| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The primary target of Magainin 2 is the lipid matrix of cell membranes, specifically anionic phospholipids such as phosphatidylglycerol (PG), phosphatidylserine (PS), and phosphatidic acid (PA). The peptide does not require chiral proteinaceous receptors, as all-D enantiomers are fully active. [2]
The interaction with acidic lipopolysaccharides (LPS) on the outer surface of Gram-negative bacteria is also a target. [2] The peptide dissipates the electric potential across energy-transducing membranes, uncoupling respiration from energy-requiring processes. [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
Magainin 2 可导致大肠杆菌早期凋亡过程中的形态改变,并表现出杀菌作用。大肠杆菌的 RecA 蛋白(一种类半胱天冬酶蛋白)的表达受 Magainin 2 的影响,Magainin 2 还会导致对半胱天冬酶底物具有亲和力的细菌蛋白的表达[1]。Magainin 2 通过增加细胞膜的通透性来杀死细菌,而不会对哺乳动物细胞构成严重威胁。人们认为细胞膜的脂质基质是该肽的主要靶点。当天然的尾草履虫暴露于 10 μg/mL 的 Magainin 2 时,会导致其在池塘水中发生渗透性肿胀并最终破裂。这表明该肽可能干扰维持渗透平衡的细胞膜功能[2]。Magainin 2 以截然不同的方式增加哺乳动物和细菌细胞膜的通透性。在巨大芽孢杆菌中,该肽会产生直径约为2.8 nm(小于6.6 nm)的孔洞,并转运至细胞质中。另一方面,该肽会严重破坏CHO-K1细胞膜,使大分子(大于23 nm)能够通过膜出芽和脂质翻转进入细胞质,这主要导致这些分子在细胞核和线粒体中积累[3]。
Magainin 2对多种革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均表现出抗菌活性。最低抑菌浓度(MIC)分别为:肺炎克雷伯菌 10 μg/ml,恶臭假单胞菌 10 μg/ml,表皮葡萄球菌 10 μg/ml,弗氏柠檬酸杆菌 30 μg/ml,阴沟肠杆菌 50 μg/ml,大肠杆菌 50 μg/ml,金黄色葡萄球菌 50 μg/ml,白色念珠菌 80 μg/ml,铜绿假单胞菌 100 μg/ml,粘质沙雷氏菌 100 μg/ml,而奇异变形杆菌和粪链球菌在浓度 >100 μg/ml 时表现出耐药性。 [1] Magainin 2对大肠杆菌D31具有杀菌作用:浓度为10 μg/ml时,可不可逆地降低其存活率。[1] Magainin 2浓度为10 μg/ml时,可导致尾状草履虫发生渗透性肿胀,并在数分钟内破裂,肿胀前其仍保持游动能力(纤毛功能)。对变形虫和眼虫也观察到类似效应。[1] Magainin 2在磷酸盐缓冲液中浓度高达150 μg/ml时,对人红细胞无溶血作用,而蜂毒肽(一种来自蜂毒的26个氨基酸的两亲性肽)在低得多的浓度下即可引起溶血。 [1] Magainin 2 优先结合并促进含有酸性磷脂(PG、PS、PA)的双层膜的通透性,其作用机制是通过静电相互作用。它对两性离子磷脂酰胆碱(PC)的亲和力极弱。胆固醇掺入 PS 双层膜会抑制其膜通透性活性。[2] Magainin 2 在脂质体和线粒体内膜上形成直径约 1 nm 的孔或结构缺陷,允许分子量高达 623 Da(钙黄绿素)的分子通过,但不能通过胰蛋白酶(24 kDa)。孔的寿命强烈依赖于肽的净电荷。[2] Magainin 2 的膜通透性与肽浓度的 3 到 6 次方成正比,表明有多个肽分子参与其中(平均每个孔包含五个螺旋)。孔道的形成是短暂的,并且与肽转运至内层膜偶联,后者会使孔道失活。[2] Magainin 2 在每个囊泡结合数百个肽分子的条件下,可诱导卵肽聚糖大单层囊泡 (LUV) 释放可测量的染料,表明其活性部分约为 1%。[2] 野生型 Magainin 2 的电荷分布(净 +4)经过优化,通过实现强结合和适中的孔道稳定性,展现出最大的溶血活性。增加净正电荷会增强与带负电荷膜的结合,但会降低孔道的稳定性;减少电荷则会降低结合效率。[2] 带正电荷的螺旋面所对的角度调节孔道的形成:将角度从 80° 增加到 180° 会使孔道形成活性降低 5 倍。[2] |
| 细胞实验 |
标准抗菌活性测定采用大肠杆菌D31。将细菌在LB培养基中培养至OD600为0.8(相当于10⁹ CFU/ml),然后取10⁶个细菌加入到含有8 ml 0.7%琼脂糖的LB培养基中,并将该培养基倾倒在盛有50 ml 1.5%琼脂糖的LB培养基的150 mm培养皿上。通过检测加入不同组分后琼脂表面细菌生长的抑制情况来测定抗菌活性。其他微生物的测定方法与此相同,也可采用液体培养法。液体培养法测定时,将不同组分加入到100 μl菌悬液中,该菌悬液由对数生长期中期液体培养物稀释至10⁵个细胞/ml,培养基为标准TSB培养基(pH 7.5)。37℃孵育4小时后,测定OD600值。 [1]
溶血试验中,将Magainin 2或蜂毒肽加入到100 μl浓度为10% (v/v) 的人红细胞磷酸盐缓冲液悬液中。样品在37°C孵育10分钟,然后以10,000 × g离心10分钟以去除细胞和碎片,并通过测量上清液的OD350值来确定溶血情况。加入0.1% Triton X-100定义为100%溶血。[1] 原生动物试验中,将尾草履虫暴露于浓度为10 μg/ml的Magainin 2池塘水或1% TSB蒸馏水中;观察伸缩泡肿胀和随后的细胞破裂。 [1] 为了通过荧光猝灭实验确定螺旋取向,我们合成了三种Magainin 2的类似肽,它们分别在第5、12或16位用Trp残基取代了Phe残基。与母体肽相比,这些衍生物被证实具有完全活性。使用多西磷脂酰胆碱进行的荧光猝灭实验表明,每个Trp残基都位于距离双层膜中心约1 nm处,表明螺旋位于头部区域。[2] 为了进行钙黄绿素释放实验,我们利用钙黄绿素(分子量623)的自猝灭特性来评估孔道寿命和膜通透性。将Magainin 2添加到脂质体中,并监测染料释放动力学。观察到的染料外流偏离一级动力学,并在约10分钟内停止,表明孔道失活。 [2] 为了检测转位,将F12W Magainin 2与标记的脂质体孵育,并通过胰蛋白酶消化或用大量未标记的脂质体提取去除残留在外层膜上的未转位肽。利用肽的色氨酸残基与掺入膜中的丹酰磷脂酰乙醇胺(dansyl-PE)之间的荧光共振能量转移来检测转位。[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在有效抗菌浓度下,Magainin 2 不具有溶血性。在以人红细胞为对象的溶血试验中,Magainin 2 在磷酸盐缓冲液中浓度高达 150 μg/ml 时均未引起溶血,而蜂毒肽(一种溶血性两亲肽)在低得多的浓度下即可引起溶血。[1] Magainin 2 对哺乳动物细胞无明显毒性。其选择性毒性至少部分归因于其与细菌膜中丰富的阴离子磷脂的优先相互作用,而哺乳动物细胞膜由两性离子磷脂组成,并含有大量胆固醇,胆固醇会抑制 Magainin 的活性。[2]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
据报道,非洲爪蟾含有magainin 2肽,相关数据可供参考。
“magainin”一词源于希伯来语“magain”,意为“盾牌”,反映了其可能具有抗菌屏障的功能。[1] Magainin 2(23个氨基酸)的氨基酸序列为:GIGKFLHSAKKFGKAFVGEIM NS(与magainin 1不同的残基已加下划线;magainin 1与Magainin 2有两个氨基酸替换)。[1] 计算机检索显示,Magainin 2与GenBank数据库中任何原核或真核生物蛋白质均无显著同源性。 [1] 前体部分cDNA序列显示,Magainin 2编码于一个包含三个magainin序列的较大蛋白质中,每个序列均被推定的蛋白水解切割位点(氨基末端的精氨酸和羧基末端的赖氨酸-精氨酸二肽)以及分别由6个和7个氨基酸组成的共同前导序列和尾随序列所包围。[1] Magainin 2与酸性磷脂双层结合时呈现α螺旋构象,其螺旋度在60-90%之间,具体数值取决于实验条件。在中性pH水溶液中,它几乎没有或完全没有明确的二级结构。 [2] 固态核磁共振和荧光猝灭研究表明,在低肽脂比下,Magainin 2 螺旋平行于双层膜表面(表面取向),但当肽脂比高于 1:30 时,其开始垂直插入膜表面。[2] 基于色氨酸取代类似物与肽聚糖膜的 S 形结合等温线,当结合的肽脂比高于 0.02 时,Magainin 2 会形成寡聚体(二聚体或三聚体)。在较低 pH 值或高盐浓度(0.5 M NaCl)下,可观察到直径为 13 nm 的原纤维。 [2] 中子衍射显示,Magainin 2 的孔道结构为环状,其中脂质分子自身弯曲(如同环面内部),而阿拉美辛的孔道则为桶状。孔道内衬由两亲性螺旋的极性面和脂质的极性头部组成,允许脂质分子在双层膜之间进行横向扩散。[2] 施加内侧负跨膜电位可促进阳离子 Magainin 2 的易位。[2] Magainin 2 触发离子、脂质和肽自身之间的偶联跨膜转运(翻转)。脂质翻转速率与脂质头部结构无关,脂质向内和向外的移动速率相同,而肽几乎单向地转运到内层膜。 [2] |
| 分子式 |
C114H180N30O29S
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|---|---|
| 分子量 |
2466.8976
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| 精确质量 |
2465.33
|
| CAS号 |
108433-95-0
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| PubChem CID |
16130189
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
4.913
|
| tPSA |
982.43
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
33
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
36
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| 可旋转键数目(RBC) |
86
|
| 重原子数目 |
174
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| 分子复杂度/Complexity |
5180
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| 定义原子立体中心数目 |
21
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| SMILES |
CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC3=CC=CC=C3)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC4=CC=CC=C4)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)CN
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| InChi Key |
MGIUUAHJVPPFEV-ABXDCCGRSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C114H180N30O29S/c1-12-65(7)94(142-88(148)55-119)112(170)124-59-90(150)129-74(38-24-28-45-116)100(158)137-81(51-70-33-19-15-20-34-70)106(164)135-79(49-63(3)4)105(163)138-83(53-72-56-121-62-125-72)107(165)140-85(60-145)110(168)127-67(9)96(154)131-75(39-25-29-46-117)101(159)132-76(40-26-30-47-118)102(160)136-80(50-69-31-17-14-18-32-69)98(156)122-57-89(149)128-73(37-23-27-44-115)99(157)126-68(10)97(155)134-82(52-71-35-21-16-22-36-71)109(167)143-93(64(5)6)111(169)123-58-91(151)130-77(41-42-92(152)153)104(162)144-95(66(8)13-2)113(171)133-78(43-48-174-11)103(161)139-84(54-87(120)147)108(166)141-86(61-146)114(172)173/h14-22,31-36,56,62-68,73-86,93-95,145-146H,12-13,23-30,37-55,57-61,115-119H2,1-11H3,(H2,120,147)(H,121,125)(H,122,156)(H,123,169)(H,124,170)(H,126,157)(H,127,168)(H,128,149)(H,129,150)(H,130,151)(H,131,154)(H,132,159)(H,133,171)(H,134,155)(H,135,164)(H,136,160)(H,137,158)(H,138,163)(H,139,161)(H,140,165)(H,141,166)(H,142,148)(H,143,167)(H,144,162)(H,152,153)(H,172,173)/t65-,66-,67-,68-,73-,74-,75-,76-,77-,78-,79-,80-,81-,82-,83-,84-,85-,86-,93-,94-,95-/m0/s1
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| 化学名 |
(4S)-4-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[2-[[(2S,3S)-2-[(2-aminoacetyl)amino]-3-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]hexanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]propanoyl]amino]hexanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]acetyl]amino]hexanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]acetyl]amino]-5-[[(2S,3S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(1S)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-4-methylsulfanyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~50 mg/mL (~20.27 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.4054 mL | 2.0268 mL | 4.0537 mL | |
| 5 mM | 0.0811 mL | 0.4054 mL | 0.8107 mL | |
| 10 mM | 0.0405 mL | 0.2027 mL | 0.4054 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。