基亚砜作为媒介物的完全培养基中经历完整的 24 小时孵育期后,hCB2 CHO 细胞被严格清洗。制备膜的过程包括将细胞从烧瓶中刮出,以 489 xg 离心,然后将它们作为颗粒冷冻在 -20°C 下直至需要。在用于涉及放射性配体结合的实验之前,将细胞冷冻并在 GTPγS 结合缓冲液([35S]-GTPγS 结合测定)或 Tris 结合缓冲液(放射性配体置换测定)中稀释。
动物实验
雄性瑞士ICR小鼠,DBA/2 Ola Hs小鼠
1 mg/kg,2 mg/kg,3 mg/kg
腹腔注射
在明暗箱(LDB)和高架十字迷宫(EPM)实验中,评估了CB(2)受体激动剂JWH133和CB(2)受体拮抗剂AM630的急性及慢性治疗对瑞士ICR小鼠的影响。采用RT-PCR和Western blot检测了长期接受JWH133或AM630治疗的小鼠皮层和杏仁核中CB(2)受体、GABA(A)α(2)和GABA(A)γ(2)基因及蛋白的表达。在LDB实验中,评估了AM630慢性治疗对自发性焦虑的DBA/2小鼠的影响。[1]
参考文献

[1]. Br J Pharmacol . 2012 Feb;165(4):951-64.

[2]. Br J Pharmacol . 2012 Apr;165(8):2561-74.

其他信息
[6-碘-2-甲基-1-[2-(4-吗啉基)乙基]-3-吲哚基]-(4-甲氧基苯基)甲酮是一种N-酰基吲哚。
背景与目的:本研究旨在探讨CB(2)受体激动剂和拮抗剂在调节焦虑样行为中的作用。实验方法:采用明暗箱(LDB)和高架十字迷宫(EPM)实验,在瑞士ICR小鼠中评估了CB(2)受体激动剂JWH133和CB(2)受体拮抗剂AM630的急性及慢性治疗效果。通过RT-PCR和Western blot检测了长期接受JWH133或AM630治疗的小鼠皮层和杏仁核中CB(2)受体、GABA(A)α(2)和GABA(A)γ(2)基因及蛋白的表达。本研究在LDB模型中评估了AM630长期治疗对自发性焦虑的DBA/2小鼠的影响。主要结果:急性JWH133治疗未产生任何影响。急性AM630治疗增加了小鼠的焦虑,而JWH133预处理可阻断这种作用。在LDB和EPM测试中,慢性JWH133治疗增加了小鼠的焦虑样行为,而慢性AM630治疗则表现出抗焦虑作用。慢性AM630治疗增加了皮层和杏仁核中CB(2)受体、GABA(A)α(2)和GABA(A)γ(2)的基因表达,并降低了其蛋白表达。慢性JWH133治疗导致了相反的基因和蛋白改变。此外,慢性AM630给药降低了DBA/2小鼠在LDB测试中的焦虑水平。结论和意义:AM630或JWH133长期治疗后观察到的相反的行为和分子变化支持了CB(2)受体在焦虑调节中的关键作用。事实上,AM630 能有效降低自发性焦虑的 DBA/2 品系小鼠的焦虑程度,这进一步证实了 CB(2) 受体作为治疗焦虑相关疾病新靶点的潜力。[1]
背景和目的:我们研究了用 CB(2) 受体拮抗剂/反向激动剂 AM630 和 SR144528 预孵育 hCB(2) CHO 细胞,会如何影响这些配体以及其他配体靶向这些细胞或其细胞膜上的 hCB(2) 受体的方式。实验方法:我们检测了AM630、SR144528以及CB(1)/CB(2)受体激动剂CP55940和R-(+)-WIN55212调节hCB(2) CHO细胞中福斯克林刺激的cAMP生成、[(35)S]-GTPγS与这些细胞膜的结合,以及从完整细胞和细胞膜上置换[(3)H]-CP55940的能力。我们还使用CB(2)受体部分激动剂Δ(9)-四氢大麻酚进行了实验。部分细胞预先用AM630或SR144528孵育,然后进行充分洗涤。主要结果:在预先用AM630孵育的细胞中,AM630表现为低效价的中性竞争性拮抗剂;在预先用SR144528孵育的细胞中,AM630表现为低效价的激动剂;而在预先用载体孵育的细胞中,AM630则表现为高效价的反向激动剂/拮抗剂。AM630预孵育(i)降低了SR144528的反向效力,但并未完全消除其作用;(ii)提高了Δ(9)-四氢大麻酚的效力;(iii)不影响AM630从完整细胞中置换[(3)H]-CP55940的效力,也不影响其在[(35)S]-GTPγS膜测定中的反向激动剂效力和效力。结论和意义:这些结果表明,AM630 是一种多功能配体,它能以低亲和力靶向 hCB(2) 受体的组成型活性形式 (R) 产生激动作用或中性拮抗作用,并以更高的亲和力靶向该受体的组成型非活性形式 (R) 产生反向激动作用,并且与高效反向激动剂 SR144528 相比,用 AM630 预孵育对整个细胞的组成型活性的降低程度较小。[2]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C23H25IN2O3
分子量
504.3685
精确质量
504.09
元素分析
C, 54.77; H, 5.00; I, 25.16; N, 5.55; O, 9.52
CAS号
164178-33-0
相关CAS号
164178-33-0
PubChem CID
4302963
外观&性状
Solid powder
密度
1.5±0.1 g/cm3
沸点
605.9±55.0 °C at 760 mmHg
闪点
320.3±31.5 °C
蒸汽压
0.0±1.7 mmHg at 25°C
折射率
1.647
LogP
4.65
tPSA
43.7
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
4
可旋转键数目(RBC)
6
重原子数目
29
分子复杂度/Complexity
548
定义原子立体中心数目
0
SMILES
CC1=C(C2=C(C=C(C=C2)I)N1CCN3CCOCC3)C(=O)C4=CC=C(C=C4)OC
InChi Key
JHOTYHDSLIUKCJ-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C23H25IN2O3/c1-16-22(23(27)17-3-6-19(28-2)7-4-17)20-8-5-18(24)15-21(20)26(16)10-9-25-11-13-29-14-12-25/h3-8,15H,9-14H2,1-2H3
化学名
[6-iodo-2-methyl-1-(2-morpholin-4-ylethyl)indol-3-yl]-(4-methoxyphenyl)methanone
别名
iodopravadoline; AM630; AM-630; (6-iodo-2-methyl-1-(2-morpholinoethyl)-1H-indol-3-yl)(4-methoxyphenyl)methanone; AM-630; 6-iodopravadoline; iodopravadoline; AM 630; Iodopravadoline (AM630); AM 630
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: ~50 mg/mL (~99.1 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.9827 mL 9.9134 mL 19.8267 mL
5 mM 0.3965 mL 1.9827 mL 3.9653 mL
10 mM 0.1983 mL 0.9913 mL 1.9827 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片
  • Acute dose-response effects of AM630 and JWH133 in the LDB test in Swiss ICR mice. Br J Pharmacol . 2012 Feb;165(4):951-64.
  • Chronic dose-response effects of AM630 and JWH133 in LDB and EPM tests in Swiss ICR mice. Br J Pharmacol . 2012 Feb;165(4):951-64.
  • The effect of AM630 on forskolin-induced stimulation of cAMP production in CHO cells transfected with hCB2 receptors that had or had not been pre-incubated with 10 µM AM630 for 24 h. Br J Pharmacol . 2012 Apr;165(8):2561-74.
  • Displacement of [3H]-CP55940 by AM630 and CP55940 from specific binding sites on hCB2 CHO cell membranes (A and B) or hCB2 CHO whole cells that had or had not (untreated) been pre-incubated with 10 µM AM630 for 24 h (C and D). Br J Pharmacol . 2012 Apr;165(8):2561-74.
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