Isotetrandrine

别名: Isotetrandrine; (R,S)-Tetrandrine; Isosinomenin A; Isotetrandrine; 477-57-6; (+)-Isotetrandrine; O-Methylberbamine; O,O'-Dimethylobamegine; Isosinomenine A 异汉防己碱;异汉防己甲素;异防己甲素;异粉防己碱
目录号: V17740 纯度: ≥98%
异粉防己碱是一种新型的、天然存在的、细胞渗透性的、有效的 PLA2 抑制剂,存在于 S.
Isotetrandrine CAS号: 477-57-6
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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5mg
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纯度/质量控制文件

纯度: ≥98%

产品描述
异四氢帕马汀是一种新型的、天然存在的、细胞渗透性强效的PLA2抑制剂,存在于尖叶防己中。它能阻断NMO-IgG与AQP4的结合,而不影响AQP4的表达和功能。它还能抑制NMO患者血清中NMO-IgG与星形胶质细胞AQP4的结合,并阻断NMO-IgG依赖的补体介导的细胞毒性。
异四氢帕马汀(CAS号:477-57-6)是一种天然存在的双苄基异喹啉生物碱,存在于诸如四氢帕马汀(Stephania tetrandra)和其他防己科植物中。它是四氢帕马汀的立体异构体。异四氢帕马汀是一种细胞渗透性强效的细胞质磷脂酶A2(PLA2)抑制剂。它还能靶向α1肾上腺素受体。研究表明,该物质能够阻断NMO-IgG与AQP4的结合,而不影响AQP4的表达或功能。由于其具有抗炎特性,目前正在研究其在治疗各种炎症性疾病方面的潜力。
生物活性&实验参考方法
靶点
Endogenous Metabolite
Isotetrandrine primarily targets cytoplasmic phospholipase A2 (PLA2) and the α1 adrenoceptor. PLA2 is a key enzyme in the inflammatory response that catalyzes the release of arachidonic acid, the precursor for pro-inflammatory eicosanoids. By inhibiting PLA2, Isotetrandrine reduces the production of these inflammatory mediators. It has also been shown to inactivate MAPK and NF-κB signaling pathways, which are central to the inflammatory response.
体外研究 (In Vitro)
防己源自五味子(Schisandra chinensis)的根和根茎,常用于治疗类风湿性关节炎[1]。防己是最常用的传统中药之一,源自五味子(S. acutum)的根茎和五味子(S. tetrandra)的根。五味子和五味子已被广泛用于治疗类风湿性关节炎[1,2]。五味子的主要生物活性成分是生物碱和木脂素,如青藤碱、异青藤碱、木兰花碱和丁香脂素[3];而五味子的主要生物活性成分分别是四氢黄连碱和防己碱。此外,三裂叶五味子(C. trilobus)和防己(A. fangchi)也分别被称为“木防己”和“广防己”。三裂叶芹(C. trilobus)在民间医学中被用作利尿剂、镇痛剂和抗炎剂。不同产地的防己属植物的化学成分略有差异。因此,开发一种能够同时测定多种结构特征的实用方法,对于不同产地防己属植物的质量控制至关重要。防己的研究已采用多种分析方法,包括高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)、液相色谱-二极管阵列检测器-质谱联用(LC-DAD-MS)、液相色谱-二极管阵列检测器-串联质谱(LC-DAD-MS/MS)、气相色谱-质谱联用(GC-MS)和毛细管电泳(CE)。其中,高效液相色谱法(HPLC)作为一种精准的中药质量控制工具已被广泛应用。近年来,由于超高效液相色谱法(UHPLC)具有分析速度快、峰容量高等优点,HPLC分析逐渐被UHPLC所取代。UHPLC-DAD方法已被用于丹参和黄连中特定成分的化学指纹图谱分析。本研究按照先前报道的方法分离了防己属植物中的标志性化合物。经高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)评估,分离得到的化合物纯度均大于90%。采用快原子轰击质谱(FAB-MS)正离子模式检测了这些化合物的质子化、钠加合物或完整分子[M+H]+、[M+Na]+或[M]+。为了阐明从尖叶防己(S. Acutum)中分离得到的生物碱和丁香脂醇的元素组成,使用高分辨率质谱(HRMS)在10,000的质量分辨率下进行了精确质量测定。测得的[M+H]+离子质量与计算质量的偏差在2.6 mmu以内,吻合度极佳。为了同时测定防己属植物中的多种标志性化合物(生物碱、硝基菲羧酸和木脂素),优化超高效液相色谱(UHPLC)分离条件是必要的。为了优化这些标记化合物的分离,我们研究了流动相的pH值变化、化学组成以及乙酸铵(AmAc)浓度。反相超高效液相色谱(RP-UHPLC)对可电离化合物的保留作用强烈依赖于洗脱液的pH值,以及流动相中有机溶剂的百分比和浓度[1]。体外实验表明,异四氢萘啶是一种小分子抑制剂,能够调节脂多糖(LPS)诱导的炎症反应的多个方面。它以剂量依赖的方式抑制炎症反应的严重程度。研究表明,异四氢萘啶能够阻断视神经脊髓炎免疫球蛋白G(NMO-IgG)与水通道蛋白4(AQP4)的结合,提示其可能在视神经脊髓炎中发挥作用。它能够抑制MAPK和NF-κB信号通路,这解释了其广泛的抗炎作用。
体内研究 (In Vivo)
体内研究表明,异四氢帕马汀可通过抑制MAPK和NF-κB通路来减轻LPS诱导的急性肺损伤(ALI)的严重程度。这提示其可能减少组织氧化损伤和肺部炎症反应。这些体内研究证实了其抗炎活性,并提示其在治疗炎症性肺部疾病方面具有潜在应用价值。
酶活实验
异四氢帕马汀的体外活性通常在炎症细胞培养模型中进行评估,例如LPS刺激的巨噬细胞。在标准实验方案中,首先用LPS刺激巨噬细胞(例如RAW 264.7细胞)以诱导炎症反应。然后用不同浓度的异四氢帕马汀处理细胞。检测上清液中促炎细胞因子(例如TNF-α、IL-1β、IL-6)和一氧化氮(NO)的水平。通过Western blot验证MAPK和NF-κB活化的抑制情况。
细胞实验
在细胞实验中,异四氢萘醌通常溶于二甲基亚砜(DMSO)中,然后用细胞培养基稀释。细胞在脂多糖(LPS)刺激前用该化合物预处理一段时间。孵育后,评估细胞活力以确保该化合物无细胞毒性。使用酶联免疫吸附试验(ELISA)或类似方法定量分析其对炎症介质产生的影响。通过蛋白质印迹法分析磷酸化MAPK和NF-κB来评估其对信号通路的影响。
动物实验
异四氢帕马汀的体内疗效在炎症动物模型中进行评估,例如小鼠脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)模型。在这些研究中,小鼠被注射LPS以诱导ALI。异四氢帕马汀在LPS刺激前或刺激后给药。肺损伤的严重程度通过测量肺湿重/干重比、炎症细胞浸润以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症介质的水平来评估。
药代性质 (ADME/PK)
动物模型中的给药通常采用腹腔注射或口服的方式给予异四氢萘啶。该化合物将配制成合适的载体。将进行药代动力学研究以确定其吸收、分布、代谢和排泄情况,但搜索结果中未提供详细数据。其分子量和分子式符合双苄基异喹啉生物碱的典型特征。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
小鼠口服LD50为6400 mg/kg(日本药理学杂志,65(5)(176S), 1969);小鼠腹腔注射LD50为160 mg/kg(中国化学学报,24(2413), 1976 [PMID:1017086])。异四氢萘酚的安全性和毒性尚未得到充分证实。作为一种具有传统医学应用历史的天然产物,它通常被认为具有良好的安全性。然而,与任何生物活性化合物一样,在将其开发为治疗药物之前,需要进行全面的毒理学评估。其抑制PLA2的能力提示其可能对花生四烯酸代谢产生影响。
参考文献

[1]. UHPLC Separation of Structurally Diverse Markers in Fangchi Species. (2013).

其他信息
异四氢萘酚已在麝香薷(Atherosperma moschatum)、匍匐小檗(Berberis stolonifera)等生物体中被报道,并有相关数据。总之,超高效液相色谱(UHPLC)在节省时间、节省溶剂、性能和效率方面均优于高效液相色谱(HPLC)。此外,该方法具有良好的分离度、高灵敏度和分析时间短等优点,因此与HPLC相比,可实现更高的样品通量、更低的溶剂消耗和更小的进样量。本研究建立了一种快速简便的UHPLC-DAD方法,用于同时分析不同种防己属植物中的五种生物碱、马兜铃酸I和丁香酚。UHPLC-DAD可作为一种实用有效的工具,用于不同产地防己属植物的质量控制。[1]
异四氢萘酚是从防己(Stephania tetrandra)中分离得到的双苄基异喹啉生物碱。它是一种强效的细胞质磷脂酶A2 (PLA2) 抑制剂和α1肾上腺素受体阻滞剂。体外和体内实验均表明,它可通过抑制MAPK和NF-κB通路发挥抗炎作用。它是一种用于研究炎症及相关疾病的研究化合物,但尚未获批上市。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C38H42N2O6
分子量
622.7499
精确质量
622.304
元素分析
C, 73.29; H, 6.80; N, 4.50; O, 15.41
CAS号
477-57-6
PubChem CID
457825
外观&性状
White to light yellow solid powder
密度
1.2±0.1 g/cm3
沸点
710.5±60.0 °C at 760 mmHg
熔点
180-182ºC
闪点
175.8±30.1 °C
蒸汽压
0.0±2.3 mmHg at 25°C
折射率
1.586
LogP
3.55
tPSA
61.86
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
8
可旋转键数目(RBC)
4
重原子数目
46
分子复杂度/Complexity
979
定义原子立体中心数目
2
SMILES
CN1CCC2=CC(=C3C=C2[C@@H]1CC4=CC=C(C=C4)OC5=C(C=CC(=C5)C[C@@H]6C7=C(O3)C(=C(C=C7CCN6C)OC)OC)OC)OC
InChi Key
WVTKBKWTSCPRNU-XZWHSSHBSA-N
InChi Code
InChI=1S/C38H42N2O6/c1-39-15-13-25-20-32(42-4)34-22-28(25)29(39)17-23-7-10-27(11-8-23)45-33-19-24(9-12-31(33)41-3)18-30-36-26(14-16-40(30)2)21-35(43-5)37(44-6)38(36)46-34/h7-12,19-22,29-30H,13-18H2,1-6H3/t29-,30+/m0/s1
化学名
(11S,31R)-16,36,37,54-tetramethoxy-12,32-dimethyl-11,12,13,14,31,32,33,34-octahydro-2,6-dioxa-1(7,1),3(8,1)-diisoquinolina-5(1,3),7(1,4)-dibenzenacyclooctaphane
别名
Isotetrandrine; (R,S)-Tetrandrine; Isosinomenin A; Isotetrandrine; 477-57-6; (+)-Isotetrandrine; O-Methylberbamine; O,O'-Dimethylobamegine; Isosinomenine A
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.6058 mL 8.0289 mL 16.0578 mL
5 mM 0.3212 mL 1.6058 mL 3.2116 mL
10 mM 0.1606 mL 0.8029 mL 1.6058 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们