(Leu31,Pro34)-Neuropeptide Y (porcine)   中文名称: [亮氨酸31,脯氨酸34]-神经肽Y,人,猪

Y1 receptor (IC50 = 3.8 nM for displacing [125I-Tyr36]NPY in SK-N-MC cells; Kd = 5.5 nM in saturation binding) [1]
NPY Y1 receptor (agonist) [2]
(Leu31,Pro34)-Neuropeptide Y (porcine) targets the neuropeptide Y Y1 receptor. It is a selective and high-affinity agonist for this receptor, with a Ki of 0.54 nM. The Y1 receptor is one of the major NPY receptor subtypes and mediates many of the central and peripheral effects of NPY, including vasoconstriction, anxiolysis, and appetite stimulation. The compound's selectivity for Y1 over other NPY receptor subtypes (Y2, Y4, Y5) makes it a valuable tool for studying Y1-specific functions.

在表达Y1受体的SK-N-MC细胞中，猪源[Leu31,Pro34]神经肽Y能够置换[125I-Tyr36]单碘-NPY，IC50值为3.8 nM，与NPY的效力几乎相当。在表达Y2受体的SMS-KAN细胞中，其效力则降低了约1000倍（IC50 > 100 nM）。使用[125I-Tyr36]单碘-[Leu31,Pro34]神经肽Y（猪源）进行饱和结合实验，在SK-N-MC细胞上测得其Kd值为5.5 nM，Bmax值为2.3×10^5个结合位点/细胞。 [1]在用Fura-2负载的SK-N-MC细胞中，[Leu31,Pro34]神经肽Y（猪源）（100 nM）引起胞质游离钙离子浓度([Ca2+]i)的瞬时升高，与NPY类似，而C端片段NPY-(16-36)则无此作用。[1]体外实验表明，(Leu31,Pro34)-神经肽Y（猪源）是不同细胞系和组织中Y1受体的高效选择性配体。它具有很高的结合亲和力，Ki值为0.54 nM。其作为Y1受体激动剂的活性已在多种体外模型中得到证实。该化合物选择性激活Y1受体的能力使研究人员能够解析该受体亚型在NPY信号通路中的具体生理作用。

[Leu31,Pro34]-神经肽Y（猪）可替代放射性标记的NPY，用于多种人类神经母细胞瘤细胞系和表达Y1受体的PC-12大鼠细胞[1]。在麻醉大鼠中，静脉注射[Leu31,Pro34]神经肽Y（猪）（0.25、2.5、25 nmol/kg）可引起动脉血压剂量依赖性升高。其引起血管收缩的效力约为NPY的5倍（0.25和2.5 nmol/kg时P < 0.05）。同时观察到心率下降。在最高剂量（25 nmol/kg）下，血压短暂升高后出现持续性低血压。 [1] 在大鼠中，单侧杏仁核内注射猪源性[Leu31,Pro34]神经肽Y（5 和 10 nM）显著增加了高架十字迷宫（EPM）测试中进入开放臂的时间百分比和次数，表明其具有抗焦虑样作用。预先注射α-MSH（250 ng）可逆转这些作用，并且与亚有效剂量的MC4-R拮抗剂HS014（1 nM）具有协同作用。未观察到对进入封闭臂次数的显著影响，排除了运动功能改变的可能性。[2] 在体内，猪源性[Leu31,Pro34]神经肽Y具有活性，并已被证明可升高血压，其效力甚至高于NPY本身。这种效应是通过Y1受体介导的，已知Y1受体可介导血管收缩。该肽还具有抗焦虑作用。其体内活性证实了其作为药理学工具在研究中枢和周围神经系统中Y1受体功能方面的应用价值。

使用人神经母细胞瘤细胞系（Y1 用 SK-N-MC 细胞，Y2 用 SMS-KAN 细胞）和大鼠 PC-12 细胞进行受体结合实验。将细胞在聚赖氨酸-丙氨酸 (poly(Lys-Ala)) 包被的 6 孔板中预培养 2 天。竞争性结合实验中，每孔加入 1.2×10⁶ 个细胞，并加入 50,000 cpm 的放射性配体（[¹²⁵I-Tyr³⁶]单碘-NPY 或 [¹²⁵I-Tyr³⁶]单碘-[Leu³¹,Pro³⁴]神经肽 Y（猪源），比活度约为 1900 Ci/mmol）和不同浓度的未标记肽，在 1 ml 终体积中于 37°C 孵育 60 分钟。非特异性结合在 1 μM NPY 存在下测定。孵育后，用冷缓冲液洗涤细胞三次，用0.5 M NaOH裂解细胞，并进行计数。IC50值由置换曲线计算得出。饱和结合实验使用低比活度（18 Ci/fmol）的放射性配体。解离常数（Kd）计算为5.5 nM。[1]
体外(Leu31,Pro34)-神经肽Y（猪）受体结合实验用于测定其与Y1受体的亲和力。标准实验方案包括使用表达重组人或大鼠Y1受体的细胞膜进行竞争性结合实验。使用放射性标记的NPY或特异性Y1拮抗剂作为示踪剂。将递增浓度的肽与受体膜孵育，并测量示踪剂的置换。Ki值为0.54 nM，由竞争曲线计算得出。

使用荧光探针Fura-2测定细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)。收集SK-N-MC细胞，洗涤后重悬于3×10^6个细胞/ml的浓度下。将Fura-2乙酰甲酯（由1 mM二甲基亚砜储备液配制而成）加入到终浓度为2.5 μM的溶液中，并在室温下避光孵育30分钟。离心后，将细胞重悬于含150 mg/L牛血清白蛋白的Hepes缓冲液（145 mM NaCl、5 mM KCl、1 mM MgSO4、10 mM葡萄糖、10 mM Hepes，pH 7.4）中，细胞浓度为2.5×10^6个细胞/ml。在37℃下，通过轻柔搅拌保持细胞悬浮，使用荧光分光光度计测定Fura-2荧光强度，激发波长为340 nm，发射波长为500 nm。 [Ca2+]i 的计算方法参照 Grykiewicz 等人的方法[1]。体外细胞实验采用表达 Y1 受体的细胞系，例如神经母细胞瘤细胞系或 PC-12 细胞，对 (Leu31,Pro34)-神经肽 Y（猪源）进行检测。用该肽处理细胞，并通过量化下游信号事件（例如 cAMP 积累或钙动员的抑制）来测量受体激活情况。根据剂量反应曲线确定这些功能反应的 EC50 值，从而证实该化合物对 Y1 受体具有强效激动剂活性。

[1] 动物实验方案：选用非禁食的雌性Sprague-Dawley大鼠（190-210 g），用戊巴比妥钠麻醉。在右侧颈静脉置入导管，用于静脉注射测试化合物。在颈动脉置入另一根导管，连接血压传感器。对气管进行插管以辅助呼吸。持续记录血压和心率。心血管稳定后，每只大鼠以10分钟的间隔依次接受0.25、2.5和25 nmol/kg的肽。当测试猪源性神经肽Y（[Leu31,Pro34]NPY）时，在实验结束时额外给予NPY（2.5 nmol/kg）。肽溶于1 mM乙酸，并在注射前立即用0.05 M磷酸钠缓冲液稀释，以获得1 ml/kg的剂量体积。 [1][2] 动物实验方案：雄性Sprague-Dawley大鼠（220-250 g）用硫喷妥钠（40 mg/kg，腹腔注射）麻醉后，固定于立体定位仪上。使用以下坐标：后方2.3 mm，中线外侧4.5 mm，前囟下方8.0 mm，将一根永久性22号不锈钢导管单侧植入右侧杏仁核。导管用牙科水泥和固定螺钉固定。术后恢复7天后，大鼠开始适应操作。将[Leu31,Pro34]猪源神经肽Y溶解于人工脑脊液（aCSF，pH 7.4，含0.1%牛血清白蛋白）中，通过33号微量注射套管以1 μl的体积在1分钟内注射，该套管向下延伸0.5 mm。注射套管在体内停留1分钟以利于药物扩散。最后一次注射后15分钟，对大鼠进行高架十字迷宫（EPM）测试，持续5分钟，并记录其进入开放臂和封闭臂的时间和次数。[2] [Leu31,Pro34]猪源神经肽Y的体内动物研究通常在啮齿动物中进行。对于心血管研究，将该肽静脉注射到麻醉的大鼠体内，并监测血压。在行为学研究中，肽类药物通过中枢途径（例如脑室内注射）给药，并使用高架十字迷宫或明暗箱测试等行为学测试来评估其抗焦虑作用。这些研究用于阐明Y1受体的生理和行为功能。

标准参考文献中未详细列出(Leu31,Pro34)-猪源神经肽Y的具体药代动力学数据。作为一种肽类，预计它会在体循环中迅速降解。中枢给药后的作用提示其可能在大脑局部发挥作用。对于外周效应，例如血压升高，该肽的作用迅速且短暂。其药代动力学特性与神经肽类似物类似，具有生物利用度有限和半衰期短的特点。

由于(Leu31,Pro34)-猪源神经肽Y是一种研究工具，因此通常不报告其全面的毒理学数据。其毒理学特征与其对Y1受体的药理作用有关，包括血管收缩，高剂量时可能导致高血压。其抗焦虑作用是一种药理作用，但过量使用可能导致行为改变。任何治疗性药物的开发都需要进行标准的安全性评估。

[1]. [Leu31, Pro34]neuropeptide Y: a specific Y1 receptor agonist. Proc Natl Acad Sci U S A. 1990 Jan;87(1):182-6.

[2]. Interaction between neuropeptide Y and alpha-melanocyte stimulating hormone in amygdala regulates anxiety in rats. Brain Res. 2005 May 10;1043(1-2):107-14.

[Leu31,Pro34]猪源神经肽Y是一种基于PP折叠结构的合成NPY类似物。在34位引入脯氨酸（来自胰多肽）被认为是其差异性受体结合的关键结构变化。与NPY-(13-36)不同，它不与Y2受体结合。该类似物可用于NPY受体亚型的放射自显影定位，并用于确定Y1和Y2受体在NPY生物效应中的相对重要性。[1]在杏仁核中，[Leu31,Pro34]猪源神经肽Y作为Y1受体激动剂，产生类似抗焦虑的作用，这种作用可被α-MSH通过黑皮质素-4受体（MC4-R）拮抗。抗焦虑作用可能是由于抑制内源性POMC衍生物的释放所致。该类似物与MC4-R拮抗剂HS014联合使用时，亚有效剂量可产生协同抗焦虑作用，这可能是通过协同抑制腺苷酸环化酶活性实现的。[2]
(Leu31,Pro34)-神经肽Y（猪源）是神经肽Y Y1受体的选择性高亲和力激动剂，Ki值为0.54 nM。它具有抗焦虑作用，并被用于研究NPY/PYY受体亚型的分布。在体内，它升高血压的效力比NPY更强。该类似物是研究Y1受体在神经系统和心血管系统中生理作用的重要研究工具。它目前尚未获批上市。

C190H286N54O56

4222.63208246231

4222.125

125580-28-1

90479761

White to off-white solid powder

-14

1780

61

63

131

300

10500

37

O=C([C@H](CCCCN)NC([C@H](CO)NC([C@@H]1CCCN1C([C@H](CC1C=CC(=CC=1)O)N)=O)=O)=O)N1CCC[C@H]1C(N[C@@H](CC(=O)O)C(N[C@@H](CC(N)=O)C(N1CCC[C@H]1C(NCC(N[C@H](C(N[C@@H](CC(=O)O)C(N[C@@H](C)C(N1CCC[C@H]1C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(N[C@@H](C)C(N[C@@H](CC(C)C)C(N[C@@H](CCCNC(=N)N)C(N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(N[C@@H](CC1C=CC(=CC=1)O)C(N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(N[C@@H](CC(N)=O)C(N[C@@H](CC(C)C)C(N[C@@H](CC(C)C)C(N[C@@H]([C@@H](C)O)C(N[C@@H](CCCNC(=N)N)C(N1CCC[C@H]1C(N[C@H](C(N[C@H](C(N)=O)CC1C=CC(=CC=1)O)=O)CCCNC(=N)N)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)CC1C=CC(=CC=1)O)=O)CC1C=CC(=CC=1)O)=O)CCCNC(=N)N)=O)C)=O)CC(C)C)=O)CC(=O)O)=O)CCC(=O)O)=O)C)=O)=O)=O)=O)CCC(=O)O)=O)=O)=O)=O)=O

ZNBZLZXDILRJJT-CCPZSHQESA-N

InChI=1S/C190H286N54O56/c1-16-96(10)150(180(294)234-130(82-142(193)253)168(282)225-124(74-94(6)7)164(278)226-125(75-95(8)9)171(285)239-151(101(15)247)181(295)221-120(32-22-66-208-190(202)203)185(299)243-70-26-36-140(243)177(291)219-116(31-21-65-207-189(200)201)156(270)222-121(152(195)266)77-103-40-50-109(249)51-41-103)238-172(286)128(80-106-46-56-112(252)57-47-106)229-167(281)129(81-107-87-204-91-210-107)230-158(272)115(30-20-64-206-188(198)199)218-163(277)123(73-93(4)5)223-155(269)98(12)212-173(287)135(89-245)236-166(280)127(79-105-44-54-111(251)55-45-105)228-165(279)126(78-104-42-52-110(250)53-43-104)227-157(271)114(29-19-63-205-187(196)197)216-153(267)97(11)211-161(275)122(72-92(2)3)224-169(283)132(85-148(262)263)232-160(274)118(59-61-146(258)259)217-154(268)99(13)213-176(290)138-34-24-67-240(138)182(296)100(14)214-162(276)131(84-147(260)261)231-159(273)117(58-60-145(256)257)215-144(255)88-209-175(289)137-33-23-69-242(137)186(300)134(83-143(194)254)235-170(284)133(86-149(264)265)233-178(292)141-37-27-71-244(141)184(298)119(28-17-18-62-191)220-174(288)136(90-246)237-179(293)139-35-25-68-241(139)183(297)113(192)76-102-38-48-108(248)49-39-102/h38-57,87,91-101,113-141,150-151,245-252H,16-37,58-86,88-90,191-192H2,1-15H3,(H2,193,253)(H2,194,254)(H2,195,266)(H,204,210)(H,209,289)(H,211,275)(H,212,287)(H,213,290)(H,214,276)(H,215,255)(H,216,267)(H,217,268)(H,218,277)(H,219,291)(H,220,288)(H,221,295)(H,222,270)(H,223,269)(H,224,283)(H,225,282)(H,226,278)(H,227,271)(H,228,279)(H,229,281)(H,230,272)(H,231,273)(H,232,274)(H,233,292)(H,234,294)(H,235,284)(H,236,280)(H,237,293)(H,238,286)(H,239,285)(H,256,257)(H,258,259)(H,260,261)(H,262,263)(H,264,265)(H4,196,197,205)(H4,198,199,206)(H4,200,201,207)(H4,202,203,208)/t96-,97-,98-,99-,100-,101+,113-,114-,115-,116-,117-,118-,119-,120-,121-,122-,123-,124-,125-,126-,127-,128-,129-,130-,131-,132-,133-,134-,135-,136-,137-,138-,139-,140-,141-,150-,151-/m0/s1

(4S)-4-[[2-[[(2S)-1-[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]acetyl]amino]-5-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S,3S)-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S,3R)-1-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-1-[[(2S)-1-amino-3-(4-hydroxyphenyl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-carboxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-carboxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-carboxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

H2O : ≥ 100 mg/mL (~23.68 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。