| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 1g | |||
| Other Sizes |
| 靶点 |
HIF/hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase (EC50 = 0.22 μM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
Enarodustat (JTZ-951)的 EC50 为 0.22 μM，使其成为缺氧诱导因子脯氨酰羟化酶的强口服活性抑制剂。 Enarodustat 对 hERG (IC50 > 100 μM) 或 CYP (IC50 > 100 μM; CYP3A4/5, CYP2C9, CYP2D6, CYP1A2, CYP2A6, CYP2C19, CYP2C8, CYP2B6) 没有影响 [1]。
之前的一些研究提供了证据，表明缺氧诱导因子（HIF）-脯氨酰羟化酶（PH）抑制剂对肾小管间质纤维化（TIF）具有治疗潜力。最近，肾间质成纤维细胞（RIF）转化为α-平滑肌肌动蛋白阳性肌成纤维细胞，同时其缺氧诱导型促红细胞生成素（EPO）表达丧失，被认为是肾性贫血TIF的核心机制（RIF假说）。这些报告表明，HIF-PH抑制剂可能通过抑制RIF的转化来抑制TIF。然而，由于没有合适的检测系统，HIF-PH抑制剂对RIF转化的直接影响尚未得到证实。在这里，我们建立了一种新的RIFs转化的体外模型。该模型表达了关键的表型变化，如RIF假说提出的RIF的转化，伴随着缺氧诱导型EPO表达的丧失。使用该模型，我们证明了新开发的HIF-PH抑制剂Enarodustat（JTZ-951）稳定了RIF中的HIF蛋白，抑制了RIF的转化，并保持了其缺氧诱导的EPO表达Enarodustat (JTZ-951)也抑制了FGF2、FGF7和FGF18的表达，这些在RIFs转化过程中上调。此外，在TIF动物模型中，Fgf2、Fgf7和Fgf18的表达与TIF相关。我们还证明，不仅FGF2是一种众所周知的生长促进因子，FGF18也促进了RIFs的增殖。这些数据表明，Enarodustat (JTZ-951)对伴有肾性贫血的TIF具有治疗潜力。此外，FGF2、FGF7和FGF18忠实地反映了Enarodustat (JTZ-951)的抗TIF作用，具有作为TIF生物标志物的潜力[3]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
每天给大鼠口服 enarodustat（1 和 3 mg/kg，po）会以剂量依赖性方式升高血红蛋白水平 [1]。
缺氧诱导因子（HIF）脯氨酰羟化酶抑制剂，也称为HIF稳定剂，可增加内源性促红细胞生成素的产生，并可作为治疗慢性肾病贫血的新型药物。HIF诱导与能量代谢相关的各种基因的表达，作为对缺氧的适应性反应。然而，尚不清楚HIF稳定在肾组织中的代谢重编程如何影响肾脏疾病的病理生理学。先前的研究表明，高血糖和血脂异常等全身代谢紊乱会导致肾代谢改变，导致肾功能障碍，包括糖尿病肾病。在这里，我们使用链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠和四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠，分析了口服HIF稳定剂Enarodustat（JTZ-951）对糖尿病肾病早期肾脏能量代谢的影响。转录组分析显示，Enarodustat (JTZ-951)能够抵消糖尿病肾代谢的改变。转录组分析显示，糖尿病肾组织中脂肪酸和氨基酸代谢上调，Enarodustat (JTZ-951)下调，而葡萄糖代谢上调。代谢组学分析证实了这些对称性变化。尽管糖酵解和三羧酸循环代谢产物在糖尿病动物的肾组织中积累，氨基酸减少，但这些代谢紊乱被Enarodustat (JTZ-951)缓解。此外，Enarodustat (JTZ-951)增加了糖尿病动物肾组织中谷胱甘肽与谷胱甘肽二硫化物的比率，缓解了氧化应激。因此，HIF的稳定作用抵消了早期糖尿病肾病中肾能量代谢的改变[2]。 |
| 酶活实验 |
酶活实验[1]
制备了人HIF-PHD2和VBC复合物的重组蛋白（人von Hippel-Lindau蛋白与GST标签、人Elongin B与Flag标签和人Elonging C与His标签的复合物）。酶反应在室温下用1 nM人HIF-PHD2、2µM 2-酮戊二酸、30 nM HIF-1α肽（生物素DLDLDLDLEMLAPYIPMDDDFQL）、0.5 mM抗坏血酸、0.25 mM FeSO4、120 mM NaCl、0.2 mM 3-[（3-氨基丙基）二甲基铵]丙磺酸酯（CHAPS）、0.1%牛血清白蛋白、50 mM tris-HCl（pH 7.5）和试验化合物（1%DMSO）进行10分钟；加入EDTA溶液以停止酶反应。然后是含有人VBC复合物、抗GST密码子和链霉抗生物素蛋白XLent的氟化钾溶液！加入FG-4592 N OH H N O OH O S37。使用HTRF®微孔板读数器在620 nm处测量波长为320 nm的能量供体的荧光强度，在665 nm处测量发光试剂的荧光强度以计算荧光强度比。 肝微粒体中的代谢稳定性[1] 14C-Enarodustat（JTZ-951）（终浓度：10µmol/L）在混合肝微粒体（蛋白质浓度：1 mg蛋白质/mL）存在下孵育，该微粒体由雄性大鼠（SD大鼠：400只动物）、雄性犬（比格犬：8只动物），雄性猴子（食蟹猴：10只动物）和男性和女性人类（25只雄性和25只雌性）制备，在烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）存在下于37°C下孵育两小时。反应后，通过放射高效液相色谱法测定样品中依那司他（JTZ-951）的含量。 CYP抑制试验[1] 在NADPH存在下，将Enarodustat (JTZ-951)（终浓度：0、1、3、10、30和100µmol/L）和每种CYP亚型（CYP1A2、2A6、2B6、2C8、2C9、2C19、2D6和3A4/5[睾酮和咪达唑仑]）的模型底物与由男性和女性人类（男性：31名受试者，女性：19名受试器）制备的人肝微粒体在37°C下孵育指定时间。孵育后，通过LC/MS/MS分析模型底物的代谢产物，并计算代谢率，以评估依那司他（JTZ-951）的抑制潜力。 |
| 细胞实验 |
Hep3B细胞中EPO的产生[1]
人Hep3B细胞购自美国典型培养物保藏中心，在含10%胎牛血清、100单位/mL青霉素和100µg/mL链霉素的Eagle MEM中在CO2培养箱（37°C，5%CO2）中培养。将这些细胞接种到96孔平底板中，第二天，以适当的浓度加入每种试验化合物，以评估EPO的产生。在加入每种测试化合物后24小时收集培养上清液。建立缺氧条件，计算EC50时，该条件下的EPO浓度定义为100%。用人EPO ELISA试剂盒测定培养上清液中的EPO浓度。 体外Caco-2通透性研究[1] 将试验化合物样品（终浓度：25µmol/L）加入Caco-2细胞单层的顶端，在37°C下孵育2小时。孵育后，通过液相色谱/串联质谱（LC/MS/MS）测量试验化合物的运输量。根据输送量计算表观渗透系数（Papp）。 hERG抑制试验[1] hERG电流通过全细胞膜片钳法测量。hERG转染的HEK293细胞在含有10%胎牛血清、1 mmol/L MEM丙酮酸钠溶液、0.1 mmol/L MEM非必需氨基酸溶液、100 U/mL青霉素、100µg/mL链霉素和400µg/mL遗传霉素的MEM溶液中培养。将盖玻片上的细胞放置在测量室中，并用外部溶液（单位为mM）对测量室进行超灌，该溶液含有（以mM计）：137 NaCl、4 KCl、1 MgCl2·6H2O、1.8 CaCl2·2H2O、10 HEPES和10葡萄糖（pH 7.4），保持在24±2°C。通过膜片钳放大器，用玻璃电极（电阻：2至6 MΩ）测量hERG电流，该电极填充有含有（以mM计）：130 KCl、1 MgCl2·6H2O、5 EGTA、10 HEPES和5 MgATP（pH 7.2）的内溶液。通过带有放大器的膜片钳软件将细胞膜电压保持在-80 mV。以15秒的间隔施加由+20 mV 1.5秒和-40 mV 1.5秒组成的测试脉冲。分析了用载体和供试品开始治疗前和治疗后11分钟的电流。 |
| 动物实验 |
EPO production in normal mouse and rat [1]
Male balb/c mice and CD (SD) rats were orally administered a single dose of 10 mg/kg [0.5% methyl cellulose (MC) suspension] of each of the test compounds (Enarodustat (JTZ-951)), and eight hours after the administration, the plasma samples were collected. The murine and rat plasma EPO concentrations were measured by ELISA kit or RIA kit, respectively. Erythropoiesis-stimulating effect in normal rat [1] The vehicle solution (0.5% MC) or test compound (Enarodustat (JTZ-951)) suspension at appropriate doses were administered orally to the male CD (SD) rats once daily for 28 days. Blood were collected from each rat to measure the hemoglobin concentrations using a hematology analyzer. Rat PK (IV, PO) [1] Male CD(SD) rats were intravenously or orally administered a single dose of Enarodustat (JTZ-951) at 0.3 mg/kg (60% dimethylsulfoxide solution) or 1.0 mg/kg (0.5% methylcellulose), respectively. After the administration, the plasma samples were collected over a period of 24 h. The time-course of the plasma concentrations of Enarodustat (JTZ-951) was analyzed by non-compartmental analysis and the pharmacokinetic parameters were calculated. |
| 药代性质 (ADME/PK) |
In terms of pharmacokinetic (PK) profiles, compound 14/Enarodustat (JTZ-951) was rapidly absorbed after oral administration in rats and disappeared shortly thereafter (Figure 3a,b). As Vachal and others have mentioned, the short-acting characteristics could be beneficial in reducing unpredictable adverse effects in light of the HIF-PHD mechanism. Compound 14/Enarodustat (JTZ-951) also had excellent solubility and metabolic stability (Figure 3c). In addition, it showed neither CYP (IC50 > 100 μM; CYP3A4/5, CYP2C9, CYP2D6, CYP1A2, CYP2A6, CYP2C19, CYP2C8, CYP2B6) nor hERG (IC50 > 100 μM) inhibition. Having these results, compound 14/Enarodustat (JTZ-951) was selected for a clinical candidate. [1]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
Enarodustat is under investigation in clinical trial NCT02581124 (Study to Evaluate Effect of Lapatinib on Pharmacokinetics of JTZ-951 in Subjects With End-stage Renal Disease).
Inhibition of hypoxia inducible factor prolyl hydroxylase (PHD) represents a promising strategy for the discovery of a next generation treatment for renal anemia. Researchers identified several 5,6-fused ring systems as novel scaffolds of the PHD inhibitor on the basis of pharmacophore analysis. In particular, triazolopyridine derivatives showed potent PHD2 inhibitory activities. Examination of the predominance of the triazolopyridines in potency by electrostatic calculations suggested favorable π-π stacking interactions with Tyr310. Lead optimization to improve the efficacy of erythropoietin release in cells and in vivo by improving cell permeability led to the discovery of Enarodustat (JTZ-951) (compound 14), with a 5-phenethyl substituent on the triazolopyridine group, which increased hemoglobin levels with daily oral dosing in rats. Compound 14 was rapidly absorbed after oral administration and disappeared shortly thereafter, which could be advantageous in terms of safety. Compound 14 was selected as a clinical candidate.[1] |
| 分子式 |
C17H17CLN4O4
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|---|---|
| 分子量 |
376.794282674789
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| 精确质量 |
376.093
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| 元素分析 |
C, 54.19; H, 4.55; Cl, 9.41; N, 14.87; O, 16.98
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| CAS号 |
1262131-60-1
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| 相关CAS号 |
Enarodustat;1262132-81-9
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| PubChem CID |
67049587
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| tPSA |
111
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
26
|
| 分子复杂度/Complexity |
674
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(O)CNC(C1=C(O)C=C(CCC2=CC=CC=C2)N3C1=NC=N3)=O.[H]Cl
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| InChi Key |
BPZAJOSLAXGKFI-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H16N4O4.ClH/c22-13-8-12(7-6-11-4-2-1-3-5-11)21-16(19-10-20-21)15(13)17(25)18-9-14(23)24/h1-5,8,10,22H,6-7,9H2,(H,18,25)(H,23,24)1H
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| 化学名 |
(7-Hydroxy-5-phenethyl-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyridine-8-carbonyl)glycine hydrochloride
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| 别名 |
JTZ-951; JTZ 951; JTZ951 HCl; JTZ-951 hydrochloride; 1262131-60-1; CHEMBL4166742; JTZ-951 HCl; SCHEMBL1481939; BDBM50286071; JTZ 951 hydrochloride
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6540 mL | 13.2700 mL | 26.5400 mL | |
| 5 mM | 0.5308 mL | 2.6540 mL | 5.3080 mL | |
| 10 mM | 0.2654 mL | 1.3270 mL | 2.6540 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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